6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Руководство_ВОЗ_по_исследованию_и_обработке_эякулята

Приложение 7 Ошибки расчета и контроль качества 289

спермы вдоль поверхности стекла. Контролируйте натяжение спермы вдоль поверхности предметного стекла: не совершайте толчков при движении вдоль стекла. Тщательность необходима, чтобы приготовить мазок малой толщины, иначе могут возникнуть наложения клеток, скручивания сперматозоидов и более темное окрашивание фона. Отделение сперматозоидов на предметном стекле зависит от объема спермы и ее концентрации, угла наклона шпателя в процессе приготовления мазка (чем меньше угол, тем тоньше мазок) (Hotchkiss, 1945) и скорости растягивания капли (более быстрое движение, толще мазок) (Eliasson, 1971).

9.Повторите пункты 6–8 для остальных предметных стекол, создавая только один мазок после перемешивания эякулята, чтобы избежать осаждения сперматозоидов. Если возникает пауза более пары секунд после перемешивания, сперму следует еще раз перемешать перед взятием аликвоты.

10.Если методика приготовления мазка отлажена, после каждого перемешивания можно приготовить 2–3 мазка. Аликвоты следует забирать сразу же после перемешивания, 2–3 мазка готовят сразу же настолько быстро, насколько это возможно, желательно в течение нескольких секунд.

A7.8 Калибровка оборудования

•Пипетки, счетные камеры и другое оборудование следует калибровать каждые 6–12 месяцев.

A7.8.1 Весы

•Весы следует проверять регулярно с помощью внутреннего калибратора и проводить внешнюю калибровку по время регулярного сервисного обслуживания.

•Калибруйте весы с помощью взвешивания стандартных весов (то есть 1, 2, 5 и 10 г для покрытия диапазона, используемого при взвешивании спермы).

•Повторите измерения 10 раз и вычислите среднее, среднеквадратичное отклонение (SD) и коэффициент вариации (CV) (= 100 × SD/среднее).

•Оцените точность (которая обуславливает разброс весов внутри интервала 2SD от измеряемого среднего).

A7.8.2 Пипетки

•Калибруйте пипетки путем аспирирования дистиллированной воды до градуировки и сбрасывания ее в тару для взвешивания.

•Рассчитайте аспирированный объем по весу воды, исходя из плотности 1 г/мл.

Важно: Плотность воды уменьшается с температурой (Lentner, 1981). Она равна 0.9982 г/мл при 20о C, 0.9956 г/мл при 30о C и 0.9922 г/мл

290 Приложение 7 Ошибки расчета и контроль качества

при 40о C. Однако для калибровки оборудования допустимо значение 1,0 г/мл.

•Повторите измерения 10 раз и вычислите среднее, среднеквадратичное отклонение (SD) и коэффициент вариации (CV) (= 100 × SD/среднее).

•Оцените точность (которая обуславливает разброс объемов внутри интервала 2SD от измеряемого среднего).

A7.8.3 Глубина камер

•Измерьте глубину камеры, используя нониусы на фокусе точной настройки микроскопа. Сфокусируйтесь сначала на сетке камеры, а затем на чернильной точке вне покровного стекла. Измерьте число делений между двумя точками.

•Повторите измерения 10 раз и вычислите среднее, среднеквадратичное отклонение (SD) и коэффициент вариации (CV) (= 100 × SD/среднее).

•Оцените точность (которая обуславливает разброс глубин внутри интервала 2SD от измеряемого среднего).

A7.8.4 Инкубаторы

•Температуру в инкубаторе и нагревательных поверхностей следует проверять с помощью термометра, который, в свою очередь, регулярно калибруется.

•Смесь CO2 следует проверять ежедневно по показаниям инкубатора, с помощью другого газового анализатора еженедельно либо ежеме-

сячно и взятием газовой пробы во время сервисного обслуживания.

