- •Иммунология. Занятие №7. Иммунные реакции
- •Серологические реакции – понятие, свойства, применение
- •Реакция агглютинации – определение, компоненты, применение.
- •С тадии реакции агглютинации, учёт результатов (о-, н-агглютинация)
- •Внешние проявления ра
- •Способы постановки реакции агглютинации – ориентировочная и развернутая. Титр реакции агглютинации.
- •Ориентировочная
- •Развернутая (р-я Видаля, Грубера)
- •Варианты реакции агглютинации.
- •Реакция преципитации – определение, компоненты, применение.
- •С пособы постановки реакции преципитации.
- •Реакция связывания комплемента – компоненты, фазы, применение.
- •2 Фаза (индикаторная):
- •Механизм, учет результатов реакции связывания комплемента.
- •Реакция иммуноблотинга, реакция нейтрализации токсина антитоксином (in vivo, in vitro).
- •Реакции с мечеными антигенами и антителами.
Реакция преципитации – определение, компоненты, применение.
Реакция преципитации (РП) - осаждение антигена под воздействием специфических антител в растворе электролита.
Компоненты:
Преципитин – антитело, участвующее в РП
Преципитиноген – антиген, участвующий в РП
Преципитат – иммунный комплекс (осадок), образующийся в результате РП
Применение РП:
Диагностика инфекционных заболеваний (менингококковые инф., полиомиелит, сибирская язва, малярия, гепатит В и т.п.)
Судебная медицинская экспертиза: определение видовой принадлежности белков – при анализе кровавых пятен, спермы и т.п.
Санитарная практика
Выявление фальсификации рыбных и мясных изделий
С пособы постановки реакции преципитации.
Кольцепреципитация (в пробирке)
На иммунную сыворотку наслаивают растворимый АГ.
+ реакция: на границе растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата
Реакция термопреципитации
АГ получают кипячением и фильтацией водного экстракта органов или тканей (реакция Асколи – сибирская язва)
Реакция флоккуляции (по Рамону)
В качестве АГ участвует токсин или анатоксин.
Н а границе между АГ и АТ помутнение в виде «облака».
Применяют для определения активности антитоксической сыворотки или анатоксина.
Наиболее интенсивная и ранняя (инициальная) флоккуляция в пробирке, где АГ и АТ в эквивалентных соотношениях.
Реакция преципитации в геле
Радиальная иммунодиффузия по Манчини
В агаровом геле с иммунной сывороткой делают лунки, в них помеают антиген, он диффундирует в гель.
Антиген в геле образует с АТ кольца преципитации вокруг лунок.
Встречная иммунодиффузия по Оухтерлони
В лунки раздельно помещают АГ и АТ. Они диффундируют в агар, навстречу друг другу. Между ними образуются полосы - «усы» преципитации.
В многокомпонентных системах появляется несколько линий преципитата:
- у идентичных АГ – линии сливаются
- у неидентичных АГ – линии пересекаются
Реакция связывания комплемента – компоненты, фазы, применение.
Основана на активации комплемента комплексом АГ-АТ
Применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний, в частности сифилиса (реакция Вассермана).
Фазы реакции:
1 фаза: инкубация смеси трёх компонентов: антиген+антитело+комплемент
2 Фаза (индикаторная):
добавление гемосистемы – эритроциты барана + гемолитическая сыворотка
У баранов эритроциты осмотически резистентны.
Гемолитическая сыворотка – антитела к эритроцитам барана. Получают путём иммунизации кроликов эритроцитами барана.
Механизм, учет результатов реакции связывания комплемента.
П ри соответствии антитела антигену образуется иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент.
В этом случае гемолиза НЕ происходит (+ реакция).
Если антиген и антитело НЕ соответствуют друг другу: ИК НЕ образуется, комплемент остаётся свободным и во 2 фазе присоединяется к комплексу эритроцит+гемолитическая сыворотка
В этом случае происходит гемолиз эритроцитов
(–реакция).