2 курс / Нормальная физиология / Практикум_по_нормальной_физиологии_Часть_1_Зинчук_В_В_ред_

Схема свертывания крови. F – плазменный фактор свертывания. Римская цифра указывает номер фактора (Нормальная физиология: учеб. по-

собие. Часть I // В.В. Зинчук, О.А. Балбатун, Ю.М. Емельянчик / под ред. В.В. Зинчука. – Гродно: ГрГМУ, 2007, см. соответствующий раздел).

41

УПРОЩЕННАЯ СХЕМА СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ

Сосудисто-тромбоцитарный	Коагуляционный гемостаз
гемостаз	Свертывающая система крови
Рефлекторный спазм		Повреждение сосуда
повреждённых сосудов		и другие факторы

Адгезия тромбоцитов

Обратимая агрегация
тромбоцитов	Тканевый	Тромбоцитарный
	тромбопластин	и эритроцитарный
		тромбопластин
Необратимая агрегация
тромбоцитов

Образование белого тромба

	Тканевая	Кровяная
Ретракция	I фаза	Протромбиназа

II фаза

Протромбин Тромбин

III фаза

Фибрин-Фибрин- Фибриноген полимер мономер

(фибрин «S»)

Фибрин «I» КРАСНЫЙ ТРОМБ

Ретракция

42

ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ:

1.* «Физиология крови» (контролирующе-обучающая программа, дистанционно).

2.Решение ситуационных задач.

3.Определение групп крови при помощи стандартных сывороток

Группы крови отличаются друг от друга содержанием агглютиногенов и агглютининов. По системе АВО выделяют четыре группы крови: I(0αβ) – не содержит агглютиногенов, в плазме крови находятся агглютинины αβ; II(Аβ) – содержит агглютиноген А, агглютинин β; III(Вα) – агглютиноген В, агглютинин α; IV(АВ) – агглютиногены А и В. В основе определения групповой принадлежности крови лежит реакция агглютинации, обусловленная наличием в мембране эритроцитов определенных агглютиногенов (А, В), а в плазме крови – агглютининов (α, β). Реакция агглютинации происходит при контакте одноименных агглютиногенов и агглютининов (например, А и α или В и β).

Оснащение: пробирки с исследуемой кровью, 2 серии стандартных сывороток I, II, III и IV группы, планшетка, стеклянные палочки, спирт, марлевые салфетки или ватные шарики, физиологический раствор.

Ход работы: Определение группы крови проводится при температуре +150 – +250С. На маркированную планшетку наносят (не смешивая!) по капле стандартной сыворотки I, II, III группы (2 серии в соответствующие лунки), содержащие агглютинины: I – α и β, II – β, III – α. После их нанесения получается шесть капель, расположенных в два ряда. Стеклянной палочкой переносят небольшое количество крови в первую лунку с каплей сыворотки I группы, затем вторым, чистым концом палочки такое же количество крови переносят во вторую лунку с сывороткой II группы. Третью каплю переносят в третью лунку с сывороткой III группы промытым и насухо вытертым концом палочки. Это же проделывают со стандартными сыворотками второй серии. Соотношение крови и сыворотки – 1:10. Каждый раз тщательно размешивают кровь в капле сыворотки, пока смесь не станет равномерно розового цвета. За ходом реакции, в общей сложности, наблюдают не менее 5-ти минут, периодически покачивая тарелку. В капли, где к третьей минуте наблюдения произошла агглютинация, вносят по капле физ.раствора и наблюдают еще две минуты. Добавление физиологического раствора не разрушает истинной агглютинации и позволяет отдифференцировать ее от псевдоагглютинации, обусловленной самопроизвольным склеиванием эритроцитов в монетные столбики. При наличии агглютинации капля становится бесцветной, а эритроциты склеиваются в виде комочков. Результат оценивается по наличию агглютинации. Эритроциты группы 0 (I) не содержат антигенов и в реакцию агглютинации не вступают. Эритроциты группы А (II) не дают агглютинации только с сывороткой своей группы, эритроциты В (III) также не дают агглютинации только с сывороткой своей группы. Если во всех сыворотках произошла агглютинация, то для исключения неспецифической панагглютинации и подтверждения, что это эритроциты IV группы крови, следует дополнительно исследовать их стандартной сывороткой группы АВ (IV). Для этого используется одна сыворотка, исследование проводится с соблюдением всех вышеуказанных условий. Сыворотка группы АВ (IV) не содержит никаких антител, а поэтому не должна давать агглютинации.