A7.8.5 pH бумага

• Следует проверять по известным стандартным рН.

A7.8.6 Другое оборудование

•Остальное лабораторное оборудование и реагенты, такие как рН-метр, следует также проверять раз в 3–6 месяцев.

Литература

Armitage P et al. (2002). Statistical methods in medical research. Oxford, Blackwell Science.

Brazil C et al. (2004). Quality control of laboratory methods for semen evaluation in a multicenter research study. Journal of Andrology, 25:645-656.

Eliasson R (1971). Standards for investigation of human semen. Andrologia, 3:49-64.

Hotchkiss RS (1945). Fertility in man. London, William Heineman Medical Books. Jørgensen N et al. (2001). Regional differences in semen quality in Europe.

Human Reproduction, 16:1012-1019.

Lentner C (1981). Geigy scientific tables. Vol. 1: Units of measurement, body fluids, composition of the body, nutrition. Basel, Ciba-Geigy.

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

291

ПРИЛОЖЕНИЕ 8 Национальные программы внешнего контроля качества семиологического анализа

Австралия: Fertility Society of Australia, External Quality Assurance Schemes for Reproductive Medicine, PO Box 1101, West Leederville, Western Australia 6901, Australia

Дания: Dansk Institut for Ekstern Kvalitetssikring for Laboratorieri, Sundhedssektoren, DEKS 54MI, Herler Universitets sygehns, Herler Ringvej 75, 2730 Herlor, Denmark

Германия: QuaDeGA, Centrum fu¨r Reproduktionsmedizin und Andrologie der Universita¨tsklinikum, Domagkstrasse 11, D-48129 Mu¨nster, Germany

Италия: Valutazione Esterna di Qualitа, Gruppo Controllo Qualitа Analitico Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna, Policlinico Sant’OrsolaMalpighi, Bologna, Italy

Швеция: NAFA (Nordic Association for Andrology), Andrology Unit, Reproductive Medicine Centre, Karolinska Hospital, PO Box 140, SE-171 76 Stockholm, Sweden

Испания: Centro de Estudio e Investigacio´n de la Fertilidad (CEIFER), Granada, Spain

Англия: UKNEQAS Schemes for Andrology, Department of Reproductive Medicine, St Mary’s Hospital, Manchester M13 0JH, United Kingdom

США: American Association of Bioanalysts Proficiency Testing Service, 205 West Levee, Brownsville, Texas 78520-5596, USA

Научно-практическое издание

Руководство ВОЗ

По исследованию и обработке эякулята человека

ПЯТОЕ ИЗДАНИЕ

Перевод с английского к.б.н. Н. П. Макаровой

Научный редактор д.б.н., проф. Л. Ф. Курило

Подписано в печать 06.09.2012 г. Формат 60×90/8. Гарнитура «PragmaticaC». Печ. л. 38,5. Тираж 1000 экз. Заказ №

ЗАО «Издательство «КАПИТАЛ ПРИНТ»

e-mail: [e-mail] Адрес сайта: www.informkorm.ru

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Это руководство предназначено для научных сотрудников, лаборантов и руководителей, использующих семиологический анализ в клинической и исследовательской практике лаборатории.

Пятое издание предоставляет обновленные, обоснованные, подробные протоколы для рутинного, дополнительного, исследовательского анализа, с целью повышения качества и стандартизации семиологического анализа и повышения сопоставимости результатов, полученных в разных лабораториях.

Особенности нового издания:

•Легкий в использовании формат, который включил в себя подробную информацию по каждой процедуре.

•Дополнительный материал, объясняющий рассматриваемые методы и помогающий интерпретировать результаты;

•Множество подробных микрофотографий, приведенные для примеров различных форм аномалии сперматозоидов;

•Разделы о подготовке эякулята для исследования и его криоконсервации;

•Обоснованные референсные значения и референсные пределы различных характеристик (показателей) эякулята.

ISBN 978 5 905106 09 05