- •Развитие гистологии
- •Взаимосвязь гистологии с другими науками.
- •Методы исследования в гистологии.
- •Методы исследования фиксированных клеток и тканей.
- •Методы использования живых клеток и тканей.
- •Количественные методы.
- •Морфометрические методы.
- •Понятие о тканях. Эволюция тканей.
- •Гибель клеток
- •Эволюция тканей.
- •Классификация тканей.
- •Эпителиальные ткани.
- •Классификация эпителиев:
- •Многослойные эпителии.
- •Эпителии беспозвоночных и позвоночных животных.
- •Погруженные, однослойные и многорядные эпителии.
- •Железистый эпителий.
- •Классификация экзокринных желез.
- •Секреторный цикл.
- •Железы внешней секреции у животных.
- •Ткани внутренней среды.
- •Мезенхима.
- •Кровь. Клетки крови.
- •Функции крови.
- •Плазма крови.
- •Форменные элементы крови.
- •Эритроциты.
- •Типы гемоглобина.
- •Лейкоциты.
- •Гранулоциты.
- •Эозинофильные гранулоциты (эозинофилы).
- •Базофильные гранулоциты или базофилы.
- •Кровь. Агранулоциты (незернистые лейкоциты).
- •Лимфоциты.
- •Моноциты.
- •Кровяные пластинки.
- •Развитие крови как ткани. Кроветворение (гемопоэз).
- •Эмбриональный гемопоэз.
- •Кроветворение в печени.
- •Кроветворение в тимусе.
- •Кроветворение в селезенке.
- •Кроветворение в лимфатических узлах.
- •Кроветворение в костном мозге.
- •Постэмбриональный гемопоэз.
- •Эритроцитопоэз.
- •Гемопоэз. Гранулоцитопоэз.
- •Мегакариоцитопоэз. Тромбоцитопоэз.
- •Лимфопоэз.
- •Моноцитопоэз.
- •Регуляция гемопоэза.
- •Возрастные изменения крови.
- •Кровь у беспозвоночных и позвоночных животных.
- •Кроветворение у беспозвоночных и позвоночных животных.
- •Соединительные ткани. Собственно соединительная ткань.
- •Классификация соединительной ткани.
- •Рыхлая волокнистая соединительная ткань
- •Основные клетки соединительной ткани.
- •Межклеточное вещество рыхлой соединительной ткани (матрикс).
- •Аморфный компонент межклеточного вещества
- •Плотные волокнистые соединительные ткани.
- •Плотная неоформленная соединительная ткань.
- •Плотная оформленная соединительная ткань.
- •Фиброзные мембраны.
- •Соединительные ткани со специальными свойствами.
- •Ретикулярная ткань.
- •Жировая ткань.
- •Бурая жировая ткань.
- •Слизистая ткань.
- •Пигментная ткань.
- •Интерстициальные трофические ткани, паренхима и мезоглея беспозвоночных животных.
- •Хрящевая ткань. Гистогенез хрящевой ткани.
- •Хрящевые ткани.
- •Гиалиновая хрящевая ткань.
- •Эластическая хрящевая ткань.
- •Волокнистая хрящевая ткань.
- •Гистогенез хрящевой ткани.
- •Возрастные изменения хрящевой ткани.
- •Скелетные опорные ткани беспозвоночных животных.
- •Костные ткани.
- •Клетки костной ткани.
- •Ретикулофиброзная костная ткань.
- •Пластинчатая костная ткань.
- •Гистологическое строение трубчатой кости как органа.
- •Рост трубчатых костей
- •Гистогенез костной ткани (остеогистогенез).
- •Прямой остеогистогенез.
- •Развитие кости на месте хряща или непрямой остеогистогенез.
- •Мышечные ткани.
- •Гладкие мышечные ткани.
- •Мышечная ткань эпидермального происхождения.
- •Мышечная ткань нейрального происхождения.
- •Поперечнополосатые мышечные ткани.
- •Типы мышечных волокон.
- •Сердечная мышечная ткань.
- •Мышечные ткани многоклеточных животных.
