книги2 / 77

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЭКСТРАКТА ИЗ ПЛОДОВ РЯБИНЫ, СОДЕРЖАЩЕГО ФЕНОЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, В ПРОФИЛАКТИКЕСТРЕССОВЫХ НАРУШЕНИЙ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА

Момот Т.В.

ФГАОУ ВО Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, [e-mail]

В настоящее время изучена и доказана роль стресса как этиопатогенетического фактора ишемической болезни сердца, гипертонической болезни, атеросклероза и др., которые существенно сокращают продолжительность жизни. В связи с этим необходимо проведение специальных профилактических и коррекционных мер с целью укрепления здоровья, что обеспечит повышение биологического и профессионального долголетия. В наших предыдущих исследованиях из отходов после отделения сока калины, осей соцветий винограда и лимонника был выделен суммарный полифенольный комплекс и было доказано, что он, в условиях экспериментального стрессвоздействия, обладает мембрано-, гепатопротекторным и антирадикальным действием. В нашей стране рынок отечественных стресс-протекторов на основе природных соединений очень ограничен, что требует поиска других видов растительного сырья. Целью работы явилось изучение влияния экстракта из отжима плодов рябины (Sorbus amurensis Koechne) при экспериментальном стресс-воздействии.

Исследовано влияние водно-спиртового экстракта (40%), полученного методом реперколяции из отжима плодов рябины, на показатели липидного обмена печени крыс. В состав экстракта входили катехины, кверцетин, флавонолы, лигнин, органические кислоты, каротиноиды и ряд других органических соединений. В качестве препарата сравнения использовался полифенольный комплекс из аптечного экстракта элеутерококка. Эксперимент проводился на белых крысах-самцах линии Вистар с массой тела 180-200 г., содержащихся в стандартных условиях вивария и на стандартном рационе питания. Стресс вызывали путем вертикальной фиксации животных за дорзальную шейную складку на 24 часа. Экстракты вводили животным внутрижелудочно через зонд в дозе 0,4 мл/100 г массы 2 раза в сутки (до вертикальной фиксации и через 4 часа после). Водные растворы сухого остатка экстракта отжима плодов рябины и экстракта элеутерококка (предварительно освобожденный от спирта аптечный экстракт путем упаривания в вакууме) вводили в количестве 100 мг общих полифенолов/кг массы тела. Животные были разделены на 4 группы по 10 крыс в каждой: 1-контрольная (интактные животные), 2 - стресс, 3 - стресс+экстракт рябины, 4 – стресс+экстракт элеутерококка. В печени крыс при стрессе наблюдалось достоверное увеличение концентрации свободных жирных кислот (СЖК), что может быть связано с активацией процессов липолиза в жировой ткани вследствие увеличения продукции катехоламинов, которое характерно для развития стресс-реакции. Вертикальная фиксация крыс сопровождалась увеличением содержания триацилглицеринов в печени, уменьшением количества эфиров жирных кислот и эфиров холестерина, возрастанием содержания лизофосфатидилхолина и лизофосфатидилэтаноламина (1,5-2 раза).

При введении экспериментальным животным экстракта из отжима плодов рябины (3-я группа) в период стресса наблюдалась коррекция биохимических нарушений. Снижалось содержание СЖК до контрольных величин, что может быть обусловлено ингибированием липаз полифенолами препарата, уменьшилось количество лизофракций фосфолипидов и возрастание содержания фосфатидилхолина. Увеличение количества эфиров жирных кислот свидетельствует о сохранении этерифицирующей функции печени и биосинтеза фосфолипидов. Таким образом, экстракт из отжима плодов рябины показал антистрессорное действие, которое определяется входящими в его состав биологически активными природными полифенолами, дающими возможность сохранения метаболических реакций липидного обмена.

201

РАЗРАБОТКА СОСТАВА, ТЕХНОЛОГИИ И НОРМ КАЧЕСТВА СИРОПА НА ОСНОВЕ ЛИГНАНОСОДЕРЖАЩЕГО СЫРЬЯ – СОКА СВЕЖИХ ПЛОДОВ

ЛИМОННИКА КИТАЙСКОГО

Морозов Ю.А.