43

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте полученную картину,

установите, к какой группе относится исследуемая кровь.

Результаты работы:

I (α β) II (β)

III (α)

Серия I

Серия II

IV (-)

Вывод:

4.Определение резус-факторной принадлежности экспресс- методом

Rh-фактор – один из наиболее распространенных агглютиногенов эритроцитов. Он содержится в мембране эритроцитов у 85% людей (кровь резусположительная, Rh+), у 15% данный агглютиноген отсутствует (кровь резусотрицательная, Rh-). Его содержание не зависит от наличия других агглютиногенов эритроцитов. Rh-фактор не имеет в плазме врожденных агглютининов, однако может являться причиной развития резус-конфликта при беременности и несовместимости крови при повторном ее переливании.

Оснащение: кровь, планшетка, стеклянная палочка, пипетки, физиологический раствор, спирт, стандартная антирезус сыворотка и контрольная сыворотка (не содержащая антирезус антител), ватные шарики.

Ход работы: Определение резус-принадлежности в пробирках без по-

догрева. Для проведения данного исследования используется стандартный универсальный реагент антирезус анти-D. На дно пробирки наносят одну каплю универсального реагента антирезус и добавляют одну каплю исследуемой крови. После чего осторожными движениями поворачивают пробирку, наклоняя почти до горизонтального положения, чтобы образовавшаяся жидкость растекалась по стенкам пробирки. Через 5 минут после внесения эритроцитов в пробирку добавляют 2-3 мл физиологического раствора. Пробирку осторожно переворачивают 3 раза. Затем читают результат. Наличие глыбок агглютинатов

44

свидетельствует о содержании в эритроцитах резус-фактора. В случае резусотрицательной крови агглютинация не наблюдается.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте полученную картину,

установите резус-фактор исследуемой крови.

Результаты работы:
Антирезус-сыворотка	Контрольная сыворотка

Кровь Rh+

Кровь Rh-

Вывод:

Тема зачтена ___________подпись преподавателя

45

ОСНОВНЫЕ ФОРМУЛЫ ПО РАЗДЕЛУ

Закон Фика описывает процессы пассивной диффузии О2 (СО2) в капилляре:

	mO2	= − D S	pO2	,
	t		l

где mO2/ t – скорость диффузии;

D – константа диффузии, мл О2/м ·мин · мм рт. ст.; S – площадь диффузии, м2;

l – расстояние диффузии, м;

pO2 – градиент напряжения кислорода, мм рт. ст.

Кислородная емкость крови (КЕ):

KE = Hb Г ,

где Hb -концентрация гемоглобина, г/л; Г – константа Гюфнера, 1,36 мл О2/г.

Цветовой показатель крови (ЦП):

ЦП = Hb 3 , Эр*

где Hb – концентрация гемоглобина, г/л;

*Эр – число эритроцитов (первые три цифры).

Среднее содержание гемоглобина в эритроците (СГЭ):

Hb

СГЭ = Эр ,

где Hb – концентрация гемоглобина, г/л; Эр – число эритроцитов, 1012 л.

Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (КГЭ):

Hb

КГЭ = V Эр ,

где Hb – концентрация гемоглобина, г/л; V – объем эритроцитов, мкм3;

Эр – число эритроцитов, 1012 л.

Закон Ньютона, определяющий величину силы внутреннего трения между частицами ламинарного потока жидкости:

F = η S	v	,
	r

где F – сила трения, Н; η – вязкость, сПз;

S – площадь поверхности, м2;

v/ r – изменение скорости сдвига, сек-1.

46

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ

1.Какая функция крови обусловлена наличием в ней антител и фагоцитарной активностью лейкоцитов?

2.Какая функция крови обусловлена наличием в ней гемоглобина?

3.Каким звеном является кровь в процессах саморегуляции функции организма?

4.Кем было сформулировано представление о крови как системе?

5.Какие компоненты включает в себя система крови?

6.Сколько процентов составляет кровь в организме взрослого человека от массы его тела?

7.Что характеризует показатель гематокрита?

8.Чему будет равен объем плазмы, если общий объем крови 5 л, а гематокрит 40%?

