3 курс / Фармакология / Миронов_А_Н_,_Бунатян_Н_Д_и_др_Руководство_по_проведению_доклинических

2.3. Новые лекарственные средства и биологические препараты

Новые или недостаточно изученные ВВ, предлагаемые для использования в составе оригинальных препаратов, должны иметь в досье адекватные данные по оценке безопасности их применения. Эти данные могут быть представлены отдельно или в общем досье на препарат. Настоящие методические рекомендации содержат рекомендации по доклинической оценке безопасности ВВ, для которых отсутствуют достаточные сведения о применения у человека. Представляемые данные должны убедительно свидетельствовать о безопасности применения ВВ в составе препарата в используемых дозах.

2.4. Необходимость дополнительных данных о безопасности

Необходимы дополнительные сведения о безопасности ВВ, если предлагаемые условия их применения не вполне обоснованы представленными данными (объем исследований, путь введения, дозы, показания). Так например, могут потребоваться сведения о фармакокинетике ВВ, которые быстро всасываются или биотрансформируются. При необходимости могут быть запрошены также результаты исследования взаимодействия ВВ с активным веществом. Предлагаемые условия нового ВВ, например применение у детей, также может потребовать дополнительных токсикологических данных (влияние на развивающийся организм, специфическая токсичность).

2.5. Исключения

Экспертная практика показывает, что уникальность и специфика конкретного ВВ делает возможным рассмотрение обоснованных доводов, позволяющих изменять или сокращать программу доклинических исследований. Например, ускоренная или сокращенная оценка безопасности может быть оправдана в отношении ВВ, в препаратах для применения по жизненным показаниям, которые нуждаются в быстром внедрении. Напротив, неполная оценка профиля безопасности ВВ не может быть адекватной для препаратов, используемых для лечения нетяжелых заболеваний. При этом отдельные исследования безопасности вспомогательных веществ могут быть завершены и после регистрации препарата. В большинстве случаев следует считать недопустимым использование ВВ, не имеющих полноценной токсикологической характеристики безопасности, для препаратов, которые применяются с целью профилактики, при беременности, у детей и для безрецептурных лекарств. С другой стороны, некоторые ВВ, такие как полимерные соединения, которые отличаются от ранее разрешенных ВВ только молекулярной массой (длиной цепи), могут быть изучены по сокращенной программе с меньшим, чем для нового вещества, объемом данных о безопасности при условии, что новое ВВ имеет значительное сходство с ранее изученным ВВ по физическим параметрам, фармакокинетике и содержанию неактивных мономеров и других примесей.

3. Рекомендуемая стратегия оценки безопасности нового вспомогательного вещества в лекарственных препаратах

Основные токсикологические исследования ВВ рекомендуется проводить в соответствии с принятыми стандартными протоколами и правилами GLP. Приведенные ниже рекомендации по доклинической оценке безопасности в основном относятся к ВВ, для которых отсутствуют адекватные сведения о применении у человека.

3.1. Фармакологическая безопасность

Для потенциальных новых ВВ рекомендуется полноценное изучение фармакологической активности с использованием батареи стандартных тестов оценки влияния на основные системы организма: ССС, дыхательную, ЦНС (см. также международное руководство ICH S7A). Эта оценка может быть выполнена в рамках токсикологических исследований или отдельного изучения фармакологической безопасности. Важно, чтобы эти данные были получены на ранних стадиях оценки безопасности фармакологического

191

вещества, поскольку, если будет обнаружено, что ВВ фармакологически активно, эта информация может оказать существенное влияние на перспективы дальнейшей разработки препарата.

3.2. Потенциальные ВВ, предлагаемые для кратковременного применения

Рекомендуемая программа оценки безопасности потенциальных ВВ, предназначенных для использования в препаратах, срок применения которых ограничен курсом 14 дней и менее или для эпизодического редкого применения, должны включать по меньшей мере следующие исследования:

1.Исследование острой токсичности, проведенные на грызунах и негрызунах при способе введения, рекомендуемом для клинического применения. Необходимо опреде-

лить ЛД50 ВВ. В некоторых случаях исследования острой токсичности могут быть исключены из программы доклинической оценки безопасности нового ВВ. Так, если при изучении хронической токсичности наивысшая доза является предельной (например, 2 г/кг или 2% в корме) и при этом наблюдаются незначительные токсические эффекты или их отсутствие, можно полагать, что острая токсичность вполне адекватно оценена.

