6 курс / Медицинская реабилитация, ЛФК, Спортивная медицина / Успехи геронтологии 2011 №01. Том 24
.pdfУСПЕХИ ГЕРОНТОЛОГИИ • 2011 • Т. 24 • № 1
ежемесячно взвешивали. Для каждой группы находили среднее значение массы животных и ошибки среднего. Динамику возрастных изменений отслеживали у каждого отдельно взятого животного. При обнаружении у крыс опухолевого роста или воспалительных процессов их исключали из опыта.
Подопытных и контрольных животных декапитировали в утренние часы, чтобы избежать суточных колебаний метаболизма. Извлекали мозг, печень и немедленно помещали их в ледяной физиологический раствор. Готовили гомогенаты тканей: навески мозга и печени гомогенизировали в трехкратном объеме (масса ткани/объем) физиологического раствора. Часть полученных гомогенатов обрабатывали тритоном Х-100 (конечная концентрация 0,1 %) и инкубировали в течение 10 мин при 37 °С. Для определения содержания МДА ткани мозга и печени гомогенизировали в 0,2 М трис- HCl-буфере, рН 7,4 (1 г ткани/10 мл буфера). Для получения плазмы крови забор крови производили в центрифужные пробирки с добавлением раствора гепарина (25 ЕД/мл). Полученную кровь центрифугировали в течение 15 мин при 3000 об/мин, затем производили отбор плазмы крови для дальнейших исследований. Осадок эритроцитов после отбора плазмы крови промывали физиологическим раствором и центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин. Далее готовили 1 % гемолизат эритроцитов: к 0,1 мл отмытых эритроцитов добавляли 10 мл холодной дистиллированной воды и энергично встряхивали. Через полчаса использовали полученный гемолизат для определения активности антиоксидантных ферментов.
Содержание МДА определяли тиобарбитуровым методом [13], активность СОД — по методу Т. В. Сироты [12], каталазы — методом М. А. Королюка и др. [4]. Содержание белка в гомогенатах тканей (до добавления тритона Х-100) определяли биуретовым методом (методом Кингслея–Вейксельбаума), используя коммерческий набор «Клини Тест-ОБ» фирмы «Эко-сервис» (Россия), содержание гемоглобина — с помощью клинического набора реагентов «Гемоглобин-Ново» фирмы «Вектор-Бест» (Россия). Активность церулоплазмина определяли методом Г. А. Равина [3], содержание мочевины — диацетилмонооксимовым методом, используя коммерческий набор «UREA 450» фирмы PLIVA-Lachema Diagnostika (Чехия), содержание мочевой кислоты — по реакции с фосфорно-вольфрамовым реактивом, используя коммерческий набор «КлиниТест-МК» фирмы «Эко-Сервис» (Россия). Статистическую обработку результатов исследования проводили с ис-
пользованием программы статистического анализа BIOSTAT 2008.
Результаты и обсуждение
Нами выявлено, что с возрастом масса тела крыс увеличивается (табл. 1). При применении геропротекторных средств важным аспектом их действия на организм является влияние на массу тела, при этом считается, что они не должны приводить к ее увеличению. Длительное введение ДСИП животным разного возраста, как нами показано, не приводит к возрастанию массы тела, а у 18- и 24-месячных животных она даже снижается на 14,3 % (р3<0,02) и 22,6 % (р3<0,01), соответственно, по сравнению с животными соответствующего возраста без введения ДСИП (см. табл. 1). Аналогичные данные получены в исследовании на мышах линии SHR [2].
Одним из механизмов, лежащих в основе процесса старения, является окислительное повреждение биомолекул, вызванное свободными радикала-
Таблица 1
Масса тела крыс в возрасте 2–24 мес постнатального развития и при введении ДСИП, М±m
Возраст животных, мес |
Масса тела, г |
|
|
2 |
185,55±5,88 |
4 |
277,25±9,581)* |
4 + ДСИП |
285,50±6,70 |
6 |
358,60±6,991)*, 2)* |
6 + ДСИП |
365,05±11,70 |
8 |
395,10±12,521)*, 2)* |
8 + ДСИП |
390,60±10,72 |
12 |
470,65±10,121)*, 2)* |
12 + ДСИП |
478,50±10,59 |
16 |
421,78±15,271)*, 2)* |
16 + ДСИП |
448,19±11,59 |
18 |
527,25±15,441)*, 2)* |
18 + ДСИП |
451,71±23,003)* |
20 |
498,33±10,131)* |
20 + ДСИП |
507,50±22,04 |
22 |
458,33±13,581)* |
22 + ДСИП |
446,67±24,50 |
24 |
430,00±13,231)* |
24 + ДСИП |
332,86±19,243)* |
Примечание. Здесь и в табл. 2–7: 1)* достоверность различий по срав- нению с 2-месячными животными (р1<0,05–0,001); 2)* достоверность различий по сравнению с животными предшествующей возраст- ной группы (p2<0,05–0,001); 3)* достоверность различий по сравне- нию с животными соответствующего возраста без введения ДСИП
(p3<0,05–0,001)
81
Т. И. Бондаренко и др.
ми [18]. С возрастом в органах и тканях человека и животных накапливаются продукты окислительного повреждения ДНК, липидов, белков [30], при этом наибольшее значение придается реакциям, протекающим с участием МДА.
Проведенное нами исследование также показало, что с возрастом уровень МДА в мозгу крыс увеличивается (табл. 2). Нами зарегистрировано увеличение уровня МДА практически у всех исследованных возрастных групп животных: у 6-месячных — на 60,1 % (p1<0,001), у 12-месяч- ных — на 74,6 % (p1<0,001), у 16-месячных — 46,8 % (p1<0,02), у 18-месячных — на 83,8 % (р1<0,01), у 20-месячных — на 79,1 % (р1<0,01), у 22-месячных — на 88,1 % (р1<0,003), у 24-ме- сячных — на 130,5 % (р1<0,001) по сравнению с 2-месячными животными. Кроме того, в мозгу 6-, 12-, 18- и 24-месячных крыс имеет место возрастание концентрации МДА на 47,7 % (p2<0,001), 28,1 % (p2<0,001), 25,2 % (p2<0,02) и 22,5 % (p2<0,01) по отношению к предшествующей возрастной группе. В мозгу 4- и 8-месячных крыс уровень МДА не отличается от его содержания у 2-месячных животных. Таким образом, наибольшее возрастание данного показателя отмечено у животных 18-, 20-, 22- и 24-месячного возраста.
