Лабораторная работа № 8 «определение чувствительности бактерий к антибиотикам»
Цель работы.
Повышение эффективности лечения инфекционных заболеваний.
Педагогические задачи:
показать значение использования антибиотиков в медицинской практике и определение к ним чувствительности возбудителей.
объяснить значение и механизмы появления резистентных бактерий к антибиотикам.
Результаты занятия
Студент должен знать:
методы получения и использования антибиотиков и их значение в медицинской практике;
механизмы действия антибиотиков на микроорганизмы;
понять значение и механизмы появления резистентных бактерии к антибиотикам;
оценивать механизмы, значения и современные методы определения чувствительности к антибиотикам.
Студент должен уметь:
определять чувствительность бактерии к антибиотикам;
выполнить интерпретацию результатов антибиотикорезистентности
Лабораторная работа.
Определение чувствительности бактерии к антибиотикам по методу Hexa Discs (6 отдельных дисков прикрепленные к центральному пластику) предложенная компанией Хай Медиа.
Цель: Рациональный выбор для профилактики и повышения эффективности лечения инфекционных заболеваний.
Необходимое оборудование: чашка Петри с питательной средой, исследуемая чистая культура микробов, набор Hexa Discs, этиловый сприт 70 -960, иммерсионное масло, предметные стекла, фильтровальные бумаги, спиртовка, набор для окрашивания по методу Грам, пинцет, линейка (РW-297), штатив, лоток, чистая вода в колбе, физиологический раствор, микроскоп.
Шаги выполнения:
№ |
Выполняемая работа |
Фотографии техники выполнения
|
Выполнил полностью и точно (балл) |
1. 1 |
Готовится 1-1,5 млярд/мл суспензия чистой культуры микроба и сеют в чашечки Петри с МПА по методу “газон”. Посев микроба в чашечке Петри оставляется на 10 минут |
|
20 |
2 |
Стерилизуют пинцет над пламенем спиртовки. Открывают набор Hexa Discs (или набор дисков) и вынимается диск в виде ромашки с антибиотиком (с разными концентрациями одного антибиотика или разными антибиотиками) и закрывают его крышку
|
|
10 |
3 |
Одной рукой открывают чашку Петри с посевом |
|
10 |
4 |
Второй рукой пинцетом Hexa Discs накладывают на поверхность агара с культурой микроба.
|
|
10 |
5 |
Диск удерживается пинцетом, чтобы он хорошо поместился на поверхности и закрывается крышка Петри. Пинцет обеззараживается над спиртовкой.
|
|
10 |
6 |
Чашку Петри оставляют на 18-24 ч при температуре 370С в термостате
|
|
10
|
7 |
Взять чашку Петри из термостата, рассмотреть и поставить ее на стол. Сверху ставится линейка (РW-297), чтобы определить зону задержки роста в результате действия антибиотика. |
|
10 |
8 |
Измеряется каждая зона вокруг дисков и записывают результаты. Так получают данные об эффективности каждого антибиотика. Записать протокол работы в тетрадь. |
|
20 |
Итого |
|
100 |
|
Примечание: Возможные ошибки во время лабораторных работ и их исправления.
при определении чувствительности бактерий к антибиотикам используется стандартные диски с антибиотиками. Для этого всегда нужно контролировать срок антибиотиков в лаборатории.
в 1 мл приготовленной суспензии для второго исследования количество микробов не должно превышть 1 миллиарда .
исследуемая культура должна быть чистой. Для определения чистоты культуры приготовливают из нее мазок и окрашивают по методу Грама и смотрят под микроскопом. Если культура чистая, то в ней будут видны грамположительные или грамотрицательные микробы одной морфологии. Если культура нечистая, то в ней встречаются смешанные микробы и это приводит к ошибычным результатам.