2 курс / Нормальная физиология / ВИРТУАЛЬНЫЙ_ПРАКТИКУМ_ПО_НОРМАЛЬНОЙ_ФИЗИОЛОГИИ
.pdfСледующий пациент – Next Patient Старт – Start
Типы крови – Blood Typing
Теоретическая часть
Кровь транспортирует растворенные в ней субстанции ко всем клеткам организма и соответственно от них. Клетки крови осуществляют важную защитную функцию против различных патогенных агентов. Лабораторные анализы крови дают необходимую информацию о том, как эти функции осуществляются.
Работы, которые Вам предстоит выполнить, состоят из 5 общепринятых лабораторных тестов, которые наиболее часто используются в клинической практике.
Гематокрит
Гематокрит указывает на процент красных кровяных клеток (RBCS) – эритроцитов в образце цельной крови. Гематокрит = 48 означает, что 48% объема крови составляют эритроциты. Так как основной функцией эритроцитов является транспорт кислорода к клеткам организма, то высокое значение гемотокрита указывает на более высокую кислородную емкость крови.
Значение гематокрита определяется при вращении микрокапилляров с образцами цельной крови в специальной гематокритной центрифуге. При этой процедуре происходит отделение клеток крови от плазмы, а на границе раздела оседает слой лейкоцитов. Показатель гематокрита определяется после центрифугирования при измерении высоты слоя эритроцитов в миллиметрах и делении на величину исходного столбика крови, чтобы получить процентное содержание эритроцитов.
Среднее значение гематокрита для мужчин составляет ≈ 47%, а для женщин ≈ 42%. Верхняя граница нормы составляет – 55%. Значение гематокрита ниже нормы свидетельствует об анемии, а значение выше нормы показывает полицитемию.
При анемии к клеткам организма транспортируется недостаточное количество кислорода. Существует много возможных причин анемии, которые включают в себя недостаточное количество эритроцитов, пониженное содержание гемоглобина, являющегося переносчиком кислорода, аномальный гемоглобин и т.д.
51
https://t.me/medicina_free
Гем в гемоглобиновой молекуле содержит атом железа. Если железо является недоступным, то организм не может синтезировать полноценный гемоглобин. Это приводит к развитию заболевания
– железодефицитной анемии.
Апластическая анемия является результатом недостаточного созревания костного мозга для того, чтобы производить необходимое количество эритроцитов.
Перниционная анемия, является следствием недостатка витамина B12, который необходим для клеточного деления. Внутренний фактор Кастла, синтезируемый в желудке, способствует всасыванию витамина В12. Люди, у которых вырабатывается недостаточное количество внутреннего фактора, или индивидуумы, у которых недостаточно витамина В12 в диете, будут страдать этим видом заболевания.
Серповидноклеточная анемия ‒ является наследственным заболеванием, при котором белковая часть молекулы гемоглобина неправильно формирует четвертичную структуру. В результате этого молекулы кислорода не могут соответствовать «уродливому» гемоглобину и развивается анемия.
Полицитемия ‒ характеризуется значимым увеличением количества эритроцитов. Существует множество различных причин полицитемии, включая проживание на больших высотах, напряженные атлетические нагрузки или опухоли костного мозга.
Вэтой работе Вы будете имитировать проведение тестов крови, которые применяются для определения гематокрита. Для этого выберите в основном меню работу «Анализ крови».
Перед Вами откроется экран для эксперимента «Определение гематокрита» (рис. 14).
Для выполнения эксперимента, выберите раздел «Помощь» в меню, а затем запуск обзорного экрана. Это позволит Вам просмотреть оборудование для работы. Теперь вновь обратитесь к «Помощи» и выберите клавишу «Выключение обзорного экрана».
Вверхнем правом углу экрана находится распределитель, в котором располагается 6 тонких капилляров. Эти капилляры обработаны гепарином. Гепарин является субстанцией, которая предотвращает свертывание крови. Под капиллярными трубочками находятся 6 тест-пробирок, которые содержат пробы кро-
ви для исследования. При перемещении капилляров к тест-
52
https://t.me/medicina_free
пробиркам с кровью, они заполняются кровью за счет капиллярных сил.