9.Каково общее количество белка в плазме крови?

10.Какое давление создают белки плазмы крови?

11.Какой белковой фракцией преимущественно обеспечивается онкотическое давление плазмы?

12.Как изменяется онкотическое давление, если общее содержание белка в крови остается неизменным, а количество альбуминов уменьшается?

13.Какие основные группы кровезамещающих растворов используют в медицинской практике?

14.Какой белок плазмы крови обеспечивает транспорт железа?

15.Какой белок обеспечивает транспорт витамина В12?

16.Какова величина осмотического давления плазмы крови?

17.Введение какого раствора в сосудистое русло не изменит осмотического давления плазмы крови?

18.Какой анион в количественном плане преобладает во внеклеточной жидкости?

19.Как называется процесс разрушения оболочки эритроцитов и выход гемоглобина в плазму?

20.В результате чего происходит химический гемолиз?

21.Какой гемолиз называют биологическим?

22.Что произойдет с эритроцитами при помещении их в раствор с концентрацией NaCl 0,09%?

23.В чем заключается сущность эффекта Фареуса-Линдквиста?

24.Что отражает кривая Прайс-Джонса?

25.К какому газу железо гемической группы гемоглобина имеет наибольшее сродство?

26.Чем обеспечивается поддержание формы эритроцита в виде двояковогнутого диска?

27.Помимо дискоцита, какие еще формы эритроцита Вам известны?

28.Что обеспечивает дисковидная двояковогнутая форма эритроцита в сравнении со сфероцитом?

29.Что такое агрегация эритроцитов?

30.Какие факторы стимулируют эритропоэз?

47

31.Как почки реагируют на дефицит кислорода (гипоксию)?

32.Какой раствор используют для разведения при подсчете эритроцитов в камере Горяева?

33.Какой раствор используют для разведения при подсчете лейкоцитов в камере Горяева?

34.Какой раствор используют для определения СОЭ?

35.Как изменится СОЭ при накоплении в плазме крови крупномолекулярных белков (глобулинов, фибриногена)?

36.Как называется соединение гемоглобина с СО2?

37.Как называется соединение гемоглобина с О2?

38.Как называется соединение гемоглобина с СО?

39.Чему равен цветовой показатель (ЦП), если концентрация гемоглобина составляет 150 г/л, а количество эритроцитов – 4,5 10 12 /л?

40.Что характеризует цветовой показатель крови?

41.Чему равна кислородная емкость крови, если концентрация гемоглобина в ней составляет 100 г/л?

42.Какие из показателей крови женщины 25-ти лет (Hb – 105 г/л; СОЭ – 30 мм/час; эритроциты – 3,9 109/л; тромбоциты – 200 109 /л; лейкоциты – 10,9 10 9 /л; гематокрит – 40%) не соответствуют норме?

43.Что такое гипоксический индуцибельный фактор (HIF-1)?

44.Как и почему изменится количество эритроцитов у людей, живущих на больших высотах над уровнем моря?

45.Как называется распределение отдельных фракций лейкоцитов?

46.Как изменяется количество лейкоцитов после приема пищи, мышечной работы, при беременности, сильных эмоциях?

47.Что такое фагоцитоз?

48.Увеличением какой фракции лейкоцитов сопровождается паразитарная инфекция?

49.Какие клетки образуют гистамин при их стимуляции (например, при связывании антигена с поверхностно-клеточным IgE)?

50.Какая клетка дифференцируется в макрофаг после выхода из кровеносного русла в окружающие ткани?

51.Какие клетки крови имеют активную гистаминазу?

52.Какие функции присущи лимфоцитам?

53.Что такое апоптоз?

54.Какими давлениями определяется обмен жидкости на уровне капилляра?

55.В чем заключается функция системы гемостаза?

56.Укажите правильную последовательность процессов сосудистотромбоцитарного гемостаза.

57.Укажите правильную последовательность процессов коагуляционного гемостаза.

58.Какой фактор обеспечивает превращение растворимого фибринаполимера в нерастворимый фибрин?

59.Что такое плазмин?

48

60.Как называют вещества, препятствующие свертыванию крови?

61.Что такое агглютинины и агглютиногены?

62.Какая комбинация агглютиногенов и агглютининов соответствует I группе крови?