Внекоторых случаях исследование с повышением доз также рассматривается как приемлемая альтернатива оценке острой токсичности (см. международное руководство ICH M3).

2.Рекомендуются доклинические фармакокинетические исследования ВВ (всасывания, распределения, метаболизма и выведения) при том же клиническом способе введения и на тех же видах животных, что и при доклинических исследованиях безопасности (см. также международные руководства ICH S3A и S3B).

3.Рекомендуется изучение ВВ в стандартной батарее тестов на генотоксичность (см. также международное руководство ICH S2B).

4.Рекомендуется изучение субхронической токсичности продолжительностью 1 месяц, выполненное как на грызунах, так и на негрызунах при способе введения, предлагаемом для клинического применения, с полным патоморфологическим исследованием (макро- и микроскопия). Также целесообразно провести токсикокинетические исследования.

5.Рекомендуемые исследования репродуктивной токсичности включающие оценку влияния: (1) на фертильность; (2) на эмбриофетальное развитие; (3) влияние на пренатальное и постнатальное развитие потомства, а также влияние на материнский организм (см. также международные руководства ICH S5A и S5B).

3.3. Потенциальные ВВ, предназначенные для непродолжительного применения

Для доклинической оценки безопасности потенциальных новых ВВ, предназначенных для использования в ЛП, применяемых от 2 недель до 3 месяцев (в том числе по сумме отдельных эпизодов и периодов лечения), рекомендуются следующие исследования:

1.Все исследования из разделов 3.1 и 3.2, за исключением 1-месячных токсикологических исследований. Примечание: имеющиеся данные о токсическом или выраженном биологическом действии в 1-месячном исследовании могут быть полезны для выбора доз для 3-месячного исследования.

2.Рекомендуется исследование субхронической токсичности в течение 3 месяцев как на грызунах, так и на млекопитающих негрызунах при соответствующем способе введения с полным патоморфологическим исследованием. Рекомендуется также провести токсикокинетические исследования.

3.Могут потребоваться и дополнительные исследования (например, исследования при парентеральном введении). Необходимость предоставления дополнительных данных обычно вытекает из результатов выполненных исследований.

192

3.4. Потенциальные ВВ, предназначенные для длительного применения

Рекомендуется следующая программа доклинического изучения безопасности новых ВВ, которые предназначены для использования в ЛП, применяемых длительно — более 3 месяцев (непрерывно или по сумме отдельных эпизодов и курсов лечения при хронических заболеваниях):

1.Рекомендуется исследование 6-месячной хронической токсичности на грызунах при соответствующем способе введения. Важно, чтобы эти исследования включали полную клиническую патологию, гистопатологию и токсикокинетический анализ. При изучении малотоксичных ВВ при основном способе введения необходимо использовать

вкачестве высшей дозы предельную дозу (2 г/кг и 2% от корма). Важно, чтобы хронические исследования были выполнены и на млекопитающих негрызунах при соответствующем способе введения. Если токсические и фармакологические эффекты отсутствуют

всубхронических экспериментах, может быть достаточен эксперимент продолжительностью 6 месяцев. Когда обнаружены токсические эффекты в исследованиях меньшей продолжительностью или у грызунов, рекомендуются хронические исследования на негрызунах от 9 до 12 месяцев.

2.Все исследования из раздела 3.1, 3.2 и 3.3 настоящих методических рекомендаций. Следует отметить, что 1- и 3-месячные токсикологические исследования но могут быть использованы для подбора доз в хроническом эксперименте.

3.Для оценки канцерогенного потенциала может быть применен один из следующих подходов (см. также международное руководство ICH S1A):

a.Двухлетнее исследование канцерогенности на 2-х видах животных при соответствующем пути введения.

b.Двухлетнее канцерогенное исследование на одном виде грызунов плюс альтернативные исследования (например, соответствующие исследования на новорожденных или трансгенных животных) на различных видах грызунов.

c.Предоставление документов, содержащих научное подтверждение нецелесообразности канцерогенных исследований. Например, отсутствие мутагенных свойства (см. также международное руководство ICH S2B), ограниченная системная экспозиция, отсутствие кумуляции по доклиническим и клиническим данным фармакокинетики, отрицательные гистопатологические данные в исследованиях хронической токсичности, выполненных с использованием максимальных допустимых доз, отсутствие пренеопластических повреждений и других токсических эффектов, сведения о безопасности аналогичных ВВ того же класса может быть приемлемым основанием нецелесообразности канцерогенных исследований. Решение, основанное на адекватности этого подхода, должно быть принято

вкаждом конкретном случае с использованием критериев доказательности. В других случаях адекватно выполненные исследования клеточной трансформации или 2-летнее исследование на крысах, или одно исследование на трансгенных животных (при отсутствии эффектов) могут быть достаточными для оценки канцерогенной безопасности.