- •Гладкие мышцы беспозвоночных животных.
- •Нервная ткань. Нервные клетки.
- •Нейроны (нейроциты).
- •Секреторные нейроны – нейросекреторные клетки.
- •Нервные волокна.
- •Нервная ткань. Нервные окончания. Синапсы. Нейроглия.
- •Синапсы.
- •Химические синапсы
- •Эфекторные нервные окончания.
- •Рецепторные нервные окончания.
- •Нейроглия.
- •Глия центральной нервной системы.
- •Микроглия.
- •Глия периферической нервной системы.
- •Рефлекторная дуга.
Методы исследования фиксированных клеток и тканей.
Препарат может представлять мазок (крови, костного мозга, слюны, цереброспинальной жидкости и др.), отпечаток (селезенки, тимуса, печени), пленку из ткани (соединительной рыхлой, брюшины, плевры), тонкий срез (наиболее часто используемый).
Процесс приготовления гистологического препарата для световой и электронной микроскопии включает следующие этапы:
взятие материала и фиксация его;
уплотнение материала;
приготовление срезов;
окрашивание;
заключение в бальзам (для световой микроскопии).
Фиксация сохраняет структуру клеток, тканей и органов, предотвращает их бактериальное загрязнение и ферментное переваривание, стабилизирует макромолекулы путем химического их сшивания. Маленький образец органа погружают в фиксатор (спирт, формалин, осьмиевая кислота и др.) или замораживается.
Фиксация приводит к уплотнению кусочков. Уплотнение их продолжают удалением воды – обезвоживанием в спиртах возрастающей концентрации от 60º до 100º, пропитыванием парафином или целлоидином, или заливают в пластические среды и смолы (глутаральдегид).
Приготовление срезов производится при помощи микротома (для световой микроскопии) и ультрамикротома (для электронной микроскопии) – специальных приборов.
Стальной нож микротома позволяет получить срезы толщиной 3-8 мкм из залитых в парафин, целлоидин или полиэтиленгликоль кусочков ткани.
Стекляные или алмазные ножи позволяют получать срезы толщиной 1-5 мкм (для электронной микроскопии).
Срезы для световой микроскопии помещают на предметное стекло.
Окрашивание срезов (в световой) или напыление их солями металлов (в электронной микроскопии) производят для увеличения контрастности изображения отдельных структур при рассматривании их в микроскопе.
Перед окрашиванием срезы депарфинируют и доводят до воды в спиртах нисходящей концентрации. Методы окраски гистологических препаратов очень разнообразны и выбираются в зависимости от задач исследования. Гистологические красители подразделяют на кислые, основные и нейтральные.
Кислые красители (например, эозин, конгокрасный) связываются со структурами, имеющими щелочную реакцию (цитоплазматические белки), их называют оксифильными.
Основные или щелочные красители (гематоксилин, метиленовый синий, азур) связываются с базофильными (кислыми) компонентами ткани (нуклеиновые кислоты ядра, рибосомы).
Нейтральные или стандартные красители представляют собой смеси кислых и щелочных красителей (гематоксилин и эозин). Их называют нейтрофильными. Для сохранения препарат заключают в канадский бальзам, покрывая объект покровным стеклом.
Для электронной микроскопии материал на специальной сетке контрастируют солями тяжелых металлов, используя соли марганца, кобальта, после чего их просматривают на микроскопе и фотографируют. Изучают микрофотографии.
Гистологические методы позволяют установить локализацию определенных веществ или биохимических процессов в тканевых и клеточных структурах. Также используют гистоферментные реакции, при этом помещают срезы в раствор субстрата, и специального вещества, способного образовать конечный продукт реакции в виде окрашенного осадка.
Для некоторых клеток и органелл характерны ферменты – маркеры. Например, для лизосом – кислая фосфатаза, для митохондрии – сукцинатдегидрогеназа и цитохромоксидаза, для эндоплазматической сети – глюкозо-6-фосфатаза.
Для иммуногистохимии используют реакции, основанные на специфическом взаимодействии меченых антител с тканевыми антигенами.