Рис. 14. Экран работы «Определение гематокрита»
Слева от образцов с кровью находится контейнер, в котором пломбируются капиллярные трубочки (пломбировочный материал показан на экране, как оранжево-желтая по цвету субстанция). Капилляры пломбируются с одного конца таким образом, чтобы проба крови могла подвергаться центрифугированию. После пломбирования капилляры надо переместить к гнездам микрогематокритной центрифуги. При щелчке на кнопку «Старт» происходит запуск центрифуги с вращением 14500 об./мин.
После остановки и открывания центрифуги капилляры, последовательно, друг за другом, надо переместить к метрической рулетке в верхнем левом углу экрана. При щелчке на кнопку «Зарегистрировать результат», которая расположена рядом с табло результатов в нижней части экрана, вся информация по пробам будет регистрироваться: высота столбика эритроцитов в милли-
53
https://t.me/medicina_free
метрах, высота тускло – желтого слоя (лейкоциты), гематокрит (процент эритроцитов) и процент лейкоцитов.
В нижнем левом углу экрана находится контейнер для избавления от загрязнений. Каждый предмет, находившийся в контакте с кровью, должен быть очищен при помещении в этот контейнер.
Практическая часть.
Работа № 1. Определение гематокрита
Для теста использовали кровь людей, живущих в разных регионах:
Образец 1: здоровый мужчина, проживающий в регионе 1 Образец 2: здоровая женщина, проживающий в регионе 1 Образец 3: здоровый мужчина, проживающий в регионе 2 Образец 4: здоровая женщина, проживающий в регионе 2 Образец 5: мужчина, с апластической анемией Образец 6: женщина, с железодефицитной анемией
Ход работы:
1.Щелкните «мышкой» и переместите капиллярную трубочку с гепарином над тест-пробиркой, содержащей пробу крови
№1.
2.Убедитесь, что капилляр соприкоснулся с кровью и начал заполняться за счет капиллярных сил.
3.Переместите капилляр, содержащий образец крови № 1, к контейнеру для пломбирования капиллярных трубок и «запечатайте» один конец капилляра.
4.Переместите капилляр к микрогематокритной центрифуге.
5.Повторите этапы 1–3 для оставшихся 5 образцов крови.
6.Установите таймер центрифуги на отметке 5 мин с помощью кнопки (+), а затем щелкните мышкой по кнопке «Старт».
7.Когда центрифуга остановится и откроется, щелкните мышкой и переместите капилляр № 1 к метрической рулетке.
8.Щелкните кнопкой «Зарегистрировать результат» для получения информации по пробе № 1.
9.Щелкните мышкой и переместите капилляр № 1 к контейнеру для удаления загрязнений.
54
https://t.me/medicina_free
10.Повторите этапы 7–9 для оставшихся 5 капилляров в центрифуге.
Если Вы желаете повторить или перезапустить эксперимент, щелкните кнопку «Перезагрузка», которая находится рядом с табло результатов.
11.Зарегистрируйте полученные результаты у себя в отчетах, заполнив таблицу 6.
Таблица 6
Результаты работы «Определение гематокрита»
Проба |
Высота |
Высота слоя |
Высота слоя |
|
% |
|
столбика |
эритроцитов |
лейкоцитов |
Гематокрит |
|||
крови |
лейкоцитов |
|||||
|
крови (мм) |
(мм) |
(мм) |
|
|
|
1 |
|
|
|
|
|
|
2 |
|
|
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
|
|
4 |
|
|
|
|
|
|
5 |
|
|
|
|
|
|
6 |
|
|
|
|
|
12. На основании полученных результатов ответьте на поставленные вопросы и сделайте соответствующие выводы в своих отчетах.
Чему равно значение гематокрита у здоровых мужчин, прожи-
вающих в регионе 2 и 1?____________________________________
Насколько больше кислорода в воздухе региона 2, по сравнению с регионом 1? _____________________________________________
Как почки отвечают на снижение в крови кислорода? _________
Если костный мозг продуцирует повышенное количество эритроцитов, что происходит с гематокритом? _________________
Чему равно значение гематокрита у мужчин с апластической анемией? ________________________________________________
Будет ли величина показателей анализа крови для эритроцитов у пациента с апластической анемией выше, ниже или сходна с величиной показателей анализа крови у здорового человека? ______
Каким является значение гематокрита у здоровой женщины,
живущей в регионе 1? _____________________________________
Объясните разницу значений гематокрита у здоровой женщины, проживающей в регионе 1 и женщины с железодефицитной ане-
мией. ___________________________________________________
55
https://t.me/medicina_free
Теоретическая часть
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) является измерением величины оседания эритроцитов в вертикальной, стационарной капиллярной трубочке, заполненной кровью, в течение 1 ч.
