- •Кратко обо всем!!!
- •Общая хар-ка метода кондуктометрия.
- •Электроды, применяемые в эх методах.
- •1) Металлические или 1 рода
- •2) Ионоселективные электроды (3 рода)-всегда индикаторные.
- •Электроды 2 рода. Электроды сравнения.
- •Прямая потенциометрия.
- •3. Биохим. Методы основаны на использовании процессов, основанных на использовании процессов происходящих с участием биологических компонентов (ферментов, антител, живых клеток)
- •2. Это метод изучения состава ве-ва путём исследования зависимости силы тока от е, подаваемый на рабочий электрод.
- •3. Масс-спектрометрия – основана на способности газообразных ионов разделяться в магнитном поле в зависимости от соотношения массы иона от заряда иона.
- •1. Принцип анализа по методу аэс заключается в измерении 2 параметров спектральных линий: длины волн и интенсивности излучения.
- •Кратко обо всем!!!
- •1) Металлические или 1 рода
- •2) Ионоселективные электроды (3 рода)-всегда индикаторные.
- •3. Биохим. Методы основаны на использовании процессов, основанных на использовании процессов происходящих с участием биологических компонентов (ферментов, антител, живых клеток)
- •2. Это метод изучения состава ве-ва путём исследования зависимости силы тока от е, подаваемый на рабочий электрод.
- •3. Масс-спектрометрия – основана на способности газообразных ионов разделяться в магнитном поле в зависимости от соотношения массы иона от заряда иона.
Электроды 2 рода. Электроды сравнения.
Электрод сравнения должен поддерживать постоянный, не зависящий от состава ра-ра Е.
Требования к электродам сравнения: *воспроизводилось; *низкое электрическое сопротивление; *отсутствие влияние на состав ра-ра;*способность не вызывать появл. значительного диффузионного Е; *простота конструкции.
Электроды 2 рода-состоят из Ме, этот Ме покрыт слоем малорастворимого соед. с тем же катионом и погружённого в ра-р хорошо растворимого соед. с тем же анионом.
Устройство хлорид-серебряного и коломедного электродов:
Прямая потенциометрия.
Обычно выполняется с ионоселективным (ионосеребрянным) и носит название ионометрия. В основе-ур. Нернста, а именно-электродная фу-ция.
Расчётные методы: *метод градировочного графика (часто вносят индифферентный электролит с одинаковой конц. для поддержания постоянной ионной силы) *метод градуировки электролита (когда определяем рН на стеклянном электроде) *метод добавок *метод концентрационного элемента (алгоритм: берут 2 одинаковых индикаторных электрода, один из электродов помещают в анализируемый ра-р и готовят серию стандартных ра-ров с известной конц., а второй электрод по стандартной серии с помощью иономера определяют разность Е между двумя одинаковыми индикаторными электродами, т.е. в ур. Нернста меняется только конц.).
Если конц. одного из ра-ров совпадает с конц. анализируемого ра-ра, то иономер показывает Е=0В.
Потенциометрическое титрование основано на измерении т. эквивалентности по результатам потенциометрических измерений.
Вблизи т. эквивалентности происходит резкое изменение Е индикаторного электрода. Обычно определяют т.эквивалентности по дифференциальной кривой, построенной ! от Vтитранта.
Потенциометрическое титрвоание.
В основу потенциометрического титрования могут быть положены все 4 метода:
Общая хар-ка метода потенциометрия.
Достоинства: *высокая точность (в методе титрования 0,1-0,5%; в прямом методе-2%) *высокая чувствительность (нижн. граница определяемых содержаний до 0,1%масс) *возможность определения нескольких ве-в без одной пробы без предварительного разделения *определение в мутных и окрашенных средах *титрование в неводных средах *доступность аппаратурного оформления *высокая экспресность *можно делать неразрушающий контроль *возможность автоматизации.
Недостаток: большое время отклика-когда электроды не свежие.
3. Биохим. Методы основаны на использовании процессов, основанных на использовании процессов происходящих с участием биологических компонентов (ферментов, антител, живых клеток)
Аналитический сигнал – скорость начального процесса котороая определяется СФ, люминесценцией, потенцио-/амперометрией. Ферментативные методы анализа основаны на реакциях, катализируемых ферментами (биол. катализаторами). Они отличаются высокой чувствительностью и селективностью (каталитич. и некаталитич. методы). Ферментативная система относится к катализируемой гомогнного типа, а клетки – гетерогенного.
Ферментативными методами можно определять субстраты, активаторы, обратимые и необратимые ингибиторы ферментов. Еще их применяют при анализе разнообразных объектов - медицинских (биологич. жижкостей, крови, тканей); пищевых продуктов; фармацевтических препаратов; для непрерывного контроля микробиологических и биохимических процессов в производстве. Эти методы используют для определения токсичных органических и неорганических соединений в объектах окр. среды (сточ. и природ. воды, почва, листья растений).