ФГБОУ ВО Северо-Осетинский государственный университет им.К.Л.Хетагурова, Владикавказ, [e-mail]

В настоящее время в силу сложившейся сложной геополитической обстановки в мире, разработка отечественных лекарственных препаратов становится всё более актуальным вопросом. При этом одним из перспективных направлений в данной области является заготовка лекарственного растительного сырья (ЛРС), производство на его основе эффективных фитопрепаратов и утилизация соответствующих отходов производства. Для реализации данной стратегии необходимо разрабатывать технологии, позволяющие комплексно использовать ЛРС, так как в большинстве случаев в отходах могут содержаться биологически активные вещества (БАВ) в достаточно большом количестве.

Так, на базе семян лимонника китайского (Schisandra chinensis (Turcz.) Baill.), нами предложена технология получения углекислотного экстракта и эфирного масла с последующим введением их в состав трансдермальных лекарственных форм (ЛФ) (патент РФ № 2715894), а также разработан состав и технология таблеток для рассасывания (заявка на патент РФ № 2019109748 от 02.04.2019). Процесс заготовки семян подразумевает получение свежего сока, содержащего достаточное количество разнообразных групп БАВ (органические кислоты, различные фенольные соединения, витамины, полисахариды, макро- и микроэлементы, лигнаны), позволяющих использовать его в качестве исходного сырья для производства фитопрепаратов и биологически активных добавок к пище тонизирующего и общеукрепляющего действия, в кондитерской и ликероводочной промышленности.

Поэтому целью работы явилась разработка и фармацевтико-технологические исследования корригированной ЛФ – сиропа на основе сока свежих плодов лимонника.

С помощью биофармацевтических исследований in vitro (диализ через полупроницаемые мембраны) выбран оптимальный состав сиропа (на 500,0 г продукта): фруктоза 258,3; вода очищенная 91,7; сок свежих плодов лимонника 150,0. С помощью микробиологических исследований доказана целесообразность введения в ЛФ в качестве консерванта натрия бензоата в 0,5% концентрации от общей массы ЛФ. Следует отметить, что для предложенного состава определены такие показатели как осмотическая активность (6760 mOsmol/kg), плотность (1,365 г/см3), динамическая вязкость (810,604 мПа·с).

Оценку качества фитопрепарата (как и биофармацевтические исследования) проводили в соответствии с методикой, приведенной в Государственной Фармакопее Российской Федерации 14 издания путем определения количественного содержания суммы лигнанов в пересчете на схизандрин (по дифенилу) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. В качестве основной, данная группа БАВ выбрана в связи с тем, что лигнаны являются доминирующими веществами лимонника (содержатся во всех частях растения) как по содержанию, так и по проявлению адаптогенного действия. Лигнаны – это димерные соединения фенольной природы, состоящие из двух фенилпропановых фрагментов (С6-С3), связанных между собой β-углеродными атомами боковых цепей.

Количественное содержание суммы лигнанов в пересчете на схизандрин (по дифенилу) составило: в соке свежих плодов – 0,531% ± 0,011%; в сиропе – 0,158% ± 0,008%.

Экспериментально на клетках Paramecium caudatum установлено, что предложенный сироп токсические явления не вызывает и обладает явно выраженным адаптогенным действием.

Таким образом, на основании результатов всесторонних экспериментальных исследований предложен сироп адаптогенного действия на основе сока свежих плодов лимонника китайского.

202

ЧЕРНУШКА ПОСЕВНАЯ КАК ПЕРСПЕКТИВНЫЙ СЫРЬЕВОЙ ИСТОЧНИК ФЛАВОНОИДОВ

Мубинов А.Р., Авдеева Е.В., Куркин В.А.

ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения РФ, Самара, [e-mail]

В настоящее время возрастает интерес к проблеме поиска в мире растений новых источников биологически активных соединений и рационального использования соответствующих видов лекарственного растительного сырья. Одним из перспективных видов является чернушка посевная (Nigella sativa L.), сем. Лютиковые (Ranunculaceae). Наибольшую изученность и популярность имеют масло и семена чернушки, для которых описаны гепатопротекторное, липолитическое, противомикробное, антиоксидантное, противовирусное и другие виды фармакологического действия.