У здоровых людей эритроциты не имеют высоких значений СОЭ. При некоторых заболеваниях повышенное содержание фибриногена и иммуноглобулинов вызывает увеличение СОЭ, скучивание эритроцитов, с формированием «монетных столбиков». При таких состояниях эритроциты являются более тяжелыми и оседают быстрее, чем в норме.
Этот тест может использоваться для выявления прогрессирования заболеваний, таких как серповидноклеточная анемия, некоторые онкологические и воспалительные заболевания, подобно ревматическому артриту. Когда заболевание усиливается – СОЭ повышается, а когда ослабевает – СОЭ снижается. СОЭ также увеличено при железодефицитной анемии. Иногда, в менструальный период, у женщин может развиваться анемия, и СОЭ будет показывать увеличение. СОЭ можно использовать для оценки состояния пациентов с грудными болями: СОЭ увеличивается при инфарктах миокарда, но остается в норме при стенокардии.
Также, СОЭ можно использовать в скрининге женщин с острыми абдоминальными болями. СОЭ не повышается в первые 24 ч при острых приступах аппендицита, но повышается при ранней стадии острого воспалительного заболевания почечной лоханки или прерывания беременности.
Выберите в меню обозначение «Эксперимент», затем работу «Скорость оседания эритроцитов». Перед Вами откроется экран для выполнения этой работы (рис. 15). Используя вкл/выкл обзорного экрана, выбранного из меню с использованием «Помощь», ознакомьтесь с оборудованием для работы.
В верхнем левом углу экрана находится полка с 6 образцами крови, которые содержат антикоагулянт гепарин. Кроме этого, на полке находится капельница с цитратом натрия, который используется для разбавления образцов крови, что способствует лучшему заполнению капилляров.
Под полкой находится распределитель тест-пробирок и штатив. Справа от штатива для пробирок находится окно, в котором
56
https://t.me/medicina_free
содержится 6 пробирок для определения скорости оседания эритроцитов. Это окно будет открыто, когда все 6 образцов крови будут добавлены в тест-пробирки и разбавлены цитратом натрия. Под окном находится таймер, дисплей которого показывает прошедшее время с начала эксперимента, а кнопка «Старт» запускает таймер. В верхнем правом участке экрана находится цифровой счетчик, который будет помогать Вам подсчитывать уровни осаждения эритроцитов в капиллярах.
Рис. 15. Экран работы «Скорость оседания эритроцитов»
В нижнем правом участке экрана находится контейнер для удаления загрязнений. Все оборудование, находившееся в контакте с кровью, должно быть помещено в этот контейнер для очистки.
Теперь Вы должны щелкнуть по кнопке «Зарегистрировать результат», которая находится рядом с табло результатов в нижней части экрана. Вся поступающая информация по образцу крови будет регистрироваться: уровень столбика осажденных эрит-
57
https://t.me/medicina_free
роцитов (RBCS), прошедшее время, скорость осаждения, номер образца крови.
Практическая часть
Работа № 2. Определение СОЭ
Будет исследоваться кровь следующих пациентов: Образец 1: здоровый человек Образец 2: женщина в период менструации
Образец 3: пациент с серповидноклеточной анемией Образец 4: пациент с железодефицитной анемией Образец 5: пациент с инфарктом миокарда Образец 6: пациент со стенокардией.
Ход работы:
1.С помощью мышки, сделайте щелчок и переместите отдельно все 6 пробирок из распределителя к штативу.
2.Щелкните по капельнице пробы крови № 1 и переместите
еек первой тест-пробирке. Один миллилитр крови будет добавлен в пробирку.
3.Повторите этап работы 2 для оставшихся 5 проб крови, используя разные тест-пробирки для каждой пробы.
4.Теперь щелкните по капельнице с 3,8% цитратом натрия и переместите ее, помещая над пробиркой, содержащей пробу крови № 1. 0,5 мл цитрата натрия будет добавлено в эту тестпробирку.
5.Повторите 4 этап работы для других пяти проб крови (добавляя цитрат натрия во 2‒6 пробирки).