Регулярное подкожное введение ДСИП животным разного возраста приводит к достоверному снижению уровня МДА в головном мозгу 6-месячных животных на 34,6 % (р3<0,001), у 8-месячных — на 15,1 % (р3<0,01), у 12-ме- сячных — на 31,2 % (р3<0,001), у 18-месяч- ных — на 44,5 % (р3<0,01), у 20-месячных — на 39,3 % (р3<0,001), у 22-месячных — на 44,2 % (р3<0,001) и у 24-месячных — на 53,4 % (р3<0,001) по сравнению с интактными животными соответствующего возраста. Введение ДСИП 4- и 16-месячным животным не приводит к изменению концентрации МДА в мозгу (см. табл. 2).
Возможность регуляции интенсивности процесса ПОЛ в ткани мозга с помощью ДСИП, вероятно, может быть опосредовано активацией системы антиоксидантной защиты, так как показано, что ДСИП не обладает прямой антирадикальной активностью [10].
Процесс старения не обходит стороной еще один важный орган — печень. Старение животных и человека часто сопровождается снижением функциональной активности печени, развивающейся на фоне оксидативного повреждения печени АФК [26].
Таблица 2
Содержание МДА в мозгу, печени и плазме крови крыс разного возраста и при введении ДСИП, М±m
Возраст животных, мес |
Мозг, нмоль/г влажной ткани |
Печень, нмоль/г влажной ткани |
Плазма крови, нмоль/мл |
|
|
|
|
2 |
9,61±1,84 |
12,49±2,20 |
22,16±2,18 |
4 |
10,42±0,42 |
8,65±0,431)* |
22,39±1,97 |
4 + ДСИП |
10,70±1,09 |
5,00±0,173)* |
26,69±1,82 |
6 |
15,39±0,811)*, 2)* |
7,70±0,121)*, 2)* |
16,12±1,031)*, 2)* |
6 + ДСИП |
10,06±0,883)* |
4,99±0,393)* |
9,48±0,243)* |
8 |
13,10±0,27 |
8,45±0,62 |
16,91±1,83 |
8 + ДСИП |
11,12±0,653)* |
12,05±0,313)* |
13,88±1,86 |
12 |
16,78±0,531)*, 2)* |
7,60±0,321)* |
31,31±0,471)*, 2)* |
12 + ДСИП |
11,54±0,613)* |
5,12±0,263)* |
25,41±0,423)* |
16 |
14,11±2,041)* |
10,49±0,552)* |
18,05±1,012)* |
16 + ДСИП |
13,14±1,29 |
6,43±0,393)* |
14,15±0,463)* |
18 |
17,66±1,701)*, 2)* |
6,95±0,161)*, 2)* |
27,76±1,111)*, 2)* |
18 + ДСИП |
9,81±0,443)* |
6,78±0,18 |
13,41±1,103)* |
20 |
17,21±0,901)* |
15,44±0,452)* |
25,12±1,15 |
20 + ДСИП |
10,45±0,423)* |
8,41±0,553)* |
15,22±0,803)* |
22 |
18,08±0,731)* |
18,20±0,421)*, 2)* |
31,14±1,121)*, 2)* |
22 + ДСИП |
10,08±0,453)* |
10,13±0,413)* |
13,49±0,933)* |
24 |
22,15±0,851)*, 2)* |
20,45±0,361)*, 2)* |
30,88±0,641)* |
24 + ДСИП |
10,33±0,813)* |
11,15±0,383)* |
14,18±0,523)* |
82
УСПЕХИ ГЕРОНТОЛОГИИ • 2011 • Т. 24 • № 1
Как показало проведенное нами исследование, в печени 2-месячных животных уровень МДА довольно высок вообще и выше по сравнению с уровнем МДА в тканях мозга. У 4-, 6-, 12- и 18-ме- сячных крыс он ниже, соответственно, на 30,7 % (p1<0,001), 38,4 % (p1<0,05), 39,2 % (p1<0,05), 44,4 % (p1<0,04) по сравнению с 2-месячными, у 16- и 20-месячных животных уровень МДА повышен по сравнению с предыдущей возрастной группой на 38 % (р2<0,001) и 122,2 % (р2<0,001). В печени 8-, 16- и 20-месячных крыс концентрация МДА не отличается от таковой в печени 2-ме- сячных животных. Вместе с тем, в печени 22- и 24-месячных крыс нами зарегистрировано повышение данного показателя на 45,7 % (р1<0,05) и 63,7 % (р1<0,03), соответственно, по сравнению
с2-месячными крысами, а также по сравнению
спредыдущей возрастной группой — на 17,9 %
(р2<0,001) и 12,4 % (р2<0,005), соответственно. Экзогенный ДСИП, регулярно вводимый животным разного возраста, способствует снижению уровня МДА в печени, на что указывает уменьшение его содержания у 4-, 6-, 12-, 16-, 20-, 22- и 24-месячных животных. Уровень исследуемого показателя у этих возрастных групп снижа-
ется на 42,2 % (р3<0,001), 35,2 % (р3<0,001), 32,6 % (р3<0,001), 38,7 % (р3<0,001), 45,5 % (р3<0,001), 44,3 % (р3<0,001) и 45,5 % (р3<0,001), соответственно, по сравнению с интактными животными этого же возраста. Введение ДСИП 8-месячным крысам повышает содержание
МДА в печени на 42,6 % (р3<0,001), а у 18-ме- сячных не приводит к изменению концентрации данного показателя по сравнению с интактными животными соответствующего возраста.
Повышение уровня свободнорадикальных продуктов в плазме крови является, в основном, следствием интенсификации процессов их генерации в тканях. Интенсивность этого процесса зависит не только от скорости генерации АФК в клетках, но и от состояния антиоксидантной системы тканей и биологических жидкостей, в частности плазмы крови.
Нами также зарегистрировано возрастание концентрации МДА в плазме крови 12-месяч-
ных животных на 41,3 % (p1<0,001), 18-месяч- ных — на 25,3 % (p1<0,05), 22-месячных — на 40,5 % (p1<0,01) и 24-месячных — на 39,4 % (p1<0,02) по сравнению с 2-месячными крысами; при этом в плазме крови 12-, 18- и 22-месячных животных нами отмечено повышение уровня МДА
на 85,2 % (p2<0,001), 53,8 % (p2<0,001) и 24 % (p2<0,004), соответственно, и по отношению к предшествующей возрастной группе. У 6-месяч-
ных крыс уровень МДА в плазме крови ниже на 27,3 % (р1<0,02) по отношению к таковому у 2-месячных животных и на 28 % (р2<0,02) по сравнению с уровнем у животных предшествующего возраста. В плазме крови 4-, 8-, 16- и 20-ме- сячных животных изменения содержания МДА по сравнению с 2-месячными нами не отмечено.