При этом недостаточная изученность надземной части (травы чернушки посевной) не позволяет использовать весь потенциал растения в медицинской и фармацевтической практике, тем более с позиции комплексной переработки. В этой связи целью настоящего исследования являлось изучение фитохимического состава травы чернушки посевной.

Объектом исследования служила трава чернушки посевной («Нора здоровья», Египет), выращенная в Ботаническом саду Самарского университета; сырье заготовлено в июле 2021 г. в период цветения и плодоношения. Для обнаружения и идентификации соединений фенольной природы были использованы колоночная и тонкослойная адсорбционная хроматография (ТСХ) и спектрофотометрия. С помощью специфических реактивов (3% спиртового раствора AlCl3 и раствора диазореактива) методом ТСХ было выявлено наличие флавоноидов. Путем сравнения с достоверно известными образцами веществ к ним отнесены рутин, никотифлорин и другие. Методом колоночной (препаративной) хроматографии с использованием различных сорбентов (силикагеля, полиамида, сефадекса) и элюентных смесей в различных соотношениях (хлороформ, этанол, вода) получены путем кристаллизации и перекристаллизации из различных растворителей доминирующие по содержанию в сырье флавоноидные соединения.

С учетом получения характерных для флавоноидов спектров спирто-водных извлечений из сырья (что также подтверждено спектрами выделенных индивидуальных соединений) была разработана методика количественного определения методом дифференциальной спектрофотометрии суммы флавоноидов в траве чернушки посевной в пересчете на стандартный образец рутин. Содержание суммы флавоноидов в сырье чернушки посевной в пересчёте на рутин составило 1,17±0,05%. Ошибка единичного определения с доверительной вероятностью 95% составила ± 1,45 %.

Полученные данные о химическом составе травы чернушки посевной показывают перспективность ее дальнейшего изучения для введения в научную фармацию в качестве официнального вида сырья, и, соответственно, решения комплекса взаимосвязанных вопросов - стандартизации, комплексного использования растения, получения и изучения лекарственных препаратов на основе травы чернушки посевной (Nigella sativa L.)

203

ПОЛИФЕНОЛЬНЫЕ ЭКСТРАКТЫ ИЗ ФУКУСА ПУЗЫРЧАТОГО НА ОСНОВЕ ПРИРОДНЫХ ГЛУБОКИХ ЭВТЕКТИЧЕСКИХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ

Облучинская Е.Д.

ФГБУН Мурманский морской биологический институт РАН, Мурманск, [e-mail]

Морские водоросли рассматриваются как природный источник биологически активных соединений и достаточно давно используются в составе пищевых и лечебно-профилактических компонентов. Бурые водоросли представляют собой выдающийся источник биоактивных метаболитов, которые могут стать функциональными лидерами в разработке новых фармацевтических препаратов. Некоторые виды морских водорослей, в частности фукус пузырчатый (Fucus vesiculosus L.), являются одним из важнейших источников коммерчески преобладающих метаболитов, в основном полисахаридов и полифенолов. Среди многочисленных классов водорослей семейство бурых водорослей (Phaeophyceae) занимает видное место по содержанию фенольных соединений. Важнейшие категории фенолов бурых водорослей включают флоротаннины, терпеноиды, фенольные пигменты и бромфенолы.

Разработка экологически чистого и эффективного метода экстракции биологически активных соединений из фитобиомассы – современное направление в фармацевтической, косметической и пищевой промышленности. Природные глубокие эвтектические растворители (ПГЭР) являются перспективной альтернативой органическим растворителям и приобрели популярность, поскольку являются экологически чистыми, нетоксичными, биоразлагаемыми и регенерируемыми. Растворимость целевых соединений в ПГЭРах значительно увеличивается за счет образования водородных связей с растворенными веществами.

Цель исследования – применить природные глубокие эвтектические растворители (ПГЭР) для одновременного извлечения гидрофильных и липофильных биоактивных соединений бурых арктических водорослей (на примере F. vesiculosus L. Баренцева моря) и оценить эффективность экстракции разными методами по содержанию полифенолов, а также аскорбиновой кислоты и фукоксантина.

