30. Микробиота урогенитального тракта человека

Микробиотаэто своеобразный «орган», высокоорганизованная система, реагирующая качественными и количественными сдвигам на динамическое состояние организма человека в различных условиях жизнедеятельности, здоровья и болезни.

Виды микробиоты

●Облигатная=постоянная=резидентная=индигенная=аутохтонная

Т.е. микробиота, которая постоянно встречается и присутствует в различных биотопах тела человека

●Факультативная=случайная=транзиторная=аллохтонная Зависит от поступления из окр.среды и состояния иммунной системы Функции нормобиоты

●Ферментопродуцирующая

●Синтетическая

●Защитная

●Иммунногенная

На урогенитальный тракт приходится 9-10% от всего количества микробиоты тела человека

Особенности микробиоты УГТ

●Микробиота скудная

●Почки,мочеточники, мочевой пузырь, маткастерильны

●Соотношение анаэробы:аэробы=10:1

●В репродуктивный период увеличивается количество грамположительных бактерий

●В период менопаузы увеличивается количество грамотрицательных бактерий

●В уретре обоих полов: стафилококки, непатогенные нейссерии, дифтероиды, сапрофитные трепонемы, стрептококки, фузобактерии, пептококки, пептострептококки

Внаружной части уретры как у мужчин, так и у женщин, находятся в небольшом количестве в основном те же микроорганизмы, которые обнаруживаются на коже и в промежности, они представлены: коринебактериями, микобактериями, грамотрицательными бактериями фекального происхождения, неспорообразующими анаэробами (пептококки, пептострептококки, бактероиды).

Эти микроорганизмы обычно выявляются в нормальной моче в количестве 102-104 в 1 мл.

Микробиота мужских половых органов

На наружных половых органах мужчин и женщин локализуются микобактерии смегмы (Mycobacterium smegmatis), морфологически сходные с микобактериями туберкулеза. Они обнаруживаются в секрете сальных желез, находящихся на головке полового члена у мужчин и малых половых губ у женщин. Кроме того, здесь встречаются стафилококки, микоплазмы и сапрофитные трепонемы, морфологически сходные с возбудителем сифилиса. Необходимо отметить, что качественный и особенно количественный состав микрофлоры наружных отделов мочеполовой системы у разных людей варьирует в достаточно широких пределах. Для наружных половых органов мужчин характерна добавочная микрофлора:стафилококки,

коринебактерии, микоплазмы, энтеробактерии, из анаэробов - бактероиды, фузобактерии, анаэробные кокки.

В настоящее время установлено, что нормальный бактериальный пейзаж уретры взрослого человека (мужчины) составляют: стафилококки, дифтероиды, диплококки и палочки, анаэробы (пептококки, бактероиды, энтеробактерии, клостридии), дифтероиды.

Основная масса аэробных бактерий обитает в области ладьевидной ямки. Бактериальное обсеменение уменьшается по мере продвижения вглубь мочеиспускательного канала. Задняя уретра, как и предстательная железа, обычно в норме стерильна.

Микрофлора женских половых органов

Маточные трубы, яичники полость матки в норме стерильны, поскольку цервикальная слизь содержит лизоцим и обладает антибактериальной активностью. Тем не менее, в цервикальном канале могут быть обнаружены различные микроорганизмы, количество которых меньше, чем во влагалище.

Половые пути женщины представлены совокупностью микроучастков нескольких гистотипов. Это участки: плоского вагинального эпителия, цилиндрического эпителия шейки матки, уникальная область цервикальных желез. Они характеризуются определенными биохимическими и физиологическими особенностями. Поэтому каждому из них присуща своя, несколько отличная от других популяций микроорганизмов. Микробами заселены лишь нижние отделы мочеполового тракта (наружные половые органы, влагалище, цервикальный канал).

Видовой состав микрофлоры женских половых органов, как и других эпитопов, относительно стабилен. Определенные различия обусловлены: возрастом, беременностью, фазой менструального цикла.

Микрофлора влагалища находится в прямой зависимости от возраста и гормонального статуса женского организма. Она начинает формироваться через 12-14 ч после рождения ребенка - во влагалищном содержимом появляются молочнокислые бактерии - аэробные лактобациллы (палочка Дедерлейна), полученные от матери при родах, которые обитают здесь до тех пор, пока реакция среды остается кислой или слабощелочной (несколько недель). Когда она становится нейтральной (pH среды равна 7,6), что сохраняется до полового созревания, в микробиоценоз влагалища включается и развивается смешанная флора (анаэробы, энтерококки, стрептококки, стафилококки, коринебактерии).