Регулярное подкожное введение ДСИП животным разного возраста снижает содержание МДА в плазме крови 6-месячных крыс на 41,2 % (р3<0,001), 12-месячных — на 18,8 % (р3<0,001), 16-месячных — на 21,6 % (р3<0,001), 18-месяч- ных — на 51,7 % (р3<0,001), 20-месячных — на 39,4 % (p3<0,001), 22-месячных — на 56,7 % (р3<0,001) и 24-месячных — на 54 % (р3<0,001), соответственно, по сравнению с интактными животными той же возрастной группы. В группах 4- и 8-месячных животных ДСИП не приводит к изменениям уровня МДА в плазме крови. Наиболее выраженное изменение исследуемого показателя зарегистрировано у животных в позднем онтогенезе — 18-, 20-, 22- и 24-месячных крыс.
Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о существенном изменении окислительной модификации липидов как с возрастом, так
иоб органных особенностях ее динамики. Печень
иплазма крови молодых крыс характеризуются интенсивным образованием МДА: в печени 2-ме- сячных и плазме крови 2- и 4-месячных животных его содержание повышено по сравнению с мозгом
ипо отношению к его содержанию в печени и плазме крови более взрослых крыс. В мозгу и плазме крови крыс с 12 мес индивидуального развития имеет место стойкое повышение уровня МДА. В печени эти изменения довольно неоднородны. Ткань мозга демонстрирует наиболее выраженную чувствительность к окислительному повреждению липидов в ходе индивидуального развития животных по сравнению с печенью и плазмой крови — повышение уровня МДА в ней (в процентном отношении) больше, чем в печени и плазме крови. ДСИП одинаково эффективно осуществляет свое протекторное действие во всех исследованных тканях, имея наиболее выраженный в процентном отношении эффект у животных в позднем онтогенезе (18-, 20-, 22- и 24-месячных).
Известно, что процессы старения организма
и формирования возрастной патологии связаны с нарастанием молекулярных повреждений, вызываемых развитием дисбаланса в работе прооксидантной и антиоксидантной систем в сторону преимущественного снижения интенсивности последних [14]. В связи с этим, важным аспектом исследования является изучение влияния ДСИП
83
Т. И. Бондаренко и др.
на активность антиоксидантов с различным меха- |
сячных — на 52,2 % (р1<0,001), у 22-месяч- |
|||||
низмом действия при старении организма. |
ных — на 59,2 % (р1<0,001) и у 24-месячных — |
|||||
СОД является важным регулятором окис- |
на 58,7 % (р1<0,001) по сравнению с 2-месячными |
|||||
лительного обмена клетки, модулирующим про- |
животными. При этом в мозгу 8- и 20-месячных |
|||||
текание физиологических процессов постнаталь- |
животных активность СОД снижена на 40,4 % |
|||||
ного развития организма. Показано, что видовая |
(р2<0,001) и 24 % (р2<0,001), соответственно, |
|||||
продолжительность жизни |
прямо |
коррелирует |
и по отношению к предшествующей возрастной |
|||
с активностью СОД, содержанием β-каротина, |
группе. Таким образом, максимальная активность |
|||||
α-токоферола и мочевой кислоты в сыворотке кро- |
СОД зарегистрирована в мозгу 4- и 6-месячных |
|||||
ви [16]. |
|
|
животных, а наибольшее снижение активности |
|||
Синергистом СОД в клетке является катала- |
данного фермента имеет место в мозгу 20-, 22- и |
|||||
за [7]. Последние исследования показывают, что |
24-месячных крыс. |
|
||||
у трансгенных мышей с повышенной экспрессией |
Активность каталазы в мозгу 4- и 6-месячных |
|||||
гена каталазы человека, локализованной в мито- |
животных не отличается от ее активности в моз- |
|||||
хондриях, происходит увеличение средней и мак- |
гу 2-месячных крыс. Активность каталазы в ходе |
|||||
симальной продолжительности жизни [27]. |
индивидуального развития в ткани мозга увеличи- |
|||||
В табл. 3, 4 представлены результаты нашего |
вается у 8-месячных крыс на 69,4 % (p1<0,001), у |
|||||
исследования возрастного изменения |
активности |
12-месячных — на 83 % (p1<0,001), у 16-месяч- |
||||
СОД и каталазы в мозгу крыс. Активность СОД |
ных — на 79,1 % (p1<0,001), у 18-месячных — на |
|||||
в мозгу 4-месячных крыс на 33,5 % (p1<0,005), а |
53,6 % (p1<0,001) по сравнению с 2-месячными |
|||||
у 6-месячных — на 30,5 % (p1<0,002) выше по |
животными. В мозгу 4-, 6-, 20-, 22- и у 24-ме- |
|||||
сравнению с 2-месячными животными, в осталь- |
сячных крыс активность |
каталазы достоверно |
||||
ных исследованных возрастных группах имеет ме- |
не отличается от таковой у 2-месячных, однако у |
|||||
сто снижение активности СОД: у 8-месячных — |
18-, 20-, 22- и 24-месячных имеет место сниже- |
|||||
на 40,4 % (p1<0,001), у 12-месячных — на 32,5 % |
ние активности каталазы на 14,3 % (p2<0,02), |
|||||
(p1<0,001), у 16-месячных — на 37,1 % (p1<0,001), |
18,8 % (p2<0,006), 27,6 % (p2<0,002) и 43 % |
|||||
у 18-месячных — на 37,2 % (p1<0,001), у 20-ме- |
(p2<0,004), соответственно, по отношению к |
|||||
|
|
|
|
|
|
Таблица 3 |
Активность СОД в мозгу, печени и эритроцитах крови крыс разного возраста и при введении ДСИП, М±m |
||||||
|
|
|
|
|
|
|
Возраст животных, мес |
|
Мозг, Ед/мг белка |
Печень, Ед/мг белка |
|
Эритроциты, Ед/мг Hb |
|
|
|
|
|
|
|
|
2 |
|
49,29±2,75 |
81,29±2,73 |
|
26,32±1,61 |
|
4 |
|
65,80±4,381)* |
77,33±3,08 |
|
22,32±1,85 |
|
4 + ДСИП |
|
74,96±3,12 |