Объектом исследования служили свежие бурые водоросли Fucus vesiculosus L., собранные в прибрежном районе губы Завалишина Баренцева моря (Россия). ПГЭР готовили методом совместного нагревания: в качестве акцептора использовали молочную кислоту, глюкозу или хлорид холина в качестве доноров водородной связи в соответствующем мольном соотношении.

ПГЭР были подобраны для одновременного извлечения гидрофильных полифенолов и липофильных биоактивных соединений из F. vesiculosus на основании серии предварительных экспериментов. Эффективность экстракции двумя способами (экстракцию с помощью ультразвука и традиционную экстракцию мацерацией) оценивали по содержанию аскорбиновой кислоты, фукоксантина и флоротаннинов. Биологическую активность экстрактов контролировали с помощью теста на антиоксидантную активность. Кроме того, было изучено влияние некоторых соединений на антиоксидантную активность и способность ПГЭР стабилизировать экстракты.

Установлено, что ПГЭР, помимо их нейтрального воздействия на окружающую среду, обеспечивают синергический эффект и высокую стабильность компонентов экстрактов, сохраняя их биологическую активность.

204

УЭЖХ-МСВР АНАЛИЗ СОСТАВА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ПРЕПАРАТА «ЭВКАЛИМИН», ПОЛУЧЕННОГО ИЗ РАСТЕНИЙ

EUCALYPTUS VIMINALIS L.

Осипов В.И., Мизина П.Г.

ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений, Москва, [e-mail]

Растения эвкалипта (Myrtaceae) синтезируют и накапливают большое количество различных фенольных соединений, включая производные флороглюцина: макрокарпали, эуглобали, эвкалиптоны, сидероксилоны и другие, которые состоят из формилированных флороглюцинов с присоединенными фрагментами монотерпенов и сесквитерпенов. Установлено, что производные флороглюцина обладают широким спектром биологической активности. Во Всероссийском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР, Москва, Россия), на основе экстракта неполярных метаболитов из растений Еucalyptus viminalis, был разработан препарат «Эвкалимин», который обладает фармакологической активностью и широко применяются в дерматологии, стоматологии, генекологии, урологии, проктологии, при лечении воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей. Однако, состав соединений «Эвкалимина», определяющих его фармакологическую активность, был изучен недостаточно полно.

Всвязи с этим, целью исследования был анализ химического состава «Эвкалимина» с применением системы ультраэффективной жидкостной хроматографии (УЭЖХ) в сочетании с масс-спектрометрией высокого разрешения (МСВР) (Thermo Scientific Q Exactive Orbitrap massspectrometer). Этот метод дает очень точную и надежную МС и МС/МС информацию для достоверной идентификации метаболитов растений.

Врезультате, в составе «Эвкалимина» были обнаружены и идентифицированы 24 фенольных соединений (изопентилдиформилфлороглюцин, макрокарпали А, В, С, G, I, J, am1, каллистенон К, сидероксилоны и другие), а также п-кумароил и ферулоил производные лактона дегидроурсоловой кислоты (Ossipov et al., 2020). В количественном отношении, основными соединениями «Эвкалимина» были макрокарпали A и B, лактон дегидроурсоловой кислоты и его фенольные производные.

Таким образом, обнаруженные ранее противомикробная и противовоспалительная активности препарата «Эвкалимина» вероятно обусловлены присутствием фенольных соединений производных флороглюцина. Кроме того, результаты изучения химического состава свидетельствуют о том, что фармакологическая активность «Эвкалимина» может быть значительно более разнообразной, чем это было установлено ранее.

Литература:

1. Ossipov, V.I., Koivuniemi, A., Mizina, P.G., Salminen, J.-P. (2020). UPLC-PDA-Q Exactive OrbitrapMS profiling of the lipophilic compounds product isolated from Eucalyptus viminalis plants. Heliyon 6, e05768. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2020.e05768.

205

ФИТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ RUMEX TIANSCHANICUS LOSINSK

Осканов Б.С., Корулькин Д.Ю.

