6. Основные этапы исследования экстракта из биологического материала на лекарственные вещ-ва. Методы, использующиеся на каждом из этапов

Объекты исследования → изолирование ядов → очистка, концентрирование, разделение (ТСХ, экстракционный м-д) →предварительные исследования (ТСХ-скрининг) → ТСХ-скрининг в общих системах растворителей → ТСХ-скрининг в отдельных системах растворителей → подтверждающие исследования (физико-химические м-ды – спектроскопия, хроматография, электрофорез; фармакологические пробы; химические м-ды – р-ции осаждения, окрашивания, микрокристаллические р-ции) → количественное определение (все физико-химические м-ды приведенные ранее).

7. Назовите специальные м-ды изолирования барбитуратов. Их характеристика.

1. М-д Валова.

Экстракция биологического материала водным раствором натрия гидроксида →центрифугирование → высвобождение центрифугата от белков (подкисливают серной к-той до рН=2, добавляют раствор натрия вольфрамата, кипятят, центрифугируют) → процеживание центрифугата → экстракция кислого центрифугата эфиром → экстрация водой после подщелачивания → экстракция эфиром после подкисления водной вытяжки до рН=2.

2. М-д Поповой

Наставивание биологического материала с водой, подксиленной до рН=2-3 кислотой серной 3 раза →процеживание и центрифцгирование вытяжки →очистка центрифугата методом гель-хроматографии →экстракционное концентрирование с помощью хлороформа →выпаривание хлороформной вытяжки

8 Методы очистки экстрактов из биологического материала. Какие используются чаще всего

1. Фильтрование и центрифугирование (чаще)

2. Осаждение белков различными реактивами или при помощи температуры, высаливания, изменения рН (чаще)

3. Экстракция (чаще)

4. Хроматография (чаще)

5. Электрофорез на бумаге

6. Дистилляция с водяным паром и метод сублимации

7. Диализ

9. Какой метод изолирования используется при направленном судебно-токсикологическом исследовании на алкалоиды. Его характеристика

Подготовка объекта к исследованию → 2-3 кратное настаивание объекта с 0,2ммоль/л раствором серной к-ты при рН=2,5 → Очистка первичных вытяжек → Очистка высаливанием безводным сульфатом аммония → центрифугирование → 2-кратная экстракция диэтиловым эфиром → подщелачивание кислой водной вытяжки раствором натрия гидроксида до рН=8,5-9 → экстракция веществ из из щелочной вытяжки хлороформом (3-4 раза) → объединение хлороформных вытяжек → исследование алкалоидов.

10. Назовите группы лек.В-в соответственно их характеру поглощения в уф-области спектра. Примеры

1) не имеют характерного спектра поглощения (пахикарпин, конин)

2) имеют выборочное поглощение, которое не зависит от рН среды (атропин, промедол)

3) имеют выборочное поглощение, которое зависит от рН среды (морфин, барбитураты)

11. На чем основана экстракционная очистка биологических вытяжек. Рассмотреть на примере кислой и щелочной хлороформной вытяжек

В основе метода лежит закон распределения вещ-в между растворителями, которые не смешиваются, а также их способность растворяться в органических растворителях, а солей, ими образованных, - в воде. Метод простой, доступный, эффективный. Для экстракции примесей из вытяжек необходимо установление соответствующего значения рН и использование соответствующего растворителя. При неправильном выборе этих факторов вместе с примесями могут экстрагироваться и яды. (Схемы на стр.94)