4 курс / Оториноларингология / Иммуноцитологические_исследования_в_оториноларингологии_Арефьева
.pdf8. КЛЕТОЧНОЕ ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВО НА СЛИЗИСТЫХ
ОБОЛОЧКАХ ВЕРХНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ
ПО ДАННЫМ ИММУНОЦИТОГРАММ
(СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ)
Авторами было проведено изучение состояния местного иммунитета верхних дыхательных путей (в том числе и иммуноцитограмм) у больных с различными формами риносинусита: острым гнойным риносинуситом
(ОГРС) – 30, хроническим гнойным риносинуситом (ХГРС) – 68, полипоз-
ным риносинуситом (ПРС) – 20, гнойно-полипозным риносинуситом
(ГПРС) – 25 человек. Группой контроля для больных риносинуситом слу-
жили практически здоровые лица (ПЗЛ), проживающие в условиях без вы-
раженных респираторных антигенных нагрузок – 60 человек.
Данные иммунопатологических исследований у больных риносинуси-
том включали в себя показатели клеточного состава, клеточной деструк-
ции, а именно – среднего показателя деструкции клеток (СПД), индекса де-
струкции клеток (ИДК), индекса цитолиза клеток (ИЦК) по Л.А. Матвеевой
(1986), наличие метаплазии, и модуляции цилиндрического эпителия,
функциональной активности нейтрофилов слизи носа, промывных жидко-
стей из воспаленных околоносовых пазух, поверхности лакун небных минда-
лин.
90
9. КЛЕТОЧНОЕ ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВО СО СЛИЗИСТОЙ
ОБОЛОЧКИ НОСА (СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ)
Было исследовано клеточное представительство слизистой оболочки носа у больных риносинуситом (табл. 4). Сравнение с контрольной группой показало увеличение цитоза (абсолютного количества клеток) за счет нейтро-
филов во всех группах больных. Отмечались отличия и в клеточном предста-
вительстве других клеток иммунной системы. При гнойных процессах наблюдалось увеличение доли нейтрофилов среди клеточных элементов. Не-
смотря на то, что при полипозном процессе доля нейтрофилов не отличалась от контрольной группы, абсолютное значение было достоверно выше (р˂0,01).
Содержание лимфоцитов достоверно повышалось при остром гнойном и хроническом гнойных процессах, эозинофилов и тучных клеток - при хро-
ническом гнойном и значительно при полипозном процессе (рис.74). Показа-
тели содержания макрофагов в иммунориноцитограммах больных риносину-
ситом и практически здоровых лиц не отличались.
а б
Рис. 74. а) - риноцитограмма больного полипозным риносинуситом;
б) - тучная клетка (х630)
91
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
При этом число десквамированных эпителиальных клеток не снижалось по сравнению с практически здоровыми лицами и даже увеличивалось при ХГРС.
На этом фоне отмечались изменения в структуре содержания эпители-
альных клеток за счет снижения доли безъядерной цитоплазмы плоского эпи-
телия и увеличения доли клеток цилиндрического эпителия, что, возможно,
отражает нарушение естественных процессов развития клеток от молодых форм до чешуек.