НАО Казахский национальный университет им. Аль-Фараби, Алматы, Казахстан, [e-mail]

Во флоре Казахстана описано 23 вида растений рода Rumex L., произрастающих по всей территории республики.

В различные годы был частично изучен состав 17 отечественных видов щавелей. Для различных видов Rumex L. описаны антисептическая, бактерицидная, противовирусная, фунгицидная, Р-витаминная, детоксикационная, рострегулирующая, противовоспалительная, противоопухолевая и фотосенсибилизирующая активность; слабительное, вяжущее, кожное и радиозащитное действие. Однако, несмотря на столь широкий спектр описанного биологического

действия этих видов,	в официнальную медицину внедрено только 2	вида щавелей:
Rumex confertus Willd. и	Rumex tianschanicus Losinsk. Для производства	фитопрепаратов
рекомендовано использовать корни и корневища этих видов.

Целью нашего исследования было расширение сырьевой базы казахстанского вида щавеля тяньшанского. Для этого нами было проведено сравнительное фитохимическое исследование содержания основных групп биологически активных веществ Rumex tianschanicus Losinsk. по органам растения (корни, стебли, листья, соцветия). Растительное сырье было заготовлено нами в 2021 г в предгорьях Заилийского Алатау.

Для количественного анализа БАВ нами были использованы фармакопейные и общепринятые методики. Полученные результаты представлены в таблице.

Таблица. Фитохимический состав БАВ щавеля тяньшанского по органам растения, в % от массы абсолютно сухого сырья

	Корни	Стебли	Листья	Соцветия
Аминокислоты	2.04	2.31	2.68	1.56
Антрахиноны	4.53	3.02	2.16	1.92
Белки	8.58	7.96	7.12	5.34
Витамин С	0.15	0.24	0.28	0.13
Дубильные вещества	22.36	20.83	16.54	4.07
Кумарины	1.74	1.38	0.91	0.36
Полисахариды	4.91	5.25	4.37	3.62
Стероиды	1.22	1.57	1.45	0.38
Феноло- и окси-	0.09	0.14	0.16	0.11
коричные кислоты
Флавоноиды	3.07	4.46	4.82	4.54
Эфирные масла	0.68	0.85	1.13	1.26

Из данных таблицы видно, что максимальное содержание антраценроизводных, белков, гидролизуемых танинов и кумаринов накапливается в корневой системе растения; для надземных органов щавеля отмечено превалирование по содержанию аминокислот, антоцианидинов, аскорбиновой кислоты, полисахаров, стероидов, феноло- и оксикоричных кислот, флавоноидов и эфирных масел.

Представленные данные свидетельствуют о целесообразности промышленной заготовки не только корней и корневищ щавеля тяньшанского для производства фитопрепаратов, но и надземной части растения, которая, в качестве сырья для производства витаминных препаратов, и препаратов противовирусного, противовоспалительного и противоопухолевого действия является более перспективной.

206

КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ АНТРАХИНОНОВЫХ МЕТАБОЛИТОВ КАЗАХСТАНСКИХ ВИДОВ RUMEX L.

Осканов Б.С., Құрайыш Т.А., Корулькин Д.Ю.

НАО Казахский национальный университет имени аль-Фараби, Алматы, Казахстан, [e-mail]

Все антрацен-производные в различной степени обладают инсектицидной, антидерматической, противовоспалительной и противоопухолевой активностью, притом установлено, что кожное действие более ярко выражено для антронов и антранолов, слабительный эффект характерен для гликозидированных производных, в особенности димерной структуры, фотосенсибилизирующая активность более выражена для олигомеров антрахиноновой природы.

На территории Казахстана произрастает большое количество богатых антрахинонами растений, относящихся к семействам бобовые, норичниковые, мареновые, крушиновые и гречишные, причем последние, наиболее широко представлены в отечественной флоре.

Целью нашего исследования было сравнительное исследование компонентного состава антрахиноновых метаболитов в казахстанских видах рода Rumex L., имеющих промышленные запасы.

Экстракцию антрахинонов проводили по стандартной методике, хроматографическим разделением гексанового и хлороформного экстрактов растительного сырья на силикагеле с последующим выделением индивидуальных антрацен-производных и их идентификацией с использованием аутентичных образцов методом ВЭЖХ на колонке с Lichrospher RP18, при градиентном элюировании водным метанолом в качестве подвижной фазы, состава (от 45:55 до 80:20 за 45 мин) с использованием УФ детектора (254 нм).