С наступлением половой зрелости под влиянием эстрогенов вагинальный эпителий увеличивается и в нем сильно возрастает уровень гликогена. Гликоген - идеальный субстрат для лактобактерий, в связи с этим происходят изменения микробиоценоза влагалища, которые характеризуются преобладанием лактобацилл. В результате образования лактобациллами кислоты из углеводов, в том числе из гликогена, происходит понижение pH влагалищного секрета до 4,0 - 4,2 - 4,5. На протяжении всего детородного периода лактобациллы обеспечивают поддержание кислой реакции среды на этом уровне. Это важный механизм в предупреждении колонизации влагалища другими, потенциально патогенными микроорганизмами.

Степени чистоты влагалища здоровых женщин.

У здоровых женщин детородного возраста общее количество микроорганизмов в вагинальном отделяемом составляет 6-8*104 КОЕ/мл. В зависимости от состава микрофлоры различают несколько степеней чистоты влагалища здоровых женщин:

●1-я степень: реакция среды кислая, большое количество палочек Дедерлейна (лакобациллы), других видов микроорганизмов почти нет;

●2-я степень: реакция среды слабокислая, палочек Дедерлейна мало, в микробиоценозе появляется кокковая флора - стрептококки, стафилококки, обнаруживаются единичные лейкоциты;

●3-я степень: реакция среды нейтральная или слабощелочная, единичные палочки Дедерлейна, кокки превалируют, лейкоцитов - до 40 в поле зрения;

●4-я степень: реакция щелочная, палочек Дедерлейна нет вообще, большое количество кокков, могут быть другие виды микроорганизмов - энтеробактерии, бактероиды, лейкоциты в огромном количестве.

3-я и 4-я степени чистоты влагалища женщины свидетельствуют о наличии воспалительного процесса урогенитального тракта.

После наступления менопаузы снижается продукция эстрогенов, pH поднимается до 6,0, вагинальный эпителий становится тоньше - количество лактобацилл вновь уменьшается, появляется смешанная микрофлора. В состав нормальной влагалищной микрофлоры в этот период обычно входят: клостридии, анаэробные стрептококки (пептострептококки), стафилококки, аэробные гемолитические стрептококки группы В, колиформные бактерии, дифтероиды, иногда листерии.

Необходимо также помнить, что микроорганизмы, присутствующие во влагалищном содержимом в момент родов (например, гемолитические стрептококки группы В, гонококки, спирохеты - возбудители сифилиса, вирус гепатита В), могут инфицировать ребенка.

В результате приема противобактериальных препаратов или в период беременности у некоторых женщин в силу индивидуальных особенностей, количество молочнокислых бактерий в составе влагалищной микрофлоры уменьшается и увеличивается количество других бактерий и, что особенно важно, дрожжевых грибов рода Candida. Это приводит к развитию воспалительной реакции и заболеванию кандидозом, широко известному под названием "молочница".

31. Моноклональные антитела. Получение. Использование

Моноклональные антитела – АТ, синтезируемые искусственно полученным клоном плазмоцитов.

При введении в организм животных и человека чужеродных макромолекулярных веществ — белков или полисахаридов (антигенов) в крови появляются защитные белки — антитела, для которых характерна уникальная специфичность. Каждое антитело узнает только свой антиген, точнее, один его эпитоп. Эпитоп состоит из нескольких остатков аминокислот или сахаров, образующих пространственную структуру, характерную для данного белка.Один антиген может содержать много эпитопов, поэтому к одному белку образуется целое семейство различных по своей специфичности антител.

Таким образом, при введении антигена возникает большое семейство антител, направленных к разным его детерминантам и различающихся также внутри группы антител, направленных к одной и той же детерминанте.

Синтез такого разнообразия обеспечивается множеством семейств клонов лимфоцитов, каждое из которых занимается синтезом собственного конкретного АТ. Дело понятное, нужно вырастить отдельные клоны антителообразующих клеток in vitro в культуре тканей, и они будут продуцировать моноклональные антитела, однако не все так просто.

Метод получения моноклональных антител (разработан в 1975 г. Г. Келлером и К. Мильштейном) состоит в слиянии сенсибилизированных лимфоцитов с клетками миеломы для получения клеточных гибридов (гибридом). Гибридомы обладают способностью синтезировать антитела и, в то же время, они представляют собой опухолевые клетки, способные к непрерывной пролиферации.