Таблица 4
Клеточное представительство со слизистой оболочки носа больных риносинуситом и практически здоровых лиц
|
ПЗЛ |
|
|
|
Показатели |
(контроль) |
|
Формы рнносинусита |
|
|
(п=60) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
острая |
|
|
|
|
гнойная |
хроническая |
полипозная |
|
|
с затяжным |
гнойная |
|
|
|
(п=20) |
||
|
|
течением |
(п=68) |
|
|
|
|
||
|
|
(п=30) |
|
|
|
|
|
|
|
Цитоз, абс. ч. |
93,07±9,09 |
216,05±34,93** |
287,03±23,79*** |
271,43±70,22* |
|
|
|
|
|
Нейтрофилы,% |
46,86±3,86 |
67,72±5,00** |
72,14±3,38*** |
46,81 ±6,70 |
абс. ч. |
55,35±8,54 |
158,65±33,29** |
214,55±19,07*** |
175.97±41,30** |
Лимфоциты, % |
0,51 ±0,13 |
1,24±0,25* |
0,98±0,17* |
1,19±0,34 |
абс. ч. |
0,46±0,11 |
2,24±0,67* |
2,57±0,48*** |
3,22±1,66 |
|
|
|
|
|
Эозинофилы,% |
0,06±0,05 |
1,55±1,10 |
0,32±0,19 |
5,67±1,60** |
абс. ч. |
0,02±0,01 |
3,60±3,60 |
0,78±0,28* |
22,08±10,31* |
Макрофаги, % |
0,30±0,11 |
0,48±0,23 |
0,33±0,09 |
0,48±0,24 |
абс. ч. |
0,35±0,11 |
2,08±1,17 |
1,35±0,56 |
5,06±2,71 |
|
|
|
|
|
Цилиндрический |
33,14±3,89 |
20,97±3,66* |
21,17±2,99* |
35,67±6,49 |
эпителий, % |
|
|
|
|
абс. ч. |
25,21±4,14 |
28,61±6,63 |
48,52±9,74* |
43,89±23,27 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Плоский эпи- |
3,87±0,66 |
3,72±1,33 |
2,63±0,66 |
5,71±1,66 |
телий, % |
|
|
|
|
абс. ч. |
2,28±0,36 |
4,87±1,64 |
5,89±1,60* |
6,6±3,34 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Чешуйки, % |
15,00±2,92 |
4,24±1,91** |
1,92±0,42*** |
4,29±1,32** |
абс. ч. |
8,87±2,07 |
1,41±0т35** |
3,31±0,77* |
14,62±13,81 |
|
|
|
|
|
Примечание. Достоверность отличия значений показателей от контрольной группы: * р<0,05; **р<0,01; *** р<0,001.
92
Отмечаются изменения в структуре ядра клеток эпителия (преиму-
щественно цилиндрического) в виде наличия нуклеол (рис.75), гранул
(рис.76) и выраженной деструкции ядра (рис.77). Выявленные особенности могут свидетельствовать о внутриклеточной инфицированности (напри-
мер, вирусы, хламидии – тельца Провачека).
Рис. 75. Нуклеолы в ядрах цилиндрического эпителия слизистой носа и околоносовых пазух (х630)
Рис. 76. Гранулы в ядрах цилиндрического эпителия слизистой носа и околоносовых пазух (х630)
93
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Рис. 77. Деструкция ядра (х630)
У некоторых пациентов с выраженным муцинообразованием помимо изменений в ядре можно обнаружить особенности состояния цитоплазмы клеток в виде наличия множественных вакуолей – «пенистая» цитоплазма
(рис.78).
Рис.78. Большое количество вакуолей в цитоплазме цилиндрического эпителия (х630)
94
В ходе исследования были проанализированы значения показателей целостности клеток по коэффициентам деструкции, согласно которым у больных с ОГРС показатели деструкции нейтрофилов не менялись в срав-
нении с соответствующими данными контрольной группы. Значения показа-
телей деструкции эпителиальных клеток свидетельствовали о преоблада-
нии клеток с начальной степенью деструкции, о чем говорит снижение СПД цилиндрического эпителия (ПЗЛ – 1,60±0,06; ОГРС – 1,34±0,09;
р<0,05).
Показатели деструкции нейтрофилов у больных с хроническими фор-
мами риносинусита характеризовались преобладанием клеток I и II степени деструкции и уменьшением числа полностью разрушенных клеток IV степени деструкции, о чем свидетельствовало снижение СПД нейтрофилов (ПЗЛ –
2,08±0,11; ХГРС – 1,65±0,1, р<0,01; ПРС – 1,59±0,15, р<0,05; ГПРС –
1,66±0,10, р<0,01) и ИЦК нейтрофилов (ПЗЛ – 0,25±0,03, ХГРС – 0,13±0,02,
р<0,01; ПРС – 0,09±0,03, р<0,01; ГПРС – 0,15±0,02, p<0,05). Отторгнувши-
еся эпителиальные клетки преимущественно были представлены так же,
как и при ОГРС, клетками 0 и I степени деструкции.