110,33±11,403)* |
|
30,36±2,233)* |
|
6 |
|
64,31±3,241)* |
99,04±2,591)*, 2)* |
|
21,18±2,04 |
|
6 + ДСИП |
|
74,85±1,953)* |
118,19±7,973)* |
|
29,73±2,613)* |
|
8 |
|
29,37±1,931)*, 2)* |
102,65±3,811)* |
|
21,01±1,971)* |
|
8 + ДСИП |
|
51,00±2,583)* |
120,73±5,933)* |
|
30,94±1,803)* |
|
12 |
|
33,28±2,161)* |
110,76±7,851)* |
|
22,86±1,00 |
|
12 + ДСИП |
|
72,28±2,723)* |
144,36±7,953)* |
|
34,68±1,623)* |
|
16 |
|
30,99±1,011)* |
102,13±8,001)* |
|
26,41±2,97 |
|
16 + ДСИП |
|
67,55±1,623)* |
207,66±14,203)* |
|
40,11±3,963)* |
|
18 |
|
30,96±2,121)* |
94,35±6,71 |
|
20,96±2,641)* |
|
18 + ДСИП |
|
70,41±2,833)* |
213,25±11,103)* |
|
37,04±2,793)* |
|
20 |
|
23,55±1,931)*, 2)* |
88,15±3,58 |
|
21,14±1,561)* |
|
20 + ДСИП |
|
64,21±2,383)* |
190,52±8,203)* |
|
33,12±2,103)* |
|
22 |
|
20,12±1,561)* |
65,85±3,301)*, 2)* |
|
20,87±1,101)* |
|
22 + ДСИП |
|
60,90±2,143)* |
188,14±8,953)* |
|
32,80±2,003)* |
|
24 |
|
20,34±2,001)* |
66,43±3,921)* |
|
16,65±0,951)*, 2)* |
|
24 + ДСИП |
|
59,17±4,123)* |
183,30±7,853)* |
|
29,36±1,163)* |
84
УСПЕХИ ГЕРОНТОЛОГИИ • 2011 • Т. 24 • № 1
Таблица 4
Активность каталазы в мозгу, печени и эритроцитах крови крыс разного возраста и при введении ДСИП, М±m
Возраст животных, мес |
Мозг, мкмоль Н2О2/мг белка·мин |
Печень, мкмоль Н2О2/мг белка·мин |
|
Эритроциты, мкмольН2О2/мгHb·мин |
|
2 |
2,35±0,37 |
|
186,13±8,14 |
|
64,05±1,71 |
4 |
3,07±0,34 |
|
195,41±7,07 |
|
68,46±1,12 |
4 + ДСИП |
4,45±0,383)* |
|
198,30±5,23 |
|
78,48±1,313)* |
6 |
3,26±0,48 |
|
210,37±5,991)* |
|
72,81±1,32 |
6 + ДСИП |
4,48±0,473)* |
|
234,10±5,343)* |
|
99,84±2,883)* |
8 |
3,98±0,38*1) |
|
251,88±4,531)*, 2)* |
|
106,53±1,751)*, 2)* |
8 + ДСИП |
5,49±0,443)* |
|
320,77±3,123)* |
|
166,29±2,853)* |
12 |
4,30±0,421)* |
|
248,68±26,801)* |
|
99,30±2,751)* |
12 + ДСИП |
5,12±0,253)* |
|
324,40±6,783)* |
|
174,21±3,603)* |
16 |
4,21±0,171)* |
|
284,75±7,801)* |
|
85,23±2,001)* |
16 + ДСИП |
5,74±0,303)* |
|
337,00±11,203)* |
|
168,30±2,503)* |
18 |
3,61±0,151)*, 2)* |
|
210,50±8,222)* |
|
69,06±1,572)* |
18 + ДСИП |
5,80±0,353)* |
|
313,41±10,113)* |
|
140,30±2,303)* |
20 |
2,93±0,122)* |
|
185,87±7,55 |
|
45,87±1,011)*, 2)* |
20 + ДСИП |
4,72±0,113)* |
|
302,10±6,403)* |
|
118,54±1,573)* |
22 |
2,12±0,152)* |
|
142,72±7,021)*, 2)* |
|
49,56±0,701)* |
22 + ДСИП |
4,30±0,123)* |
|
298,45±7,553)* |
|
112,66±1,753)* |
24 |
1,34±0,072)* |
|
149,61±5,001)* |
|
43,17±0,551)* |
24 + ДСИП |
4,02±0,123)* |
|
305,88±8,203)* |
|
113,82±2,003)* |
предыдущей возрастной группе. Таким образом, |
группах: у 4-месячных — на 45 % (p3<0,01), у |
||||
максимальная активность каталазы обнаружена в |
6-месячных — на 48,5 % (р3<0,02), у 8-месяч- |
||||
мозгу 8-, 12- и 16-месячных животных. |
ных — на 38 % (р3<0,02), у 12-месячных — на |
||||
Предполагают, |
что уменьшение активности |
19,1 % (р3<0,01), у 16-месячных — на 36,3 % |
|||
СОД и каталазы в нейрональных клетках может |
(р3<0,001), у 18-месячных — 60,7 % (р3<0,001), |
||||
быть ответственным за увеличение уровня сво- |
у 20-месячных — на 61,1 % (р3<0,001), у 22-ме- |
||||
боднорадикальных повреждений в мозгу, а так- |
сячных — на 102,8 % (р3<0,001), у 24-месяч- |
||||
же то, что эти ферменты могут быть сами по себе |
ных — на 200 % (р3<0,001) по сравнению с ин- |
||||
чувствительны к инактивации свободными ради- |
тактными животными соответствующего возраста. |
||||
калами, выработка которых увеличивается с воз- |
Таким образом, максимальное увеличение актив- |
||||
растом [19]. Введение ДСИП животным разно- |
ности исследованных антиоксидантных ферментов |
||||
го возраста приводит к повышению активности |
под влиянием ДСИП имеет место у 18-, 20-, 22- |
||||
СОД в ткани мозга 6-месячных крыс на 16,4 % |
и 24-месячных животных. Зарегистрированное |
||||
(р3<0,01), 8-месячных — на 73,6 % (р3<0,001), |
нами увеличение |
активности антиоксидантной |
|||
12-месячных — на 117,2 % (р3<0,001), 16-ме- |
ферментативной системы под влиянием ДСИП |
||||
сячных — на 118 % (р3<0,001), 18-месяч- |
может быть следствием активации синтеза ис- |
||||
ных — на 127,5 % (р3<0,001), 20-месячных — |
следуемых соединений как непосредственно, где |
||||
на 172,7 % (р3<0,001), 22-месячных — на |
ДСИП может выступать в роли регулятора транс- |
||||
202,7 % (р3<0,001), 24-месячных — на 191 % |
крипции генов специфических областей ДНК, от- |
||||
(р3<0,001) по сравнению с интактными животны- |
ветственных за образование антиоксидантных фер- |
||||
ми соответствующего возраста. Введение ДСИП |
ментов, так и опосредованно через гормональную |
||||
4-месячным животным не приводит к изменению |
систему. Е. А. Самецким (1996) [11] выявлена |
||||
активности СОД в мозгу по сравнению с соответ- |
специфическая реакция после внутрибрюшинного |
||||
ствующей возрастной группой интактных крыс. |
введения ДСИП интактным животным — уве- |
||||
Активность каталазы в мозгу крыс разного |
личение синтеза РНК и белка в нервных клет- |
||||
возраста на фоне введения ДСИП также уве- |
ках, что согласуется с результатами исследования |
||||
личивается во всех исследованных возрастных |
G. A. Schoenenberger (1984) [25], показавшего |
85
Т. И. Бондаренко и др.