Этапы получения гибридом:

1)получение миеломной линии, где миелома – злокачественная опухоль плазматических клеток;

2)получение селезеночных клеток от иммунизированного организма (плазмоциты, синтезирующие Ig определенной специфичности);

3)создание условий для слияния клеток;

4)выделение слившихся клеток;

5)отбор интересующего клона, его накопление (in vitro или в организме животного) и использование.

Использование моноклональных антител:

·В научных целях для анализа структуры, генетики Ig.

·Для изучения рецепторов лимфоцитов и их субпопуляций.

·В диагностике многих инфекционных и неинфекционных заболеваний.

·В лабораторных исследованиях

·В лечении некоторых, в т. ч. онкогенных, заболеваний: ведутся активные исследования по использованию моноклональных антител в качестве специфических переносчиков токсических веществ в опухолевые клетки.

32.Морфология микроорганизмов. Морфологические группы бактерий

Морфологические признаки – форма, размеры и взаиморасположение микробных клеток, изучаемых микроскопическим методом исследования.

Морфология м/о изучает их внешний вид, форму и особенности строения, способность к движению, спорообразованию, способы размножения.

Морфологические признаки играют большую роль в распознавании и классификации микроорганизмов. Для научно обоснованной классификации одних каких-либо признаков бывает недостаточно. Поэтому используют комплекс признаков:

-морфологические (форма клеток, размеры, подвижность, размножение, спорообразование, окраска по Граму);

- культуральные (характер роста на жидких и плотных питательных средах);

-физиолого-биохимические (характер накапливаемых продуктов);

-генотипические (физико-химические свойства ДНК).

Морфология бактерий – раздел бактериологии, который изучает форму и взаиморасположение клеток, их структуры, строение бактериальной клетки и ее отношение к красителям.

Для изучения морфологии бактерий применяют специальные оптические приборы – микроскопы. ОДНАКО прижизненная световая микроскопия не позволяет детально оценить форму бактерий и их тинкториальные свойства (окраску). !Для этого применяют световую микроскопию с иммерсионной системой для окрашенных фиксированных мазков.

· Шаровидные (кокковые) бактерии

–если кокки после деления группируются в одной плоскости, то они могу располагаться попарно и называться диплококками (менингококки, гонококки) (часто пневмокко – крупоз. пневмония. На сахарном бульоне пневмококк жает морфологию стрептококков)

–сгруппировавшись последовательно в одной плоскости, кокки соединяются в виде цепочки – стрептококки

–если образуются их скопления в виде «гроздья винограда» – стафилококки

–в результате группировки четырех кокков в 2х взаимно перпендикулярных плоскостях, обр. тетракокки; при группировке кокков в 3х взаимно перпендикулярных плоскостях возникают пакетообразные кокки (в виде кубика) – сарцинии

* у мелких бактерий различия м/д длиной и шириной могут быть незначительными, поэтому по внешнему виду они напоминают кокки. ТАКИЕ ФОРМЫ называются коккобактериями (например, возбуд. бруцеллеза)

·Палочковидные (цилиндрические) бактерии

–концы палочек могут быть ровными, закругленными, срезанными под прямым углом (возбуд. сибирской язвы), заостренными (у фузобактерий), утолщенными на полюсах (возбуд. дифтерии)

–палочковидные бактерии, образующие споры, принадлежат к двум родам – бациллы и клостридии. У клостридий, в отличие от бацилл, диаметр споры превышает диаметр поперечного сечения бактерий. В результате клетки со спорами приобретают форму веретена, барабанной палочки (возбудитель столбняка), ракетки (возбудитель ботулизма)

–нитевидные формы, сохраняют морфологию ветвящихся и переплетающихся стрептобактерий (актиномицеты и лептотрихии – обитатели полости рта)

·Извитые (спиралевидные) формы

–вибрионы (запятая) (холерный вибрион) – имеют два жгутика на одном/двух полюсах клетки

–спириллы – имеют 2-4 витка и жгутики на обоих полюсах клетки (амфитрихии)

а) кампилобактерии

б) хеликобактерии

– спирохеты – имеют 5-12 завитков (возбудитель сифилиса). Движение за счет фибриллярных нитей (периплазматические) из сокр. белка – аналог флагеллина

а) боррелии