3.5. Потенциальные ВВ для использования в ингаляционных, инъекционных или местно действующих препаратах

Рекомендуется следующая программа оценки безопасности новых ВВ, предназначенных для инъекционных, местных (накожных, интраназальных, интраоральных, офтальмологических, ректальных, вагинальных) или ингаляционных препаратов:

1.Все исследования из раздела 3.1, 3.2, 3.3 или 3.4 с использованием соответствующего способа введения. Также желательно изучить лекарственную форму препарата, предлагаемого для медицинского применения (если имеется информация о составе лекарственной формы к моменту начала этих исследований).

2.Исследование аллергизирующего и иммуннотоксического действия.

3.Для ВВ, предназначенных для применения в инъекционных лекарственных формах необходимо провести:

193

a.Исследования гемолитического действия in vitro в предлагаемых концентрациях для внутривенного введения (болюсного/инфузионного) для определения гемолитического потенциала ВВ.

b.Определение концентрации креатининкиназы в плазме для соответствующих концентраций ВВ в лекарственных формах для внутримышечного и подкожного введения, которое может быть использовано для оценки потенциального повреждении мышечной ткани.

c.Определение связывания с белками, влияющего на местную переносимость.

4.При изучении ВВ, предназначенных для местного применения, могут потребоваться токсикологические исследования как при рекомендуемом способе, так и при пероральном или парентеральном способе введения, если исследования клинической фармакокинетики проведены в условиях недостаточной экспозиции (или если системную экспозицию в клинике оценивали при другом способе введения).

5.Для местных дерматологических и офтальмологических препаратов целесообразно провести исследование с интраконъюнктивальным введением (оценку раздражения слизистой глаза).

3.6. Фотобезопасность

Рекомендуется проведение исследования фототоксического действия в соответствии с известными методическими руководствами. Исследованию подвергается ВВ или лекарственная форма, содержащая ВВ.

Заключение

Настоящие методические рекомендации предлагает гибкий методологический подход к оценке безопасности новых ВВ, учитывающий как способ применения ВВ в разрешенных препаратах, так и биологическую активность и физические свойства активного вещества. Анализ имеющихся сведений о безопасности ВВ позволяет оценить их достаточность, необходимость предоставления дополнительных данных или нецелесообразность проведения отдельных исследований.

Литература

1.Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. — 2-е изд., пер. и доп. / Под общ. ред. Р.У. Хабриева. — М.: Медицина, 2005.

2.Nonclinical Studies for the Safety Evaluation of Pharmaceutical Excipients, Guidance for Industry, (FDA) May 2005.

3.ICH Guidance: S1A, S2B, S5A,S5B, S7A, М3.

РАЗДЕ Л II

ДОКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

ГЛАВА 12

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИЗУЧЕНИЮ АНАЛЬГЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Составители: д. м. н., проф. Т.А. Воронина; к. б. н. Л.С. Гузеватых

Введение

Применяемые в настоящее время в лечебной практике болеутоляющие средства различаются по фармакологическим свойствам и механизму действия. В связи с этим для исследования новых анальгетиков в эксперименте и выбора эталонного препарата сравнения необходимы сведения о классификации болевых синдромов и особенностях действия препаратов, обладающих анальгетической активностью.

Международная ассоциация по изучению боли в зависимости от ведущего механизма, лежащего в основе их развития, разделила болевые синдромы на три основных группы: соматогенные (ноцицептивные), неврогенные и психогенные [29]. Соматогенные болевые синдромы возникают вследствие активации ноцицепторов при травме, воспалении, ишемии, растяжении тканей. Нейрогенная боль появляется при разрушении центральной (центральная боль) или периферической (нейропатическая боль) нервных систем. В случае неясной физиологической причины появления болевых симптомов боль называют психогенной. В зависимости от локализации повреждения соматогенная боль разделяется на соматическую поверхностную (повреждение кожных покровов), соматическую глубокую (при повреждении костно-мышечной системы) и висцеральную (при повреждении внутренних органов).