возможность реализации цепи длительного модуляторного эффекта ДСИП через его влияние на геном. Г. Т. Рихиревой и соавт. (2009) [9] показана значительная активация под действием ДСИП ключевого фермента биосинтеза ДНК — рибонуклеотидредуктазы в селезенке мышей после внутрибрюшинной инъекции пептида.
Результаты исследования активности СОД в печени крыс при старении свидетельствуют о повышении ее активности у 6-, 8-, 12- и 16-месячных животных на 21,8 % (p1<0,001), 26,3 % (p1<0,001), 36,3 % (p1<0,001) и 25,6 % (p1<0,02), соответственно, по сравнению с 2-месячными, при этом у 4-, 18- и 20-месячных крыс активность СОД достоверно не отличается по сравнению с 2-месячны- ми животными. В печени 22- и 24-месячных крыс имеет место снижение активности СОД на 19 % (р1<0,001) и 18,2 % (р1<0,001), соответственно, по отношению к 2-месячным животным, при этом у 22-месячных крыс активность СОД снижена на 25,3 % (р2<0,001) по сравнению с предыдущей возрастной группой (20-месячных).
Возрастное изменение активности каталазы в печени крыс имеет сходную тенденцию с СОД. В возрастном ряду 6–8–12–16 мес ее активность
уэтих групп выше на 13,4 % (p1<0,05), 35,3 % (p1<0,001), 33,6 % (p1<0,03), 53 % (p1<0,02), соответственно, по сравнению с 2-месячными животными. В печени 22- и 24-месячных крыс ак-
тивность каталазы на 23,3 % (p1<0,003) и 19,6 % (p1<0,02) ниже, чем у 2-месячных крыс, при этом
у18- и 22-месячных животных активность исследуемого фермента по отношению к предыдущим возрастным группам (16-, 18- и 20-месячных, со-
ответственно) уменьшается на 26,1 % (p2<0,05) и 23,2 % (p2<0,002). Активность каталазы в печени 4-, 18- и 20-месячных животных не отличается от ее активности в печени 2-месячных крыс. Таким образом, наибольшая активность СОД зарегистрирована нами в печени 12-месячных крыс, а каталазы — в печени 16-месячных животных.
Обнаруженное нами более раннее снижение активности СОД в печени крыс в ходе онтогенеза может приводить к накоплению супероксидных радикалов и их продуктов, которые, вероятно, могут вызывать окислительные модификации и угнетение активности каталазы.
Регулярное введение ДСИП животным на протяжении их жизни приводит к достоверному повышению активности СОД и каталазы в печени крыс. Активность СОД под влиянием ДСИП возраста-
ет в печени 4-месячных крыс на 42,7 % (p3<0,01), 6-месячных — на 19,3 % (p3<0,04), 8-месяч- ных — на 17,6 % (p3<0,03), 12-месячных — на
30,3 % (p3<0,001), 16-месячных — на 103,3 % (p3<0,05), 18-месячных — на 126 % (p3<0,001), 20-месячных — на 116,1 % (p3<0,001), 22-месяч- ных — на 185,7 % (p3<0,001) и у 24-месячных — на 176 % (p3<0,001) по отношению к интактным крысам тех же возрастных групп.
Активность каталазы на фоне введения ДСИП также увеличивается в печени практически всех исследованных возрастных групп животных: у 6-ме- сячных — на 11,3 % (p3<0,01), у 8-месячных — на 27,4 % (p3<0,001), у 12-месячных — на 30,4 % (p3<0,01), у 16-месячных — на 18,3 % (p3<0,05), у 18-месячных — на 48,9 % (p3<0,001), у 20-ме- сячных — на 62,6 % (p3<0,001), у 22-месяч- ных — на 109,1 % (p3<0,001) и у 24-месячных — на 104,5 % (p3<0,001); при этом заметно, что наибольшее повышение имеет место в позднем онтогенезе. Необходимо отметить, что в процентном отношении активность СОД в печени под влиянием ДСИП увеличивается более заметно, чем активность каталазы.
Интерпретируя полученные результаты, можно предположить участие ДСИП непосредственно или опосредовано через гормональную систему
впроцессе регуляции генной активности и созревания СОД и каталазы в тканях. В работе [22] показана активация каталазы в тканях крыс, связанная с усилением ее биосинтеза под действием гонадотропных гормонов, при этом установлена ко-локализация ДСИП и лютеинизирующего рилизинг-гормона в нейросекреторных везикулах в срединном возвышении мозга крыс, что указывает на возможность их взаимного влияния. Кроме того, установлено влияние ДСИП на уровень мелатонина в организме крыс. Мелатонин, как известно, значительно повышает активность СОД, каталазы
втканях старых животных [17].
Эритроциты очень чувствительны к индукторам свободнорадикального окисления и накоплению АФК. Нами установлено, что активность СОД в эритроцитах 8-, 18-, 20-, 22- и 24-месяч- ных крыс снижается на 20,3 % (p1<0,05), 20,4 % (p1<0,05), 19,7 % (p1<0,05), 20,7 % (p1<0,05), 36,7 % (p1<0,004), соответственно, а у 4-, 6-, 12- и 16-месячных не изменяется по сравнению с 2-месячными животными. Нужно отметить, что в эритроцитах 6-, 8-, 12-, 16-, 18-, 20- и 22-месяч- ных крыс активность данного фермента по отношению к предшествующей возрастной группе достоверно не изменяется, за исключением 24-месячных животных, у которых она снижается на 20,2 % (p2<0,03) по сравнению с 22-месячной группой.
Активность каталазы в эритроцитах 8-, 12- и 16-месячных животных на 66,3 % (p1<0,001),
86
УСПЕХИ ГЕРОНТОЛОГИИ • 2011 • Т. 24 • № 1
55 % (p1<0,001) и 33,1 % (p1<0,03) выше по отношению к группе 2-месячных, однако у 20-, 22- и 24-месячных крыс активность данного фермента понижена по сравнению с молодыми 2-месячными на 28,4 % (p1<0,02), 22,6 % (p1<0,05) и 32,5 % (p1<0,03), соответственно. В эритроцитах 4-, 6-
и18-месячных животных достоверных изменений активности фермента по сравнению с 2-месячными крысами не обнаружено.
Наблюдаемое нами снижение активности СОД
икаталазы хорошо согласуется с представлениями о роли АФК в старении эритроцитов. АФК активно участвуют в старении эритроцитов — они повреждают белки и инициируют ПОЛ внутри клетки за счет взаимодействия АФК с ионами железа или вне эритроцита при участии макрофагов [28]. Вероятно, угнетение активности СОД и каталазы в эритроцитах крыс разного возраста вызвано инактивацией ферментов свободными радикалами с учетом того, что эритроциты не способны синтезировать вновь ферменты и заменить поврежденные, либо выходом ферментов в кровяное русло за счет нарушения целостности эритроцитарных мембран из-за повышения с возрастом эритроцитов, менее устойчивых к гемолизу. Кроме того, можно предположить образование эритроцитов, дефицитных по СОД и каталазе.
