3 курс / Фармакология / ФАРМАКОЛОГИЯ_ПРЕПАРАТОВ_НА_ОСНОВЕ_ПРИРОДНЫХ_АЛЮМОСИЛИКАТОВ_И_ИХ

ных элементов и уменьшение мальпигиевого слоя. В матке отмечали проли-

ферацию и митозы клеток мускулатуры матки.

Рисунок 26 – Ткань печени (опытная группа), жировое перерождение

(окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)

Рисунок 27 – Ткань почек (опытная группа), начальная стадия некроза

(окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)

В продолжение эксперимента из оставшихся крыс опытной группы бы-

ло сформировано четыре группы животных (n=10). Первым трем группам

181

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

крыс (I – бентонит, II – нонтронит, III – тиононтронит-S) препараты добавля-

ли в корма из расчета 2% к массе рациона. Животные контрольной группы продолжали получать пораженные микотоксинами корма.

Детоксикационное действие бентонита, нонтронита и тиононтрита-S оце-

нивали по клиническому состоянию животных, степени выраженности симп-

томов интоксикации, динамике массы тела, морфологическим и биохимиче-

ским показателям крови, а также уровню сохранности и заболеваемости под-

опытных крыс.

В ходе проведенного исследования установлена выраженная эффектив-

ность всех препаратов с приоритетом по третьей группе (тиононтрит-S). Улуч-

шение клинического статуса лабораторных крыс в III группе начали отмечать к

3-4 дню, в первой и во второй – на 6-7 сутки. На фоне положительной динамики в опытных группах состояние контрольных аналогов ухудшалось, и к 10-му дню исследований в группе была зарегистрирована гибель 2-х животных.

Введение в кормовые рационы препаратов оказало определенное поло-

жительное влияние и на ростовые характеристики лабораторных животных

(таблица 39).

Таблица 39 – Динамика массы тела лабораторных крыс и лечебная эффективность препаратов при сочетанном микотоксикозе (n=10, М±m)

		Масса тела в	Масса тела	Среднесу-	Лечебная	Выжива-
	Группы	начале опы-	в конце	точный	эффектив-	емость,
		та, г	опыта, г	прирост, г	ность, %	%
	Опытная 1, ТР+	138,5±1,85	158,7±3,13*	0,96±0,01*	80	100
	2% бентонита
	Опытная 2, ТР+	142,4±2,71	163,2±3,28	0,99±0,02	80	100
	2% нонтронита
	Опытная 3,
	ТР+2% тионон-	137,3±2,33	160,5±3,18*	1,10±0,02	90	100
	трита-S
	Контроль, ТР	140,2± 2,53	156,1±3,02	0,76±0,04	–	80

Примечание: ТР – токсичный рацион; степень достоверности: * – Р≤0,05 к контролю

К концу экспериментального периода средний вес крыс первой опыт-

ной группы увеличился на 20,2 г (или 14,5%), второй опытной группы – на

182

20,8 г (14,5%), третьей – соответственно – на 23,2 г (16,9%) в отличие от жи-

вотных негативного контроля, у которых значения данного показателя варь-

ировали на уровне 15,9 г. При этом среднесуточный прирост массы тела крыс первой опытной группы превысил уровень контрольных аналогов на 26,0%,

второй опытной группы – на 30,3%, третьей опытной группы – 44,7%. Таким образом, в относительном выражении самый высокий прирост массы тела и,

соответственно, среднесуточный прирост наблюдался у крыс, получавших с кормами тиононтрит-S.

Назначение природных алюмосиликатов сопровождалось положитель-

ными изменениями ряда биохимических показателей (таблица 40).

Отмечено стимулирующее влияние препаратов на эритропоэз и гемо-

поэз за счет активно вступающих в процесс кроветворения катионов железа

(Fe2+и Fe3+) и природно-сбалансированного комплекса микроэлементов − си-

нергистов железа (меди, марганца, цинка), присутствующих в составе иссле-

дуемых препаратов. Так, количество эритроцитов у крыс опытных групп превышало показатели контрольных аналогов на 7,2%, 12,5% и 11,8%, уро-

вень гемоглобина – на 7,9%, 15,4% и 13,9% соответственно.

