Лабораторная работа № 6 «выделение чистой культуры, определение культуральных свойств и идентификация бактерии» (2-ой день)

Цель занятия.

Ознакомление студентов с выделеннием чистых культур аэробных и анаэробных бактерий. Показать отличие культуральных свойств бактерий в лабораторных условиях.

Педагогические задачи:

• объяснить рост чистых культур аэробных и анаэробных бактерий в плотной и жидкой питательных средах и их культуральные свойства;

• объяснить и показать значения различных сред для выделения чистых культур (Клигер, Рессел, МПА), изучение культуральных свойств бактерий и пересевов в скошенные питательные среды.

Результаты занятия

Студент должен знать:

• этапы выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий;

• культуральные свойства аэробных и анаэробных бактерий;

• методы выделения (Клигер, Рессель, МПА) чистых культур, изучение культуральных свойств бактерий, выросших в питательных средах.

Студент должен уметь делать:

• определение аэробных и анаэробных бактерий в плотных и жидких средах;

• посев выращанных колоний для выделения чистых культур бактерий в скошенные питательные среды (Клигер, Рессель, МПА).

• Лабораторная работа.

• 1. Изучение культуральных свойств выращенных в плотных средах микроорганизмов.

• 2. Приготовление мазка из выросших колоний, окрашивание по методу Грама и посев в скошенный МПА или среду Клигера.

• Цель: Выделить культуру бактерий и изучение их рост в жидкой и плотной питательных средах. Посев колонии в скошенный мясо-пептонный агар для выделения чистой культуры.

• Необходимые принадлежности: Микроскоп, биоматериал в чашках Петри (по 2) - из дыхательных путей, гной, кал, МП скошенный агар, трехсахарная среда (по 4), спиртовка (по 6), термостат (один), этиловый спирт 70- 96⁰, набор для окрашивания по Граму (4 та), физиологический раствор, чистая вода в колбах.

• Таблица 1

• Шаги выполнения:

  №	Выполняемая работа	Не выполнил (балл)	Выполнил полностью и точно (балл)
  1	Выбор посевов для изучения культуральных свойств выросших из воздуха колоний, посеянных методом седиментации	0	5
  2	Выбор чашек с посевами для изучения культуральных свойств колоний, выросших из фекалий, посеянных на Эндо	0	5
  3	Выбор чашек с посевами для изучения культуральных свойств колоний, выросших из гноя, посеянных на ЖСА.	0	5
  4	Выбор подозрительной колонии и изучение её структуры под малым увеличением микроскопа (х40)	0	10
  5	Изучение и описание размера, консистенции, формы, пигмента выбранной колонии	0	10
  6	Изучение и описание поверхности, краев выбранной колонии (R и S-колонии)	0	10
  7	С целью изучения морфологических, тинкториальных свойств из части колонии готовят мазок и микроскопируют. Зарисовать в тетрадь	0	10
  8	Для выделения чистой культуры грамположительных бактерий делается высев оставшейся половины на скошенный МПА. Для этого пробирку со средой держат в левой руке, а мизинцем правой открывают тампон над спиртовкой, стерильной петлей берут колонию и штрихом засевают на поверхность скошенного агара.	0	20
  9	Для выделения чистой культуры грамотрицательных бактерий делается высев оставшейся половины на скошенный трехсахарный агар. Для этого пробирку со средой держат в левой руке, а мизинцем правой открывают тампон над спиртовкой, стерильной петлей берут колонию и штрихом засевают на поверхность скошенного агара, но в отличие от предыдущего метода делается прокол столбика агара до дна пробирки.	0	20
  10	Посевы помещаются в термостат	0	5
  Итого		0	100

• Примечание: Полученные результаты записывается в таблицу в течение 2 дней и обсуждаются результаты выделенных чистых культур бактерий.

• Таблица 2

• Заполняется протокол в форме таблицы по изучению культуральных, морфологических и тинкториальных свойств выделенных на плотной среде микроорганизмов.

Патологичес кий материал и питательная среда	Номер колонии	Окраска по Граму	Размер	Форма	Цвет	Поверхность	Консистенция	Состав	Края	Тип колонии (S , R, M,)	Выделенная культура
Посев вохдуха методом седиментации на МПА
Посев гноя в ЖСА
Посев кала в среде Эндо