63.Какова групповая принадлежность крови, если при смешивании исследуемого образца со стандартными сыворотками агглютинация произошла с сыворотками I и III групп?

64.Какова групповая принадлежность крови, если при смешивании исследуемого образца со стандартными сыворотками агглютинация произошла с сыворотками I и II групп?

65.В каком случае может наблюдаться резус-конфликт между матерью и плодом?

ЗАДАЧИ ПО РАЗДЕЛУ

1.Почему забор крови для исследования выполняют утром и натощак?

2.Артериальная и венозная кровь визуально отличаются. На чем основано это различие?

3.Количество эритроцитов у человека в течение ряда лет колебалось около 4,8 1012/л. После его переселения в другой регион число эритроцитов в крови увеличилось до 6,5 1012/л. В какую местность переехал человек?

4.У практически здорового абитуриента содержание эритроцитов в крови составило 6,5 1012/л. С чем может быть связано это отклонение от нормы?

5.У спортсмена во время соревнований была взята кровь на допингконтроль. После проведенных лабораторных исследований было выявлено повышенное содержание гемоглобина – 210 г/л, содержание эритроцитов составило 6,5 1012/л. Спортсмен был дисквалифицирован. Что послужило причиной принятия такого решения медицинской комиссией?

6.У практически здорового спортсмена взяли кровь на анализ в 14:30. Содержание лейкоцитов составило 11 109/л. С чем это может быть связано?

7.Содержание гемоглобина в крови больного – 90 г/л. Оцените полученный показатель. Какие изменения количества эритроцитов можно предположить?

8.Определить ориентировочную долю кровопотери (в %), если в результате повреждения сосудов у пострадавшего массой 100 кг потеряно

600-800 мл крови?

9.Чем отличается реакция эритрона на гипоксию у нефрэктомированных животных от реакции нормальных собак?

10.Почему у людей, страдающих хронической почечной недостаточностью развивается анемия?

49

11.Почему хронические заболевания, такие как ревматоидные артриты, рак, синдром приобретенного иммунного дефицита часто сопровождаются анемиями?

12.Преступник, чтобы скрыть следы преступления, сжег окровавленную одежду жертвы. Однако судебно-медицинская экспертиза на основании анализа пепла установила наличие крови на одежде. Каким образом?

13.Человек найден мертвым в своей квартире. При осмотре места происшествия обнаружено, что в комнате плотно закрыты окна, а в печи еще теплые угли. В связи с этим возникло подозрение об отравлении угарным газом. Можно ли с помощью спектрального анализа крови подтвердить или опровергнуть это предположение?

14.При спектральном анализе гемоглобина крови человека установлено, что этот человек подвержен одной из широко распространенных вредных привычек. Какой именно и как это установили?

15.У студента, принимавшего во время сессии с целью повышения работоспособности фенацетин, обладающего свойствами сильного окислителя, появились все признаки кислородной недостаточности. Однако клинический анализ показал, что число эритроцитов и Hb находится в пределах нормы, сердце работает нормально, а количество кислорода

ввоздухе достаточно. О какой причине можно думать, и какой анализ крови может помочь в установлении причины появления таких симптомов?

16.Как должна была бы измениться работа сердца, если бы гемоглобин не содержался в эритроцитах, а был растворен в плазме крови?

17.Проведите расчет цветового показателя, если количество эритроцитов

впериферической крови 4,5 1012/л, концентрация гемоглобина 150 г/л.

18.При помещении в раствор поваренной соли эритроциты приобрели шаровидный вид. В раствор какой процентной концентрации поместили эритроциты?

19.Можно ли человеку при отсутствии пресной воды пить морскую воду? Почему некоторые птицы (например, альбатросы) могут пить морскую воду?

20.По данным анализа, у одного больного СОЭ равно 45 мм/ч, у другого

– 105 мм/ч. Ваше заключение об изменении этого показателя.

21.У больного через 40 мин после переливания крови появились признаки гемотрансфузионного шока. Чем они вызваны?

22.Причины развития резус-конфликта при беременности. Почему у матери, имеющей резус-отрицательную кровь, первая беременность может привести к резус-конфликту?

23.Почему у беременной женщины, имеющей резус-положительную кровь, не произойдет развитие резус-конфликта, даже если у мужа кровь резус-отрицательная?

50