Св-ва ферментов: высокая каталитич. активность, высокая избирательность в отношении субстрата, стабильность (воспроизводимость из серии опытов), долговремен. стабильность – время, за которое отклик биосенсора падает на 50%; субстратная специфичность – избирательность действия фермента в отношении структуры субстрата, типа реакции и условий её проведения. Определяется способностью фермента превращать только данный тип субстратов в определенных реакциях и условиях. Механизм действия макромолекул белка - происходит сорбция субстрата на ферменте и образование ими активного комплекса в результате гидрофобных, полярных и ионных взаимодействий; в этом комплексе происходит сближение и ориентация реагирующих групп фермента и субстрата.
Иммобилизация – перевод в водонерастворимое состояние путем связывания с носителем или модифицирование водорастворимыми полимерами с полным или частичным сохранением ферментами каталитической активности.
Методы иммобилизации: адсорбция (высокая чувствительность – для клеточных и биомасс); химическое связывание путем иммобилизации в органическую или неорганическую матрицу; метод инкабсулирования (в органич. или неорганич. матрицы), характеризуется высокой чувствительностью (т.к. нет химич. связей), высокой долговременной стабильностью. Повышение стабильности фермента вследствие иммобилизации облегчает хранение, транспортировку, применение в экспериментальных условиях, возможность многократного использования мобилизации ферментов.
Иммобилизованные ферменты используют в промышленности (синтез аминокислот, производство сахарных сиропов, молочки), в охране окр. среды (очистка сточных вод), произ-во лекарств (синтез антибиотиков).
Уравнение Михаэлиса-Ментена – E + S = ES = Е + Р !
[Е] – равновесная конц. фермента в процессе
[S] – субстрат
[ES]-промежуточный компонент фермента с субстратом или же комплекс Михаэля
[P]-продукт
К1-конст. образования комплекса
К-1-конст. разрушения скорости
К2-конст. скорости получения продукта ре-ции из комплекса
Uре-ции описывается ур. Михаэлис-Ментеном: u =
[Km] – константа Михаэлиса
[S0] - начальная конц. субстрата
Km = [K1] – константа образования комплекса
[К2] – константа разрушения комплекса
В качестве верхней границы принимается конц. =Кm.
Разработано больше число ВЧ и селективных ферментативных методов определения S, S могут явл. как оргн., так и не орган. ве-ва (спирты, сахара; токсичные катионы-чаще всего определяют).
Используются:
1) при анализе разнообразных объектов (например, медицина-биологические жидкости, кровь, ткани живых организмов); 2)для анализа пищевых продуктов, фарм. препаратов; 3)для непревычного контроля микробиологических и биохим. процессов производства; 4)можно использовать для анализа токсичных орагн./неорган. соед. в объектах окруж. среды (например, в сточных водах, почвах,истьях растений).
5, 11, 17, 23, 29, 35
1. Нефело- и турбиди- метрия
Методы основаны на измерении интенсивности соответственно рассеянного под углом 90˚ ЭМ излучения (нефелометрия) или прошедшего под углом 180˚ (турбидиметрия) ЭМ излучения через систему, содерж. Взвешенные частицы определяемого ве-ва-это могут быть эмульсии, суспензии, взвеси.
Интенсивность падающего светового потока (I0) складывается из интенсивности поглощенного (In), I-интенсивности прошедшего светового потока через кювету, Iр-интенсивности рассеянного излучения:
!
Метод нефелометрии: в основу положен закон Релея, он работает для коллоидных частиц, которые менее 0,1λ.
Рабочая длина волны-490 нм-синяя линия спектра (синий светофильтр). Для проведения анализа необходимо, чтобы частицы были монодисперсными (т.е. одинакового размера) и размер-менее 10 нм.
В строго регламентированных условиях в основу положено ур. Релея: !
Метод турбидиметрии: в основу положен закон, аналогичный Б-Л-Б.
Для проведения используют: ФЭК.
Общая хар-ка методов: 1) эти методы используют для анализа ве-в, образующих труднорастворимые соед. при взаимод. с реагентом, методы используют, когда отсутствуют цветные ре-ции; 2) круг определяемых ве-в: сульфат-ион, хлорид-ион, ионы ртути (ӀӀ), ионы серебра.
Требования к суспензиям: *суспензии должны быть устойчивы во времени; *условия должны быть ды таким образом, что с изменением конц. определяемого ве-ва/иона должно изменяться кол-во частиц. Это достигается строгой регламентацией всех параметров анализа.
Достоинства методов: высокая чувствительность метода.
Недостаток: высокая погрешность, до 10%, связано с недостаточной воспроизводимостью химико-аналитических св-в суспензий.