Нормализующее влияние исследуемые препараты оказали на белковый и липидный обмены. Концентрация общего белка по группам увеличилась

(на уровне тенденции) относительно крыс контрольной группы на 3,2% (пер-

вая группа), 4,1% (вторая группа) и 6,1% (третья группа). Содержание триг-

лицеридов – на 16,5%, 29,4% и 41,2% соответственно, что может свидетель-

ствовать о коррегирующем действии препаратов на интенсивность катаболи-

ческих процессов. Уровень холестерина в опытных группах был выше кон-

троля на 17,6%, 11,8% и 35,3%.

Детоксицирующее действие препаратов оценивалось по изменению ин-

дикаторных ферментов – трансфераз, выраженная динамика снижения кото-

рых в подопытных группах существенно отличалась от аналогичных показа-

телей животных контрольной группы (в 1,52, 1,64 и 2,86 раза – по аланинами-

183

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

нотрансферазе) и в 1,35, 1,32 и 1,69 раза – по аспартатаминотрансферазе соот-

ветственно.

Таблица 40 – Влияние препаратов на показатели крови лабораторных крыс при сочетанном микотоксикозе (М±m, n=10)

			Группы животных
	Показатели	Опытная 1,	Опытная 2,	Опытная 3,	Контроль,
		ТР+2%	ТР+2%	ТР+2% тио-
					ТР
		бентонита	нонтронита	нонтрита-S
	RBC (Эритроциты),	6,28±0,08	6,59±0,11	6,55±0,06*	5,86±0,08
	10х12/л
	WBC (Лейкоциты), 10х9/л	8,2±0,26	8,3±0,22	8,0±0,19	8,7±0,18
	HGB (Гемоглобин), г/л	124,4±3,81	133,1±2,64	131,4±1,83*	115,3±3,32
	Эозинофилы, %	3,1±0,26	2,4±0,31	2,0±0,26	2,2±0,45
	Нейтрофилы, %	31,3±1,13*	28,1±1,58	26,5±1,32*	14,1±1,91
	Базофилы, %	0	1,4±0,51	1,2±0,45	1,3±0,37
	Лимфоциты, %	63,0±3,47	65,3±3,74	67,2±4,11	81,2±3,96
	Моноциты, %	2,6±0,45	2,8±0,52	3,1±0,68	1,2±0,31
	СОЭ (по Панченкову)	2,0±0,52	1,7±0,43	1,4±0,52	2,2±0,58
	Общий белок, г/л	79,8±2,22	80,5±3,06	82,0±2,96	77,3±2,56
	АсАТ, ЕД/л	135,1±4,69*	139,2±7,13	108,6±3,34*	183,3±6,59
	АлАТ, ЕД/л	88,9±3,81	82,8±4,82	47,4±5,08*	135,5±6,73
	Щелочная фосфатаза,	253,1±5,75**	248,3±6,24	214,7±6,11*	279,2±5,96
	ЕД/л
	Глюкоза, ммоль/л	8,9±0,35	9,1±0,51	9,6±0,49	6,5±0,35*
	Мочевина, ммоль/л	12,8±0,55***	12,5±0,42	11,4±0,39	11,6±0,58
	Креатинин, мкмоль/л	30,6±1,03	31,4±1,26	27,9±0,65*	33,2±1,15***
	Холестерин, ммоль/л	2,0 ±0,12	1,9±0,10	2,3±0,12**	1,7±0,14
	Кальций общий, ммоль/л	2,5±0,05*	2,4±0,08	2,4±0,07	2,2±0,04***
	Фосфор неорганический,	2,8±0,04*	2,6±0,06	2,8±0,07	2,5±0,04*
	ммоль/л
	Триглицериды, ммоль/л	0,99±0,04*	1,1±0,04	1,2 ±0,07*	0,85±0,03
	Билирубин общий,	11,7±0,62	12,3±0,83	10,8±0,70*	15,1±0,66*
	мкмоль/л
	МСМ254, усл. ед.	0,20±0,01	0,21±0,01	0,18±0,01**	0,28±0,2
	МСМ280, усл. ед.	0,27±0,02	0,26±0,02***	0,23±0,01*	0,31±0,03

Примечание: * – степень достоверности Р ≤ 0,001; ** –Р ≤ 0,01; *** –Р ≤ 0,05.

Причем, наибольший эффект был отмечен в третьей опытной группе,

крысам которой в корма вводился тиононтрит-S.