6.Щелкните по кнопке «Перемешать».
7.После перемешивания проб будет открыто окно с 6 пробами для осаждения эритроцитов.
8.Щелкните по пробирке, содержащей пробу крови № 1. Обратите внимание, что указателем теперь является маленькая тест-пробирка, показанная слева.
9.Удерживая кнопку мышки, передвигайте стрелку вниз и затем – к первому капилляру, который находится в окне. Содержимое маленьких тест-пробирок будет перемещено в капилляры для осаждения эритроцитов.
58
https://t.me/medicina_free
10.Теперь щелкните мышкой и переместите опорожненную тест-пробирку в контейнер для удаления загрязнения.
11.Повторите этап 8–10 с другими 5 образцами крови.
12.Когда все 6 пробирок для осаждения эритроцитов будут заполнены, установите таймер на 60 мин с помощью кнопки (+), а затем щелкните кнопку «Старт».
13.После того как пройдут 60 мин, переместите пробирку
№1 для осаждения эритроцитов к счетной камере, находящейся в верхнем правом углу экрана. Проведите расчет. Пробирка промаркирована в миллиметрах, при этом интервал между метками составляет 5 мм.
Насколько миллиметров произошло оседание эритроцитов в ва-
шей пробе? ______________________________________________
Из чего состоит окрашенная часть пробы в капилляре? ________
14.Щелкните по кнопке «Зарегистрировать результат», которая находится рядом с табло показателей. Высота столбика осевших эритроцитов в миллиметрах, прошедшее время исследования и скорость оседания будут внесены в таблицу результатов автоматически.
15.Переместите капилляр в контейнер для удаления загряз-
нений.
16.Повторите этапы 13–15 с другими капиллярами.
17.Зарегистрируйте полученные результаты у себя в отчетах, заполнив таблицу 7.
Таблица 7
Результаты работы «Определение гематокрита»
Проба |
Уровень оседания |
Прошедшее |
Скорость |
крови |
эритроцитов (мм) |
время |
оседания |
1 |
|
|
|
2 |
|
|
|
3 |
|
|
|
4 |
|
|
|
5 |
|
|
|
6 |
|
|
|
18. На основании полученных результатов ответьте на поставленные вопросы и сделайте соответствующие выводы в своих отчетах.
59
https://t.me/medicina_free
Является ли повышенной скорость оседания эритроцитов у пациентов с серповидноклеточной анемией? ___________________
Какова скорость оседания эритроцитов у пациентов с железодефицитной анемией по сравнению со здоровыми людьми? _____
Что происходит со скоростью оседания эритроцитов в образце крови № 2, взятой у женщины в период менструации? _________
Объясните, что происходит со скоростью оседания эритроцитов для образцов крови 5 и 6 (пациенты, страдающие инфарктом миокарда и стенокардией). ____________________________
Теоретическая часть
Гемоглобин (Нb)
Гемоглобин (Нb), белок, который находится в эритроцитах, и является необходимым для транспорта кислорода от легких к клеткам тела. Молекулы гемоглобина имеют белковую (глобиновую) часть, состоящую из 4-х полипептидных цепей. Каждая полипептидная цепь имеет форму, подходящую для связывания гема (железосодержащая группа – билирубин и железо), который может оксигенироваться О2. Поэтому каждая молекула гемоглобина может переносить 4 молекулы кислорода. В эритроците содержится около 28 млн молекул Hb.
Кислород, соединяясь с гемоглобином, формирует оксигемоглобин, который приобретает ярко-красный цвет. Количественное определение гемоглобина используется для определения, классификации возможных причин анемии, что дает полезную информацию при определенных заболеваниях. Например, пациент может страдать анемией при нормальном содержании эритроцитов, если в них присутствует неактивная форма гемоглобина.
В норме кровь содержит 12‒18 г Нb на 100 мл крови. Здоровый мужчина содержит 13,5‒18 г/100 мл; здоровая женщина – 12‒16 г/100 мл крови. Значение гемоглобина повышается у пациентов с полицитемией, заболеваниях сердца и хронических обструктивных заболеваниях легких. Значения Hb также возрастают на больших высотах. Содержание гемоглобина снижается у пациентов с анемией, при гипертироидизме, циррозах печени, заболеваниях почек, системной красной волчанке и острых кровопотерях.
60
https://t.me/medicina_free