Наблюдалось увеличение доли целых (0 степень деструкции) и
практически целых (I степень) клеток цилиндрического эпителия среди от-
торгнувшегося эпителия.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о повышенном содержании в иммуноцитограммах нейтрофилов, находящихся в начальной
(I и II) степени деструкции и целых и практически целых (0 и I степени деструкции) клеток цилиндрического эпителия, что подразумевает слу-
щивание с эпителиального покрова практически неповрежденных клеток эпи-
телия. Это подтверждает предположение о нарушении естественных процес-
сов регенерации эпителия.
При оценке состояния эпителиального покрова слизистой оболочки носа больных риносинуситом учитывали процент метаплазии цилиндрического эпителия в плоский, индекс кератинизации клеток плоского эпителия и индекс
95
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
модуляции клеток цилиндрического эпителия, показатели которых не имели существенных отличий от контрольной группы, что позволяет исключить наличие атрофических процессов на слизистых оболочках носа у больных ри-
носинуситом.
При анализе иммунориноцитограмм учитывалось содержание в мазках микроорганизмов, слизи и посторонних включений в виде хлопьев (воз-
можно, это пылевые частицы).
Из всех групп больных слизь чаще обнаруживалась в мазках больных полипозной формой риносинусита. Посторонних включений было меньше в группе больных с обострением хронической формы гнойного риносинусита.
Таким образом, в ходе изучения иммуноцитограмм со слизистых оболочек носа у больных риносинуситом выявлено достоверное увели-
чение цитоза и абсолютного числа нейтрофилов, в том числе деструктиро-
ванных. Также отмечались увеличение числа лимфоцитов у больных с ост-
рым гнойным и хроническим гнойным процессом, числа эозинофилов (аб-
солютного – при хронической форме, относительного и абсолютного – при полипозной), снижение относительного числа цитоплазмы плоского эпи-
телия у всех больных. Показатели деструкции нейтрофилов у больных хроническими формами заболевания свидетельствовали о преоблада-
нии клеток с начальной степенью деструкции, возможно, за счет притока новых клеток в очаг воспаления и быстрой их элиминации. Снижение пока-
зателей деструкции клеток цилиндрического эпителия во всех группах больных можно объяснить активной десквамацией эпителия. В иммуноци-
тограммах больных риносинуситом выявляемость микроорганизмов не отличалась от данных практически здоровых лиц.
96
10. КЛЕТОЧНОЕ ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВО В ПРОМЫВНЫХ
ЖИДКОСТЯХ ОЧАГА ВОСПАЛЕНИЯ
Результаты исследования клеточного состава промывных жидко-
стей очага воспаления у больных гнойными формами риносинусита представлены в табл. 5.
Анализ содержания клеток свидетельствовал о преобладании в очаге воспаления нейтрофилов (Нф) до 90%. Доля лимфоцитов (Лф) имела тен-
денцию к увеличению у больных хронической гнойной и гнойно-полипоз-
ной формами заболевания. Доля макрофагов (Мф) увеличивалась при поли-
позном процессе (р>0,05). Число эозинофилов (Эф) увеличивалось у боль-
ных с острым гнойным процессом (р>0,05). В центрифугатах промывных жидкостей в небольших количествах обнаруживались эпителиоциты, среди которых преобладали клетки плоского эпителия (ПЭ), единичные клетки ци-
линдрического эпителия (ЦЭ) и цитоплазма плоского эпителия (ЦПЭ).