Одним из факторов токсического воздействия микотоксинов на пече-

ночные клетки является повышение содержание молекул средней массы

184

(МСМ) в крови с максимумом в период разгара интоксикации. Именно сред-

немолекулярные пептиды, образующиеся в процессе протеолиза в повре-

жденных тканях, а также в самой сыворотке при выходе в кровь протеолити-

ческих ферментов и являются основным субстратом, ответственным за воз-

никновение патологических эффектов эндогенной интоксикации при различ-

ных заболеваниях. То есть, нарушение функционирования протеазной и анти-

протеазной систем в результате активации протеолиза приводит к накопле-

нию большого количества продуктов деградации белков.

Изучение уровня молекул средней массы значительно расширяет воз-

можности углубленного понимания процессов, протекающих в целом орга-

низме при различного рода метаболических изменениях, возникающих при микотоксикозах.

При этом уровень молекул средней массы варьирует в зависимости от метаболического состояния организма и, в какой-то степени, служит прогно-

стическим критерием нарушения обменных процессов. К настоящему време-

ни достаточно подробно изучено биологическое действие МСМ. Многие из них обладают нейротоксической активностью, угнетают процессы биосинтеза белка, способны подавлять активность ряда ферментов, разобщают процессы окисления и фосфорилирования, нарушают механизмы регуляции синтеза адениловых нуклеотидов, изменяют транспорт ионов через мембраны,

эритропоэз, фагоцитоз, микроциркуляцию, лимфодинамику, вызывают состо-

яние вторичной иммунодепрессии. Также, отмечено, что в процессе эффек-

тивной терапии снижение уровня веществ группы средних молекул опережает период устранения клинических признаков заболевания. Определение кон-

центрации МСМ в биологических средах организма является одним из наибо-

лее информативных и доступных способов оценки выраженности интоксика-

ции и эффективности лечения при многих патологических состояниях (Гро-

мышевская Л.Л., 1997).

185

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Учитывая, что МСМ являются универсальными маркерами интоксика-

ции, нами в ходе эксперимента определялся уровень среднемолекулярных пептидов в сыворотке крови подопытных животных. А поскольку средние молекулы имеют различные размеры (их молекулярная масса колеблется от

300 до 5000 дальтон), их измерения проводились на различных длинах волн.

В ходе проведенных исследований установили, что показатели уровня МСМ (при длине волны λ = 254 нм) первой и второй опытных групп относи-

тельно контроля снизились в 1,4 и 1,3 раза, тогда как наиболее низкий уро-

вень средних молекул отмечался в третьей опытной группе (0,18 усл. ед.).

При этом снижение составило 1,56 раза, что может свидетельствовать о более выраженном корригирующем влиянии тиононтрита-S на функциональную ак-

тивность систем детоксикации и катаболизм белков.

Об адекватном выведении продуктов экзо- и эндогенной интоксикации и снижении продуктов пептидной природы в крови крыс опытных групп сви-

детельствует и снижение уровня средних молекул при длине волны λ = 280 нм

– в 1,15, 1,19 и 1,35 раза.

Антитоксический механизм действия бентонита и нонтронита в основ-

ном основан на механической адсорбции микотоксинов, тогда как детоксика-

ция тиононтритом-S имеет более сложный механизм. С одной стороны,

алюмосиликат нонтронит обеспечивает высокий процент адсорбции микоток-

синов на своей поверхности, образуя при этом комплекс микотоксина и нонтронита, обладающий высокой стабильностью.

С другой стороны, образующиеся при диссоциации препарата ионы се-

ры, инактивируют метаболиты микотоксинов. Процесс детоксикации токсич-

ных метаболитов грибов происходит в печени и весь сложный процесс био-

трансформации микотоксинов в организме базируется на двух основных эта-

пах – метаболизации и коньюгации. В процессе метаболизации микотоксины подвергаются гидролизу, окислению, восстановлению и другим различным реакциям и в результате появляются новые функциональные группировки,

186

являющиеся активными центрами коньюгации. Образующиеся при диссоциа-

ции тиононтрита-S ионы серы соединяются в процессе коньюгации с метабо-

литами токсинов грибов, что блокирует функциональные группы –СООН и – ОН и как следствие приводит к снижению токсичности. Также ионы серы по-

вышают плотность цитоплазматической мембраны, что снижает проникнове-

ние внутрь клеток токсических веществ с последующим уменьшением нега-

тивных изменений во внутриклеточном метаболизме.