Полученные данные представлены в таблице, в % от содержания в абсолютно сухом сырье:

	Rumex tianschanicus	Rumex	Rumex
	Losinsk	confertus Willd.	acetosa L.
1-О-α-L-арабинопиранозил-3-метил-	0.181	-	0.142
6,8-диоксиантрахинон
1-О-β-D-глюкопиранозил-6-метил-3,8-	0.235	0.168	0.097
диоксиантрахинон
5-О-β-D-глюкопиранозил-2-метил-4-	0.268	0.144	-
оксиантрахинон
1-О-β-D-глюкопиранозил-6,8-	0.323	0.085	0.113
диметокси-3-метилантрахинон
2-карбокси-4,5-диоскиантрахинон	0.217	0.418	0.325
3-метил-5,7-диметокси-2,4-	0.176	-	0.064
диоксиантрахинон
3-метил-6-метокси-1,8-	0.279	-	0.101
диоксиантрахинон
2-метил-4,5-диоксиантрахинон	0.341	0.383	0.428
6-метил-1,3,8-триоксиантрахинон	0.464	0.229	0.356
4,5-диокси-2-оксиметилантрахинон	0.402	0.296	0.287

Из данных таблицы следует, что изучаемые виды щавелей характеризуются разнообразным составом веществ антрахиноновой природы, обладающих широким спектром физиологического действия, что указывает на перспективность использования казахстанских видов в качестве сырья для производства фитопрепаратов.

207

ВЫДЕЛЕНИЕ, УСТАНОВЛЕНИЕ СТРУКТУРЫ И ОЦЕНКА АНТИАГРЕГАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ФЛАВОНОИДНОЙ ПРИРОДЫ

Повыдыш М.Н., Орлова А.А., Уэйли А.К., Понкратова А.О., Лукашов Р.И., Шпакова В.С., Богоутдинова А.М., Гамбарян С.П.

ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет Минздрава России, Санкт-Петербург, [e-mail]

Отечественная фармацевтическая промышленность производит фитопрепараты, как правило, содержащие сумму биологически активных веществ (далее – БАВ). Развитие хроматографических методов анализа позволило осуществлять разделение веществ, содержащихся в многокомпонентных природных смесях и выделять чистые вещества из природного сырья. Фармакологические исследования показывают их значительно более высокую эффективность по сравнению с суммарными экстрактами.

Целью данного исследования являлась оценка возможности создания препаратов антиагрегантного действия на основе индивидуальных природных соединений флавоноидной природы.

Для достижения данной цели осуществляли препаративное выделение, подтверждение структуры и наработку индивидуальных природных соединений из следующих лекарственных растений (ЛР): морошка обыкновенная (Rubus chamaemorus L.), касатик молочно-белый (Iris lactea Pall.) и стальник полевой (Ononis arvensis L.).

Предварительный фитохимический анализ ЛР проводили методами ВЭТСХ и ВЭЖХ-УФ. Выделение веществ в индивидуальном виде проводили с использованием открытой колоночной хроматографии на сорбентах с различной селективностью. Полученные после колоночной хроматографии фракции подвергали препаративной ВЭЖХ. При установлении структуры выделенных веществ применяли УФ-спектроскопию, ЯМР-спектроскопию и масс-спектрометрию высокого разрешения. Данные о структуре выделенных соединений позволили выявить перспективные для дальнейшей наработки БАВ, а также провести предварительный скрининг их фармакологического потенциала методами in silico. По результатам скрининга был выбран ряд веществ для исследования их действия на тромбоциты: апигенин, апигенин-8-C-(4'-O-β-D- глюкопиранозил)-β-D-глюкозид, 5-гидрокси-7,4'-диметоксифлавон-8-C-(2-O-a-L- рамнопиранозил)-b-D-глюкопиранозид (изоэмбинин), 2''',3'''-диацетилэмбинин, 3''',4'''- диацетилэмбинин, эмбинин, 2'''-O-ацетилэмбинин, 2''',4'''-O-ацетилэмбинин, 3'''-O-ацетилэмбинин, формононетин-7-О-β-D-глюкопиранозид. Предпочтение отдавали новым природным соединениям или соединениям, впервые выделенным из исследуемых ЛР.