Физиологическая боль не является патологическим процессом до тех пор пока выполняет сигнальную функцию и запускает рефлекторные реакции, направленные на ограничение повреждения тканей. Однако после того как физиологическая функция исчерпывается, боль сама превращается в повреждающий фактор и становится патологической. Граница между физиологической и патологической болью достаточно условна и во многом определяется физическим и психическим состоянием организма.

Для соматогенных болевых синдромов характерно появление зон постоянной болезненности или повышения болевой чувствительности в месте повреждения. Первичная гиперальгезия развивается в области поврежденной ткани, а вторичная локализуется вне зоны повреждения. Патологической основой первичной гиперальгезии является сенситизация ноцицепторов (развитие нейрогенного воспаления, изменение фенотипа и повышение чувствительности ноцицепторов). Вторичная гиперальгезия возникает в результате включения механизмов центральной сенситизации ноцицептивных нейронов (феномен «взвинчивания»). Терапия соматогенной боли обеспечивает ограничение поступления ноцицептивной импульсации из зоны повреждения (местные анестетики, бензодиазепины) и вышележащих структур ЦНС (мидокалм), подавление синтеза и секреции альгогенов (нестероидные противовоспалительные средства), снижение чувствительности ноцицепторов (агонисты a2-адренорецепторов), активацию структур антиноцицепции (опиоиды, антидепрессанты), устранение локусов болезненного мышечного напряжения (миорелаксанты, бензодиазепины, ботулинический токсин типа А) [6].

При повреждении периферических или центральных структур, связанных с проведением ноцицептивного сигнала, возникают неврогенные болевые синдромы (невралгия, каузалгия, фантомный болевой синдром, таламические боли). При неполном или ча-

197

стичном повреждении периферических нервов, сплетений или дорзальных корешков наблюдается острая периодическая пароксизмальная боль, подобная удару электрического тока, длящаяся несколько секунд. При полном повреждении боли имеют постоянный характер. В области болезненности, как правило, обнаруживают изменение тактильной, температурной и болевой чувствительности в виде парестезии (ощущение покалывания, онемения, ползания мурашек), дизестезии (извращение восприятия, когда тактильные и тепловые стимулы ощущаются как болевые и холодовые), гиперпатии (усиленные, долго длящиеся болезненные ощущения после прекращения действия обычных стимулов), аллодинии (болезненное ощущение в ответ на легкое механическое раздражение кисточкой кожных участков), гипер- и гипестезии (повышение и понижение чувствительности к различным видам раздражения). В отличие от соматогенных болевых синдромов нейрогенные боли чаще отсрочены (например, у человека могут возникать через 2–3 года после повреждения нервных структур). Повреждение периферических нервов сопровождается патохимическими, патофизиологическими и патоморфологическими процессами, приводящими к формированию в нерве участков пейсмеккерной активности, растормаживанию нейронов, возникновению перекрестного возбуждения в нервных волокнах и в нейронах дорсальных ганглиев, изменению нейрохимического фенотипа ноцицепторов, разрастанию периферических нервов и появлению в них механочувствительности, усилению эфферентной симпатической активности. Терапия нейрогенных болевых синдромов основывается на применении трициклических антидепрессантов (активация антиноцицептивных систем, снижение пейсмеккерной активности), антиконвульсантов (блокаторы потенциал-зависимых Na+-каналов и возбуждающих аминокислот), анксиолитиков (препараты усиливающие ГАМК-ергическое торможение) и местных анестетиков (блокаторы Na+-каналов). Опиоидные анальгетики при этом типе болей не эффективны [3].

Применяемые в настоящее время болеутоляющие средства можно разделить на следующие группы [7].

А. Вещества преимущественно центрального действия. I. Опиоидные (наркотические) анальгетики:

1.Агонисты опиоидных рецепторов (морфин, промедол, фентанил).

2.Агонисты-антагонисты и частичные агонисты опиоидных рецепторов (бупренорфин, бутофанол, налбуфин, пентазоцин).

II. Неопиоидные средства центрального действия с анальгетической активностью:

1.a2 — адреномиметики (клофелин).

2.Блокаторы Na+-каналов клеточных мембран (карбамазепин).