ДСИП, вводимый животным на протяжении всей их жизни, приводит к достоверному повышению активности СОД и каталазы в эритроцитах всех исследованных возрастных групп. Активность СОД в эритроцитах 4-месячных крыс на фоне
введения ДСИП возрастает на 36 % (p3<0,01), 6-месячных — на 40,4 % (p3<0,02), 8-месяч- ных — на 47,3 % (p3<0,002), 12-месячных — на 51,7 % (p3<0,001), 16-месячных — на 51,9 % (p3<0,01), 18-месячных — на 76,7 % (p3<0,001), 20-месячных — на 56,7 % (p3<0,001), 22-месяч- ных — на 57,2 % (p3<0,001), 24-месячных — на 76,3 % (p3<0,001) по сравнению с интактными животными того же возраста.
Действие ДСИП на эритроцитарную каталазу сопровождается увеличением ее активности у 4-ме-
сячных крыс на 14,6 % (p3<0,05), у 6-месячных — на 37,1 % (p3<0,01), у 8-месячных — на 56,1 % (p3<0,001), у 12-месячных — 75,4 % (p3<0,002),
у16-месячных — на 97,5 % (p3<0,001), у 18-ме- сячных — на 103,2 % (p3<0,001), у 20-месяч- ных — на 158,4 % (p3<0,001), у 22-месячных — на 127,3 % (p3<0,001), у 24-месячных — на 163,7 % (p3<0,001). Можно предположить стимулирующее действие ДСИП на созревание эритроидных элементов в костном мозгу и выброс в кровь молодых форм эритроцитов, содержащих натив-
ные ферменты антиоксидантной защиты. Кроме того, учитывая, что ДСИП способен влиять на вязкоэластические свойства мембран эритроцитов, можно предположить снижение количества предгемолитических и гемолитических эритроцитов за счет повышения стабильности и сохранения целостности их мембран и, как следствие, сохранение возможности функционирования антиоксидантных ферментов.
Таким образом, результаты работы демонстрируют возрастзависимое снижение активности ключевых антиоксидантных ферментов в мозгу, печени
иэритроцитах крыс. Необходимо отметить, что в ткани мозга возрастные изменения в активности изученных антиоксидантных ферментов наступают раньше, чем в печени. В печени дефицит СОД и каталазы становится явным у 22- и 24-месячных животных. Протекторный эффект ДСИП при старении связан с активацией сопряженно функционирующих ферментов — СОД и каталазы в тканях и эритроцитах крыс разного возраста, при этом в мозгу и печени в процентном отношении ДСИП в большей степени активирует СОД, нежели каталазу, тогда как в эритроцитах, наоборот, имеет место более интенсивная модуляция активности каталазы. ДСИП, обладая антиоксидантным эффектом, ликвидирует дефицит данных ферментов, способствуя поддержанию прооксидантноантиоксидантного баланса.
Вбиологических жидкостях, и в частности в плазме крови, содержание активированных кислородных метаболитов регулируется специфическими
инеспецифическими компонентами антиоксидантной системы. Плазма крови обладает довольно высокой антиоксидантной активностью. Считается, что в плазме крови главным ингибитором супероксидного аниона является специфический белок крови — церулоплазмин (ЦП).
Нами установлено (табл. 5), что активность ЦП в плазме крови 4-, 6-, 8-, 12-, 20- и 22-ме- сячных животных достоверно не отличается от таковой у контрольных 2-месячных животных, однако в плазме крови 16-, 18- и 24-месячных крыс нами зарегистрировано снижение активности ЦП
на 15,5 % (p1<0,02), 14 % (p1<0,04) и 23,8 % (p1<0,01), соответственно, по сравнению с 2-ме- сячными животными. Эти изменения можно объяснить тем, что при старении ЦП подвергается окислительной модификации. Имеются данные литературы, указывающие на возрастзависимые конформационные изменения около Cu-связывающих сайтов белка, которые впоследствии затрагивают всю молекулу. Предполагают, что при избытке аскорбата и железа, которые являются восстано-
87
Т. И. Бондаренко и др.
вителями для Cu-связывающих сайтов ЦП, часть ионов Fe (II) не окисляется повторно ЦП и генерирует АФК, которые и вызывают окислительные повреждения [20].
Регулярное подкожное введение ДСИП животным разного возраста приводит к умеренному повышению активности ЦП в плазме крови 16-ме- сячных крыс на 27 % (p3<0,001), 18-месячных — на 25,9 % (p3<0,001), 20-месячных — на 24,3 % (p3<0,05), 22-месячных — на 27,5 % (p3<0,05) и 24-месячных — на 26,8 % (p3<0,04) по сравнению с интактными животными соответствующих возрастных групп. В остальных возрастных группах введение ДСИП не приводит к достоверным изменениям исследуемого показателя. Можно предположить непосредственное модифицирующее действие ДСИП путем регуляции пептидом синтеза данного белка и его высвобождения из гепатоцитов.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют об исключительно важной роли ДСИП в коррекции возрастного снижения активности ферментативной антиоксидантной системы в мозгу, печени и крови крыс.
Ферментативные антиоксиданты специализированы по внутриклеточной защите от АКМ.
Таблица 5
Активность церулоплазмина в плазме крови крыс разного возраста и при введении ДСИП, М±m
Возраст животных, мес |
Активность церулоплазмина, мг/л |
|
|
2 |
286,46±12,27 |
4 |
308,39±14,66 |
4 + ДСИП |
301,00±15,00 |
6 |
290,07±14,98 |
6 + ДСИП |
292,60±16,91 |
8 |
303,44±9,25 |
8 + ДСИП |
342,19±9,17 |
12 |
268,86±14,13 |
12 + ДСИП |
273,45±9,01 |
16 |
242,08±10,201)* |
16 + ДСИП |
307,35±7,533)* |
18 |
246,46±13,201)* |
18 + ДСИП |
310,21±6,763)* |
20 |
237,61±23,20 |
20 + ДСИП |
295,33±12,303)* |
22 |
255,25±28,40 |
22 + ДСИП |
325,50±9,003)* |
24 |
218,28±20,001)* |
24 + ДСИП |
276,75±14,003)* |
Вместе с тем, в организме во всех водных и липидных фазах могут протекать радикальные окислительные процессы, в ингибировании которых важную роль играют низкомолекулярные антиоксиданты: некоторые аминокислоты, полиамины, мочевина, мочевая кислота, глутатион, аскорбат, α-токоферол, холестерин и др. [6].