Исследование антиагрегантной активности проводили на тромбоцитах человека, выделенных из крови здоровых доноров. Агрегацию тромбоцитов оценивали методом регистрации изменения малоуглового светорассеяния. Уровень активации тромбоцитов оценивали по степени связывания активированных интегринов αIIbβ3 с фибриногеном, меченым флуоресцентным красителем AlexaFluor 647. Для оценки экстернализации фосфатидилсерина (PS) использовали аннексин V, конъюгированный с фикоэритрином. Анализ проводили на проточном цитофлуориметре. Для оценки влияния исследуемых соединений на апоптоз тромбоцитов, исследовали активацию каспазы 3 методом Вестерн-блот анализа.

По результатам изучения влияния выделенных веществ на ингибирование активации тромбоцитов на различных моделях, наиболее перспективными соединениями для дальнейшей разработки препаратов антиагрегантного действия, в частности препаратов для профилактики и лечения последствий новой коронавирусной инфекции, оказались формононетин-7-О-β-D- глюкопиранозид, эмбинин и его ацетаты.

208

ФЕНОЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ PERSICARIA LAPATHIFOLIA,

ПРОЯВЛЯЮЩИЕ ПРОТИВОВИРУСНЫЕ СВОЙСТВА

Проценко М.А., Кукушкина Т.А.*, Филиппова Е.И., Лобанова И.Е.*, Храмова Е.П.*, Мазуркова Н.А.

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирская обл., р.п. Кольцово

*ФГБУН Центральный Сибирский ботанический сад СО РАН, Новосибирск, [e-mail]

Вирус гриппа был и остается трудно контролируемой инфекцией, в том числе, по причине быстропротекающих мутаций, из-за чего формируется устойчивость штаммов вируса гриппа к противовирусным препаратам. Поэтому поиск новых более эффективных противогриппозных средств будет актуален всегда.

Перспективными источниками активных веществ, обладающих противовирусными свойствами в отношении вируса гриппа, являются высшие растения. Горец развесистый Persicaria lapathifolia (L.) Delarbre из семейства Polygonaceae содержит в своем составе халконы, флавонолы, танины, катехины и галловую кислоту. Среди агликонов флавоноидов идентифицированы кверцетин и кемпферол [0,0,0].

Из высушенной травы Persicaria lapathifolia, собранной в окрестностях села Березовка Тогучинского района Новосибирской области в 2018 году, получали экспериментальный образец препарата с повышенным содержанием фенольных соединений. Растительное сырье последовательно экстрагировали 96 %, 70 % и 50 % этиловым спиртом. После упаривания этанола водный экстракт обрабатывали хлороформом. Затем сгущенный водный экстракт обрабатывали этилацетатом. Для удаления воды к экстракту прибавляли безводный сульфат натрия и отфильтровывали. Этилацетат отгоняли до начала образования осадка. Тонкой струей вливали полученный образец в хлороформ. Выпавший осадок желтого цвета отфильтровывали и высушивали под вакуумом [0].

Полученный образец исследовали на токсичность и противовирусную активность in vitro в отношении вируса гриппа A. Вирусингибирующие свойства оценивали по изменению инфекционности вируса гриппа (титра) в монослое клеток MDCK в профилактической схеме внесения образцов и вирусов. Индексы нейтрализации вируса гриппа штаммов A/Aichi/2/68 (H3N2) и A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) под действием экспериментального образца препарата составляли 4,50 и 3,25 lg соответственно.

Установленные противовирусные свойства образца препарата Persicaria lapathifolia являются перспективнымидля дальнейшего изучения с целью разработки технологии новых противогриппозных препаратов.