3.Ингибиторы обратного нейронального захвата моноаминов: серотонина и норадреналина (венлафаксин, милнаципран, дулоксетин).

4.Антагонисты рецепторов возбуждающих аминокислот (кетамин, мемантин).

5.Закись азота.

6.Блокаторы гистаминовых Н1-рецепторов, проникающие через ГЭБ (димедрол).

7.ГАМКв-миметики (баклофен).

8.Блокаторы Са2+-каналов (L-типа: верапамил, нимодипин; N-типа: зиконотид).

9.Габапентин.

10.Ингибиторы циклооксигеназы преимущественно в ЦНС — ненаркотические анальгетики производные парааминофенола (парацетамол).

III. Анальгетики смешанного механизма действия (опиоидный и неопиоидный компонеты) — трамадол.

Б. Вещества преимущественно периферического действия. Ингибиторы циклооксигеназы (ЦОГ) в периферических тканях, а также в ЦНС (нестероидные противовоспалительные средства — НПВС):

1.Вещества неизбирательного действия (ингибиторы ЦОГ-1 и ЦОГ-2) (ацетилсалициловая кислота, ибупрофен, анальгин, кеторолак).

2.Вещества, ингибирующие преимущественно ЦОГ-2 (мелоксикам).

198

3.Вещества, избирательно ингибирующие ЦОГ-2 (целекоксиб, рофекоксиб, нимесулид, этодолак).

Современные стратегии поиска новых потенциальных анальгетиков связывают с изменением чувствительности ноцицепторов (воздействие на семейство каналов переменного рецепторного потенциала (TRP) и другие каналы ноиццепторов), нормализацией состояния ноцицепторов, нарушенного при воспалении (блокада активности медиаторов и модуляторов, изменяющих порог активности ноцицепторов), снижением патологической возбудимости нейронов, участвующих в проведении ноцицептивного сигнала (блокаторы тетродотоксиннечувствительных Na+-каналов, блокаторы Ca2+-каналов). Новые соединения с анальгетической активностью могут быть найдены среди ингибиторов ЦОГ-3, блокаторов протон-

чувствительных каналов ASIC3, каналов пуриновых рецепторов P2X2 и P2X3, блокаторов рецепторов брадикинина, кальцитонин-ген-родственного пептида (КГРП), каннабиноидов.

При проведении экспериментов по изучению боли с использованием лабораторных животных следует соблюдать требования Европейской конвенции по защите экспериментальных животных (86/609 EEC).

1.Исследования должны проводиться на животных, находящихся в хорошем физиологическом состоянии (отсутствие болезней и стресса).

2.Исследователь должен рассматривать животное не как объект, а как живое существо, одаренное ощущениями.

3.В экспериментах, целью которых является попытка моделирования у животных хронических болевых синдромов, протоколы исследований следует сводить к минимуму или избегать боли.

4.Протоколы исследований по изучению острой боли на сознательных животных должны утверждаться Этической комиссией, определяющей потенциальную выгоду этих экспериментов.

5.Насколько это возможно, ученый должен проверить интенсивность болевых раздражений на себе, и это должно применяться в отношении большинства неинвазивных раздражителей.

6.Хирургическое вмешательство не должно проводиться с использованием обездвиживающих препаратов при отсутствии общего наркоза и с сохранением сенсорных ощущений.

7.Длительность экспериментов должна быть насколько возможно короткой и число животных, используемых в эксперименте, должно быть минимальным.

Методы оценки анальгетического действия

1. Методы оценки соматогенной боли

Большинство методов оценки соматогенной болевой чувствительности является моделью физиологической боли. В связи с этим необходимы сведения о механизмах восприятия ноцицептивного стимула.

Рецепторы боли (ноцицепторы) представляют собой инкапсулированные нервные окончания Аd- и С-афферентов, широко распространенные в коже, подкожной ткани, надкостнице, суставах, мышцах и внутренних органах. Ноцицепторы могут быть активированы сильным механическим (укол, щипок, удар) или термическим (нагревание, охлаждение), или химическим (действие альгогенов — брадикинин, гистамин, вещество Р, простагландины и др.) стимулами. Возбудимость ноцицепторов зависит от биохимического состава окружающих тканей.