С возрастом в ткани мозга крыс происходит повышение уровня мочевины: у 4-месячных — на 80,8 % (p1<0,001), у 6-месячных — на 70,4 % (p1<0,001), у 8-месячных — на 142,3 % (p1<0,001),у12-месячных—на93,5%(p1<0,001),
у16-месячных — на 143,5 % (p1<0,001), у 18-ме- сячных — на 128,1 % (p1<0,001), у 20-месяч- ных — на 61,9 % (p1<0,001), у 22-месячных — на 41,1 % (p1<0,001), у 24-месячных — на 32 % (p1<0,001) по сравнению с 2-месячными крысами, при этом у 8- и 16-месячных крыс концен-
трация мочевины на 42,2 % (p2<0,001) и 25,8 % (p2<0,001) выше, а у 6-, 12-, 18-, 20-, 22- и 24-месячных животных достоверно не изменяется по отношению к предыдущей возрастной группе (табл. 6).
Уровень мочевой кислоты в мозгу крыс разного возраста демонстрирует сходную динамику, повышаясь у 4-месячных на 42,9 % (p1<0,001),
у6-месячных — на 81 % (p1<0,001), у 8-месяч- ных — на 87,3 % (p1<0,001), у 12-месячных — на 117,5 % (p1<0,001), у 16-месячных — на 181 % (p1<0,001),у18-месячных—на127 %(p1<0,001),
у20-месячных — на 87,3 % (p1<0,001), у 22-ме- сячных — на 69,8 % (p1<0,001), у 24-месяч- ных — на 30,2 % (p1<0,02) по сравнению с 2-ме- сячными крысами, при этом нужно заметить, что
у18-, 20-, 22- и 24-месячных крыс концентрация мочевой кислоты даже снижается на 19,2 %
(p1<0,02), 17,5 % (p1<0,04), 9,3 % (p1<0,05) и 23,4 % (p2<0,001), соответственно, по отношению к предыдущей возрастной группе для каждого указанного возраста (табл. 7).
Возрастную динамику в мозгу крыс исследуемых соединений можно объяснить снижением адаптационных возможностей нервной ткани при старении. Тем не менее, по сравнению с ферментативными антиоксидантами — СОД и каталазой, для которых показано возрастное снижение активности в ткани мозга, мочевина и мочевая кислота демонстрируют более устойчивую позицию, хотя их общее содержание в мозгу старых животных все-таки уменьшается.
Введение ДСИП животным разного возраста приводит к повышению концентрации мочевины
в мозгу 4-месячных крыс на 91,5 % (p3<0,001), 6-месячных — на 40,4 % (p3<0,001), 12-месяч-
88
УСПЕХИ ГЕРОНТОЛОГИИ • 2011 • Т. 24 • № 1
Таблица 6
Содержание мочевины в мозгу, печени и плазме крови крыс разного возраста и при введении ДСИП, М±m
Возраст животных, мес |
Мозг, мкмоль/г влажной ткани |
Печень, мкмоль/г влажной ткани |
Плазма крови, ммоль/л |
|
|
|
|
2 |
2,60±0,18 |
3,50±0,20 |
3,20±0,20 |
4 |
4,70±0,241)* |
6,10±0,301)* |
8,20±0,601)* |
4 + ДСИП |
9,00±1,203)* |
9,10±1,003)* |
9,90±0,503)* |
6 |
4,43±0,221)* |
6,46±0,201)* |
6,63±0,201)*, 2)* |
6 + ДСИП |
6,22±0,243)* |
7,50±0,293)* |
7,85±0,153)* |
8 |
6,30±0,751)*, 2)* |
5,80±0,261)* |
5,40±0,151)*, 2)* |
8 + ДСИП |
6,80±0,30 |
7,90±0,263)* |
6,20±0,093)* |
12 |
5,03±0,311)* |
6,28±0,301)* |
5,87±0,041)* |
12 + ДСИП |
6,97±0,263)* |
7,64±0,243)* |
5,71±0,10 |
16 |
6,33±0,631)*, 2)* |
5,91±0,271)* |
5,10±0,571)* |
16 + ДСИП |
9,30±0,703)* |
8,32±0,253)* |
6,73±0,193)* |
18 |
5,93±0,701)* |
5,42±0,151)* |
4,02±0,241)* |
18 + ДСИП |
9,80±0,183)* |
8,23±0,153)* |
4,91±0,223)* |
20 |
4,21±0,251)* |
4,17±0,302)* |
4,08±0,431)* |
20 + ДСИП |
6,27±0,343)* |
6,42±0,393)* |
4,02±0,27 |
22 |
3,67±0,321)* |
4,06±0,22 |
4,18±0,511)* |
22 + ДСИП |
5,95±0,663)* |
6,00±0,443)* |
4,59±0,24 |
24 |
3,43±0,311)* |
3,32±0,132)* |
6,11±0,351)*, 2)* |
24 + ДСИП |
5,42±0,503)* |
5,54±0,613)* |
4,68±0,303)* |
Таблица 7
Содержание мочевой кислоты в мозгу, печени и плазме крови крыс разного возраста и при введении ДСИП, М±m
Возраст животных, мес |
Мозг, мкмоль/г влажной ткани |
Печень, мкмоль/г влажной ткани |
Плазма крови, мкмоль/л |
|
|
|
|
2 |
0,63±0,04 |
1,00±0,02 |
41,00±1,11 |
4 |
0,90±0,031)* |
1,10±0,08 |
48,56±2,601)* |
4 + ДСИП |
1,20±0,073)* |
2,00±0,033)* |
56,24±1,303)* |
6 |
1,14±0,071)*, 2)* |
1,50±0,101)*, 2)* |
50,90±2,901)* |
6 + ДСИП |
1,36±0,073)* |
2,86±0,253)* |
59,32±2,313)* |
8 |
1,18±0,081)* |
3,40±0,251)*, 2)* |
56,42±1,921)* |
8 + ДСИП |
1,90±0,223)* |
4,30±0,203)* |
65,30±2,853)* |
12 |
1,37±0,031)* |
2,46±0,181)*, 2)* |
58,00±0,401)* |
12 + ДСИП |
0,88±0,043)* |
3,13±20,063)* |
57,45±0,90 |
16 |
1,77±0,031)*, 2)* |
2,86±0,311)* |
59,95±1,551)* |
16 + ДСИП |
1,88±0,13 |
2,75±0,13 |
61,89±0,51 |
18 |
1,43±0,091)*, 2)* |
1,85±0,031)*, 2)* |
53,30±0,561)*, 2)* |
18+ ДСИП |
2,33±0,113)* |
2,69±0,073)* |
59,30±0,443)* |
20 |
1,18±0,041)*, 2)* |
1,26±0,061)*, 2)* |
53,63±3,70 |
20 + ДСИП |
1,59±0,033)* |
2,03±0,103)* |
56,11±2,20 |
22 |
1,07±0,031)*, 2)* |
1,10±0,08 |
47,44±4,54 |
22 + ДСИП |
1,45±0,053)* |
1,74±0,113)* |
54,50±1,90 |
24 |
0,82±0,021)*, 2)* |
1,17±0,02 |
66,18±2,951)*, 2)* |
24 + ДСИП |
1,16±0,073)* |
1,68±0,103)* |
52,22±2,153)* |
89
Т. И. Бондаренко и др.