Таблица 5
Клеточный состав центрифугата промывных жидкостей воспаленных пазух у больных риносинуситом
|
|
|
Формы риносинусита |
|
|
|
|
Показатели |
|
|
|
|
|
Острая гнойная с |
Хроническая |
|
Гнойно- |
|||
|
цитограммы |
|
||||
|
затяжным |
гнойная (п=55) |
|
полипозная (п=18) |
||
|
|
|
||||
|
|
течением (п=30) |
|
|
|
|
|
Нф, % |
87,37±3,70 |
89,51±2,07 |
|
86,78±5,40 |
|
|
Лф, % |
0,95±0,34 |
2,33±0,57 |
|
2,0±0,46 |
|
|
Эф, % |
0,68±0,35 |
0,26±0,09 |
|
0,22±0,10 |
|
|
Мф, % |
0,58±0,21 |
0.46±0,10 |
|
0,39±0,20 |
|
|
ЦЭ, % |
2,05±0,52 |
1,16±0,61 |
|
4,22±2,16 |
|
|
ПЭ, % |
7,95±3,53 |
4,82±1,45 |
|
5,44±3,46 |
|
|
ЦПЭ, % |
0,42±0,23 |
1,46±0,62 |
|
0,78±0,61 |
|
|
СПДнф |
1,29±0,14 |
1,19±0,06 |
|
1,23 ±0,16 |
|
|
ИДКнф |
0,73±0,05 |
0,71±0,03 |
|
0,66±0,06 |
|
|
ИЦКнф |
0,09±0,02 |
0,09±0,02 |
|
0,11 ±0,04 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
97
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Невысокие показатели деструкции (СПД) Нф промывных жидкостей по сравнению с показателями Нф со слизистой оболочки носа свидетель-
ствовали о преобладании клеток с начальной степенью деструкции.
Доля деструктированных Нф была практически в три раза выше доли целых. Показатели деструкции Нф в разных группах больных не имели до-
стоверных отличий, что, вероятно, отражает общность гнойных процессов.
98
11.КЛЕТОЧНОЕ ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВО
СПОВЕРХНОСТИ ЛАКУН НЕБНЫХ МИНДАЛИН
Данные иммуноцитограмм, полученных с поверхности лакун небных
миндалин больных риносинуситом, представлены в табл. 6.
|
|
|
|
|
Таблица 6 |
|
|
Клеточный состав с поверхности лакун небных |
|
|
|||
|
миндалин у больных риносинуситом |
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
Показа- |
ПЗЛ |
|
Формы риносинусита |
|
|
|
тели |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
В процен- |
(контроль) |
острая |
хроническая |
полипозная |
гнойнопо- |
|
тах |
(n=23) |
гнойная с за- |
гнойная |
(n= 20) |
липозная |
|
|
|
тяжным тече- |
(п=68) |
|
(n=25) |
|
|
|
нием |
|
|
|
|
|
|
(п=30 ) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Нф, % |
34,08±3,47 |
34,52±4,92 |
44,04±3,27* |
43,40±6,25 |
36,19±4,71 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Лф, % |
2,64±0,66 |
0,61±0,19** |
1,46 ±0,79 |
0,75±0,24* |
1,78±1,12 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Эф,% |
0,00±0,00 |
0,11±0,08 |
0,09±0,05 |
0,70±0,55 |
0,07 ±0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Мф, % |
0,06±0,04 |
0,07±0,05 |
0,13 ±0,05 |
0,05±0,05 |
0,00±0,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
ПЭ, % |
60,75±3,50 |
56,41 ±4,86 |
51,89±3,28 |
51,40±6,14 |
59,63±4,71 |
|
|
|
|
|
|
|
|
ЦПЭ, % |
2,52±0,40 |
6,66±2,23 |
2,36±0,43 |
3,45 ±1,06 |
2,04±0,46 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Примечание. Достоверность отличия значений показателей от контроль-
ной группы: * р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001.
Выявлено преобладание клеток ПЭ (более половины) над Нф, встреча-
лись единичные другие клеточные элементы.
Сравнение иммуноцитограмм с поверхности лакун НМ показало сниже-
ние относительного числа Лф у больных риносинуситом, особенно у больных с острыми (р<0,01) и полипозными (р<0,05) процессами по сравнению с данными контрольной группы. У больных с хронической гнойной формой за-
болевания отмечалось увеличение относительного числа Нф (р<0,05). У боль-
ных с гнойно-полипозными формой риносинусита клеточный состав с поверх-
ности лакун НМ не имел достоверных отличий от контрольной группы.
При изучении показателей, характеризующих деструктивные процессы
99
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/