Литература:

1.Высочина Г.И. Фенольные соединения в систематике и филогении семейства гречишные (Polygonaceae Juss.) Cообщ. III. Род Горец – PersicariA Mill. // Turczaninowia. 2008. Т. 11. №4. С. 129–

2.Кукушкина Т.А., Зыков А.А., Обухова Л.А. Манжетка обыкновенная (Alchemilla vulgaris L.) как источник лекарственных средств // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы VII Междунар. съезда. СПб., 2003. С. 64–69.

3.Лукша Е.А. Биологическая активность видов Persicaria и Polygonum (Polygonaceae) флоры Сибири // Растительные ресурсы. 2015. Т. 5. № 5. С. 611-619.

4.Лобанова И.Е., Филиппова Е.И., Кукушкина Т.А., Проценко М.А., Храмова Е.П., Мазуркова Н.А., Высочина Г.И. Сравнительная оценка противовирусной активности экстрактов некоторых высших растений в отношении вируса гриппа А in vitro // Химия в интересах устойчивого развития. 2021. Т.

29.№ 6. С. 675-682.

209

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ БАРХАТЦЕВ ОТКЛОНЕННЫХ РАЗЛИЧНЫХ СОРТОВ

Савельева А.Е., Куркина А.В.

ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, Самара, [e-mail]

Лекарственное растительное сырье (ЛРС) широко используется в современной фармацевтической промышленности для получения целого ряда лекарственных растительных препаратов, эффективных при лечении многих заболеваниях и оказывающих минимальные побочные эффекты. Особый интерес представляет ЛРС, содержащее флавоноиды, благодаря широкому спектру фармакологической активности.

Бархатцы отклонённые (Tagetes patula L.) являются ценным источником биологически активных соединений, в том числе и флавоноидов. Интерес к бархатцам отклоненных связан также с многообразием его сортовых форм. Однако имеющиеся на данный момент научные работы не полностью охватывают разнообразие сортовых форм бархатцев.

Целью исследования являлось сравнительное фитохимическое исследование надземной части бархатцев отклоненных, оставшейся после сбора цветков.

Нами были исследованы извлечения из травы восьми различных сортов бархатцев отклоненных. Согласно результатам ТСХ анализа все сорта имеют схожий химический состав. Определено, что наиболее информативными являются хроматограммы, полученные в системе растворителей: хлороформ – этанол – вода (25:18:2), просматриваемые при длине волны 366 нм до и после обработки спиртовым раствором AlCl3.

Нами было установлено, что флавоноидный состав водно-спиртовых извлечении из травы бархатцев отклонённых значительно отличается от водно-спиртового извлечения из цветков бархатцев отклоненных, в котором методом ТСХ в присутствии растворов стандартных образцов подтверждено наличие патулетина и патулетрина. При этом в водно-спиртовом излечении из травы данного растения обнаружены другие флавоноиды, выделение и идентификация которых будет проведена в ходе дальнейших исследований.

С целью разработки методики количественного определения суммы флавоноидов в траве бархатцев отклоненных были изучены УФ-спектры раствора водно-спиртового извлечения из данного сырья. Установлено, что вещества, близкие по спектральным характеристикам к рутину, во многом определяют характер кривой поглощения водно-спиртового извлечения из травы бархатцев отклоненных. Определено, что в УФ-спектрах и раствора рутина, и раствора исследуемого извлечения с добавлением спиртового раствора алюминия хлорида наблюдается батохромный сдвиг длинноволновой полосы флавоноидов в область 404-408 нм.

В УФ-спектре водно-спиртового извлечения из травы бархатцев отклоненных в дифференциальном варианте обнаруживается максимум поглощения при длине волны 412 нм ±2 нм, который практически соответствует максимуму поглощения спиртового раствора рутина (дифференциальный вариант).

Результаты исследования зависимости различных параметров экстракции на выход флавоноидов из сырья показали, что оптимальными параметрами экстракции являются: степень измельчения сырья до размера частиц 2 мм, однократное извлечение 70% этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 45 минут в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:50. Определено, что содержание суммы флавоноидов в исследуемых образцах травы бархатцев отклоненных варьирует от 1,68 ± 0,05% до 2,94 ± 0,05% (в пересчете на рутин). Ошибка единичного определения содержания суммы флавоноидов в траве бархатцев отклоненных с доверительной вероятностью 95 % составляет ±3,86 %.

210