Протокол лабораторная работа 4
.docУчреждение образования
«Белорусский государственный педагогический университет имени Максима Танка»
ПРОТОКОЛ
выполнения
лабораторной работы № 4
Маслянокислое брожение бактерий
по микробиологии
студента 3 курса группы 31
__________________________
ФИО
Минск 2012
Цель занятия. Изучить свойства микроорганизмов, осуществляющих маслянокислое брожение.
Материалы и оборудование.
На группу:
1.Клубни картофеля.
2. Мел.
3. Большие пробирки, ватные пробки, резиновые пробки.
4. Пипетки.
2. Спички, карандаш по стеклу.
3. Иммерсионное масло.
На рабочее место (на 2 человека):
1. Микроскоп.
2. Микробиологическая петля с петледержателем.
3. Спиртовка.
4. Предметные стекла.
5. Покровные стекла.
6. Прибор для окрашивания и промывания мазков.
7. Полоски фильтровальной бумаги.
8. Реактивы для окраски микробиологических препаратов.
9. 5% раствор хлорного железа.
Задачи.
1. Ознакомиться с основными видами микроорганизмов, осуществляющими маслянокислое брожение.
2. Создав элективные условия получить накопительную культуру бактерий рода Clostridium, осуществляющих маслянокислое брожение.
3. Провести исследование свойств бактерий, осуществляющих маслянокислое брожение.
Задание 1. Ознакомиться с основными видами микроорганизмов, осуществляющими маслянокислое брожение. Заполнить таблицу 1.
Вопрос |
Правильный ответ (ответы) |
Характерные признаки микроорганизмов рода Clostridium, осуществляющих маслянокислое брожение |
А)Анаэробы Б)Подвижные В)Спорообразующие Г)Грамположительные Д)Грамотрицательные Е)Кокки Ж)Палочки |
Для микроорганизмов рода Clostridium характерно наличие в клетках |
А)Волютина Б)Гранулезы В)Крахмала |
Элективные условия для выделения из окружающей среды микроорганизмов рода Clostridium, осуществляющих масляннокислое брожение, создают, используя следующие приемы |
А) проведение пастеризации Б) нейтрализация среды В) создание анаэробных условий Г) использование гранулезы |
Задание 2. Работа выполняется в 2 этапа.
Этап 1. Получить накопительную культуру маслянокислых бактерий.
-
Неочищенный картофель нарезать ломтиками, которые могут легко войти в пробирку.
-
Заполнить ими пробирку на 1/3 объема, добавить щепотку мела и заполнить водой почти до верха. Закрыть ватной пробкой.
-
Пробирки поместить в водяную баню при температуре 800С на 10-15 мин.
-
Вынуть ватные пробки и быстро заменить их резиновыми, проводя последние через пламя спиртовки и обжигая край пробирок.
-
Затем пробирки закрыть пробками и ставить в термостат с температурой 350С.
Элективные условия для прохождения в опыте маслянокислого брожения:
1) наличие крахмала как специфического источника углерода, который используется только микроорганизмами, содержащими фермент амилазу, вызывающую гидролиз крахмала до глюкозы;
2) присутствие маслянокислых бацилл на поверхности картофеля;
3) анаэробные условия под высоким столбиком жидкости;
4) нейтральная среда за счёт внесения мела;
5) пастеризация, позволяющая отделить маслянокислые бациллы от неспоровых форм.
Этап 2. Исследовать микроорганизмы маслянокислого брожения.
Задание 1. С помощью пипетки взять жидкость со дна пробирки, приготовить препарат «раздавленная капля» с добавлением раствора Люголя и «висячую каплю».
Культуру микроскопировать, в ней обнаруживается главным образом Clostridium pasteurianum – подвижные палочки с закругленными концами, одиночные и парные. В старых культурах у одного из концов клетки обнаруживается спора.
Задание 2. Исследовать спорообразование по Ауэски. Результаты занести в таблицу 1. Сделать рисунок.
Задание 3. С культуральной жидкостью проводят качественную реакцию на масляную кислоту. Для этого к 5 мл жидкости добавляют 2 мл 5%-ного хлорного железа. При нагревании образуется маслянокислое железо коричневого цвета.
Таблица 1.
Метод, использованный для изучения морфологии |
Внешний вид препарата при микроскопировании |
Вывод |
1. «Висячая капля» |
|
|
2. «Раздавленная капля» с раствором Люголя |
|
|
3. Метод Ауэски для выявления спорообразования |
|
|
Сделать обобщающий вывод по результатам исследования.