На поверхности ноцицепторов экспрессируются множество каналов и рецепторов. В настоящее время на мембране ноцицепторов идентифицированы рецепторы брадикинина (В1 и В2), серотонина (5НТ1D, 5НТ2А, 5НТ3 и 5НТ4), простагландинов (ЕР), АТФ (Р2Х), ваниллоидные рецепторы (VR-1), орфановые рецепторы (ORL-1), рецепторы фактора роста нервов (TrkA), рецепторы, активированные протеазами (PAR) (на висцеральных ноцицепторах кишечника), протон-чувствительные катионные каналы (ASIC),

199

тетродотоксин-нечувствительные натриевые каналы (SNS, PN-3, NAN), калиевые (Kvх) и кальциевые (L- и N-типа) каналы, семейство TRP-каналов.

TRP-каналы играют важную роль в восприятии стимулов ноцицепторами. TRPV2 рецепторы открываются при повреждающем воздействии высокой температуры (более 53 °С). Активация TRPV1 каналов температурой более 43 °С или химическими веществами, такими как капсаицин красного жгучего перца, протоны водорода и другие медиаторы воспаления, приводит к термической гиперальгезии и аллодинии. TRPV3 участвуют в болевой и неболевой тепловой чувствительности, открываясь при температуре 23–29 °С

ипри действии камфоры. TRPV4 помимо температурной чувствительности (24–34 °С), реагируют на механическое давление и запускают осмотическую и механическую гиперальгезию. TRPM8 каналы чувствительны к холоду (8–28 °С), изменению потенциала

иментолу. Активация TRPA1 каналов холодом или химическими веществами (брадикинин, формалин, масло горчицы, вассаби, хрен, аллицин лука и чеснока, акреолин слезоточивого газа, метиловый эфир салициловой кислоты зеленого масла, циннамалдегид корицы, D9-тетрагидроканнабинол марихуаны) вызывает воспаление, сопровождающееся термический и механической гиперальгезией [32]. В мышцах при ишемии возникают

болевые ощущения при активации ASIC3 каналов молочной кислотой [30]. Обнаружено несколько типов ноцицепторов. Аd-механорецепторы (высокопорого-

вые) возбуждаются только сильными механическими стимулами с небольших рецептивных полей и не реагируют на высокотемпературные раздражения и действие альгогенов. В патологических условиях (например при воспалении) такие рецепторы становятся чувствительными к температурным воздействиям. Аd-механотерморецепторы имеют небольшие рецептивные поля, реагируют на интенсивный механический стимул и медленное нагревание кожи (более 45 °С). С-полимодальные ноцицепторы чувствительны к механическим, термическим и химическим стимулам. При повреждении и воспалении тканей или в условиях повторного температурного раздражения С-полимодальные ноцицепторы сенситизируются, т.е. становятся чувствительными к более слабым стимулам. Холодовые ноцицепторы Аd- и С-афферентов активируются с широких рецептивных полей низкотемпературными и высокоинтенсивными механическими раздражениями. Кроме того, существует семейство С-волокон, которые не активны в нормальном состоянии, и отвечают на термические и механические стимулы только при воспалении [42].

1.1.Методы оценки термической соматической боли

Внастоящее время существует несколько методов оценки термической боли. Эти методы отличаются как по характеру воздействия, так и по типу ответной реакции.

1.1.1. Тест отдергивания хвоста от теплового излучения (tail-flick)

Тест отдергивания хвоста от теплового излучения является упрощенной версией метода, применяемого на добровольцах [42]. Метод основан на спинальном флексорном рефлексе в ответ на прогрессивно увеличивающееся воздействие теплового излучения на кожную поверхность. В этом тесте последовательно активируются терморецепторы, С-волокна полимодальных ноцицепторов, Аd-волокна полимодальных ноцицепторов, полимодальные ноцицепторы, высокопороговые механорецепторы.

Исследования проводят на мышах и крысах. Болевое раздражение наносят на хвост локально, воздействуя постепенно увеличивающимся тепловым излучением (например, с помощью анальгезиметра Tail flick analgesia meter, Columbus Instruments, USA или TSE-system, Germany). Регистрируют латентный период реакции отдергивания хвоста (время избавления от болевого раздражителя). Как правило, величина латентного периода реакции составляет от 2 до 10 с (чаще всего от 2 до 4 с). Удлинение времени реакции интерпретируется как обезболивающее действие. Во избежание повреждения тканей не следует нагревать хвост более 10–20 с. Критерием анальгетического эффекта считают достоверное увеличение латентного периода реакции после введения вещества.

200