Таким образом, результаты настоящего исследования показали, что при-

менение природных алюмосиликатных минералов лабораторным крысам на фоне хронического сочетанного микотоксикоза, способствует снижению ток-

сической нагрузки на организм, улучшению клинического состояния, нормали-

зации морфологических и биохимических факторов крови, а также уменьше-

нию выраженности эндогенного («метаболического») токсикоза. При этом, в

сравнительном аспекте, наиболее выраженный терапевтический эффект был выявлен у тиононтрита-S, что обусловлено более сложным действием препара-

та, основанным на синергизме двух различных механизмов действия.

3.3.3Влияние гепрасана на показатели иммунитета цыплят-бройлеров

Всовременном промышленном птицеводстве только та птица способна давать ожидаемый эффект, которая обладает высокой естественной рези-

стентностью к неблагоприятным факторам. Напряженный обмен веществ,

вызванный интенсивным типом кормления, некачественные корма, наличие в них микотоксинов, обуславливает интенсивную функциональную деятель-

ность всех органов, регулирующих защитные механизмы организма, что приводит к ослаблению устойчивости организма, повышению восприимчи-

вости к условно-патогенной микрофлоре, к воздействию неблагоприятным факторам внешней среды. При этом большое значение в повышении есте-

ственной резистентности и иммунологической реактивности птицы имеет

187

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

оптимальный уровень поступления микро- и макроэлементов, витаминов

(Хаустов В.Н., 2003).

Опыт по определению влияния гепрасана на естественную резистент-

ность и иммунологические показатели цыплят-бройлеров был проведен в условиях ЗАО «Курганинский мясоптицекомбинат». С этой целью было сформировано две группы цыплят 15-дневного возраста (опытная и кон-

трольная, n=45). Межгрупповые различия заключались в том, что цыплятам опытной группы дополнительно к основному рациону скармливали гепрасан

вдозе 1% к сухому веществу рациона в течение двух недель.

Втечение всего периода эксперимента за цыплятами вели ветеринарный контроль, проводили взвешивание и взятие крови в начале и конце опыта.

Входе проведенного исследования было установлено, что назначение гепрасана цыплятам-бройлерам оказало позитивное влияние на параметры иммунитета относительно фоновых показателей и показателей контроля

(таблица 41).

На фоне применения гепрасана отмечено увеличение уровня лейкоци-

тов на 6,9%, что свидетельствует об усилении лейкопоэза, тогда как в кон-

троле уровень лейкоцитов снижался от фоновых показателей на 9,2%.

Анализ лейкограммы показал, что под влиянием гепрасана изменялось процентное соотношение клеток белой крови: в лейкоформуле опытных цыплят достоверно преобладали (Р ≤ 0,05) лимфоциты (70,37%), увеличение содержания лимфоцитов относительно фоновых показателей составило

29,5%. Повышение уровня лимфоцитов в крови отмечается при усилении специфического иммунитета птиц, поскольку эти клетки являются основным исполнительным звеном в проявлении клеточной и гуморальной защиты ор-

ганизма (Гаврилов Ю.А., 2007).

Применение гепрасана способствовало повышению уровня фагоцитоза и других показателей неспецифической резистентности. Так, способность фагоцитов периферической крови цыплят опытной группы фагировать мик-

188

робные клетки при постановке реакции ОФР (опсонофагоцитарная реакция)

на конец эксперимента возросла на 48,3% и на 6,5% относительно фагоци-

тарной активности контрольной птицы.

Таблица 41 – Влияние гепрасана на иммунитет цыплят-бройлеров (М±m; n=45)