ных — на 38,6 % (p3<0,001), 16-месячных — |
группе не зарегистрировано, при этом уровень мо- |
на 46,9 % (p3<0,02), 18-месячных — на 65,3 % |
чевой кислоты в печени 6- и 8-месячных живот- |
(p3<0,03), 20-месячных — на 48,9 % (p3<0,001), |
ных повышен на 36,4 % (p2<0,01) и на 126,7 % |
22-месячных — на 62,1 % (p3<0,001), 24-ме- |
(p2<0,001), соответственно, по сравнению с пред- |
сячных — на 58 % (p3<0,001), а также повыше- |
ыдущей возрастной группой; однако уже у 12-, 18- |
нию мочевой кислоты в мозгу 4-месячных крыс |
и 20-месячных содержание мочевой кислоты в пе- |
на 33,3 % (p3<0,001), 6-месячных — на 19,3 % |
чени животных по отношению к предшествующей |
(p3<0,05), 8-месячных — на 61 % (p3<0,001), |
группе снижается на 27,6 % (p2<0,01), 35,3 % |
12-месячных — на 35,8 % (p3<0,001), 18-ме- |
(p2<0,002) и 32 % (p2<0,001), соответственно. |
сячных — на 62,9 % (p3<0,001), 20-месяч- |
Введение ДСИП животным разного воз- |
ных — на 34,7 % (p3<0,001), 22-месячных — на |
раста приводит к повышению уровня мочевины |
35,5 % (p3<0,001), 24-месячных — на 41,5 % |
в печени 4-месячных крыс на 49,2 % (p3<0,01), |
(p3<0,001) по сравнению с интактными крысами |
6-месячных — на 16,1 % (p3<0,01), 8-ме- |
того же возраста. Содержание мочевины в мозгу |
сячных — на 36,2 % (p3<0,001), 12-месяч- |
8-месячных и мочевой кислоты в мозгу 16-месяч- |
ных — на 21,7 % (p3<0,001), 16-месячных — на |
ных крыс на фоне введения ДСИП достоверно не |
40,8 % (p3<0,001), 18-месячных — на 51,8 % |
изменяется. Тканевый уровень низкомолекуляр- |
(p3<0,001), 20-месячных — на 54 % (p3<0,001), |
ных антиоксидантов определяется соотношением |
22-месячных — на 47,8 % (p3<0,001), 24-месяч- |
активности ферментных систем их образования и |
ных — на 66,9 % (p3<0,003). Следует отметить, |
метаболических превращений, транспорта и выве- |
что мочевина является естественным метаболитом |
дения из организма (мочевина, урат). Увеличение |
и ее «защитные» концентрации не токсичны для |
концентрации мочевины и мочевой кислоты в го- |
организма, мочевина включается в процессы ре- |
ловном мозгу крыс разного возраста под влиянием |
гуляции обмена, не нарушая метаболические пути, |
ДСИП может быть следствием активации им фер- |
и быстро выводится через почки. Нами также от- |
ментов синтеза данных соединений. |
мечено повышение содержания мочевой кислоты |
Результаты исследования содержания моче- |
при введении ДСИП в печени 4-месячных крыс |
вины и мочевой кислоты в ткани печени крыс при |
на 81,8 % (p3<0,001), 6-месячных — на 90,7 % |
старении показали, что уровень мочевины у 4-ме- |
(p3<0,001), 8-месячных — на 26,5 % (p3<0,01), |
сячных крыс повышается на 74,3 % (p1<0,001), у |
12-месячных — на 27,2 % (p3<0,001), 18-ме- |
6-месячных — на 84,6 % (p1<0,001), у 8-месяч- |
сячных — на 45,4 % (p3<0,001), 20-месяч- |
ных — на 65,7 % (p1<0,001), у 12-месячных — |
ных — на 61 % (p3<0,001), 22-месячных — на |
на 79,4 % (p1<0,001), у 16-месячных — на |
58,2 % (p3<0,001), 24-месячных — на 43,6 % |
68,9 % (p1<0,001), у 18-месячных — на 54,9 % |
(p3<0,001) по сравнению с животными того же |
(p1<0,001) по отношению к 2-месячным живот- |
возраста без введения ДСИП. Концентрация мо- |
ным. В печени 20-, 22- и 24-месячных животных |
чевой кислоты у 16-месячных крыс на фоне введе- |
достоверного изменения концентрации мочевины |
ния ДСИП не изменяется. |
по сравнению с 2-месячными животными не обна- |
Механизм действия ДСИП на азотистый мета- |
ружено. Нужно отметить, что у 6-, 8-, 12-, 16-, |
болизм печени реализуется, вероятно, через изме- |
18- и 22-месячных животных содержание моче- |
нение структуры, активности и оптимума действия |
вины по отношению к предыдущей группе для |
ферментов синтеза и распада мочевины и мочевой |
каждого указанного возраста достоверно не изме- |
кислоты. Можно предположить активацию ДСИП |
няется, а у 20- и 24-месячных животных обнару- |
ферментов обмена данных низкомолекулярных ан- |
жено даже снижение на 23,1 % (p2<0,01) и 18,2 % |
тиоксидантов как непосредственно, так и опосре- |
(p2<0,05), соответственно, данного показателя по |
довано через гипофизарно-адренокортикальную |
отношению к предыдущей возрастной группе. |
систему [15]. |
Уровень мочевой кислоты в печени 6-месяч- |
Концентрация мочевины в плазме крови крыс |
ных крыс повышается на 50 % (p1<0,001), 8-ме- |
всех исследованных возрастных групп по сравне- |
сячных — на 240 % (p1<0,001), 12-месячных — |
нию с 2-месячными животными достоверно повы- |
на 146 % (p1<0,001), 16-месячных — на 186 % |
шается: у 4-месячных — на 156,3 % (p1<0,001), у |
(p1<0,001), 18-месячных — на 85 % (p1<0,001), |
6-месячных — на 107,2 % (p1<0,001), у 8-месяч- |
20-месячных — на 26 % (p1<0,001) по сравнению |
ных — на 68,8 % (p1<0,001), у 12-месячных — |
с 2-месячными крысами, у 4-, 22- и 24-месячных |
на 83,4 % (p1<0,001), у 16-месячных — на |
возрастных групп достоверного изменения уров- |
59,4 % (p1<0,002), у 18-месячных — на 25,6 % |
ня мочевой кислоты по отношению к контрольной |
(p1<0,02), у 20-месячных — на 27,5 % (p1<0,05), |
90