Показатель	Фон	Опыт	Контроль
Лейкоциты, 109/л	23,26±1,34	24,87±0,89	21,11±0,46
Базофилы, 109/л	0,07±0,05	0,10±0,71	0,13±0,05
Эозинофилы, 109/л	1,10±0,12	0,47±0,17**	0,51±0,19
Псевдоэозинофилы, 109/л	7,32±1,54	5,46±0,34	5,42±0,10
Лимфоциты, 109/л	13,51±0,12	17,50±0,88*	14,52±0,57
Моноциты, 109/л	1,26±0,17	1,34±0,08	0,53±0,05
Базофилы, %	0,30±0,24	0,40±0,24	0,61±0,24
Эозинофилы, %	4,72±0,47	1,89±0,62**	2,42±0,62
Псевдоэозинофилы, %	31,46±4,92	21,95±1,63	25,68±1,41
Лимфоциты, %	58,1±3,89	70,37±1,22*	68,78±1,47
Моноциты, %	5,42±1,03	5,39±0,47	2,51±0,41
Эритроциты, 1012/л	2,93±0,07	3,45±0,08*	3,17±0,04
Гемоглобин, г/л	88,00±4,71	106,33±1,65*	101,0±0,82
Цветной показатель, ед.	1,50±0,04	1,57±0,02	1,57±0,06
СОЭ, мм/час	0,7±0,24	0,6±0,24	1,00±0,41
ФА 30 мин, %	29,6±2,25	44,0±1,63*	41,3±0,85
ФА 120 мин, %	24,6±1,89	39,4±1,25*	36,3±0,62
ФЧ 30 мин, ед.	1,17±0,05	1,60±0,11*	1,37±0,10
ФЧ 120 мин, ед.	1,23±0,05	1,27±0,06	1,20±0,04
ФЕ 30 мин, 109/л	2,07±0,35	2,40±0,16	2,43±0,10
ФЕ 120 мин, 109/л	1,80±0,36	2,19±0,18	2,17±0,08
ФИ 30 мин, ед.	0,34±0,01	0,68±0,04*	0,57±0,04
ФИ 120 мин, ед.	0,30±0,01	0,51±0,04*	0,46±0,03
ЗФ, ед.	1,10±0,00	1,38±0,02*	1,17±0,02
Фарм. Поз. NBT сп. %	18,6±0,85	19,4±1,03	20,5±1,25
Фарм. Поз. NBT ст. %	27,0±1,08	31,0±0,71**	28,0±0,82
СЦИ сп.	0,20±0,01	0,21±0,01	0,21±0,01
СЦИ ст.	0,28±0,01	0,34±0,00*	0,29±0,01
КМ, ед.	1,00±0,00	1,27±0,10***	1,00±0,00
NK-клетки, %	4,15±0,62	4,17±0,24	3,51±0,21
NK-клетки, 109/л	0,56±0,08	0,73±0,05	0,51±0,02
T-лимфоциты, %	65,35±2,46	68,52±1,55	68,25±1,03
T-лимфоциты, 109/л	8,83±0,33	11,99±0,74*	9,91±0,41
B-лимфоциты, %	30,50±2,39	27,31±1,70	28,24±1,03
B-лимфоциты, 109/л	4,12±0,34	4,78±0,30	4,10±0,06
T/B, %	2,14±0,23	2,51±0,21	2,48±0,06
БАСК, %	76,8±1,59	82,0±0,62**	73,5±0,93
ЛАСК, ед./л	57,7±1,9	68,8±0,72*	63,0±0,66

Примечание: * – степень достоверности Р ≤ 0,001; ** –Р ≤ 0,01; *** –Р ≤ 0,05.

189

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Интенсивность (ФЧ) и завершенность фагоцитоза (ЗФ) в опытной группе повышались на 36,8% и 24,5% и превышали контроль на 16,8% и 10,5% соответственно.

Фагоцитарная емкость достоверных различий между показателями опытных и контрольных цыплят не имела.

Способность сыворотки оказывать бактерицидное и бактериостатиче-

ское действие на микроорганизмы (тест-культуру) у опытных цыплят на фоне применения препарата повышалась 14,1%, повышение уровня активно-

сти лизоцимасоставило 6,7%, что в комплексе свидетельствует о позитивном влиянии гепрасана на показатели неспецифической резистентности организ-

ма птицы.

Повышение количества фармазин позитивных фагоцитов в стимулиро-

ванном НБТ-тесте (биохимический критерий готовности к завершенному фа-

гоцитозу) при нагрузке составило 14,8% и превышало контроль на 10,7%, что свидетельствует о стимулирующем влиянии гепрасана на фагоцитарную и метаболическую функции гранулоцитов по образованию в цитоплазме гра-

нул фармазина. Повышение коэффициента мобилизации (окислительная спо-

собность мобилизации) в динамике составило 27%, в контроле этот показа-

тель остался на уровне фона.

На конец опыта средний цитохимический индекс стимулированный

(СЦИ ст.) был более высоким у цыплят опытной группы (повышение в дина-

мике составило 21,4% и превышало контроль на 17,2%), что свидетельствует об интенсивности метаболических процессов в организме опытных цыплят,

связанных с деградацией захваченного антигенного материала.

В отношении процентного содержания Т- и В-лимфоцитов особые из-

менения не выявлены, что возможно связано с тем что препарат не оказывает специфического влияния на дифференциацию Т- и В-лимфоцитов, хотя абсо-

лютное количество Т-лимфоцитов у опытных цыплят превышало контроль

190