26. Иммунодиагностические реакции с использованием меченых антигенов или антител: иммуноферментный анализ (ифа).

Иммуноферментный анализ, или метод (ИФА) - выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазной и или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики сальмонеллеза, микоплазмозов и др.

Твердофазный ИФА - вариант теста, когда один из компонентов иммунной -реакции (антиген или антитело ) сорбирован на твердом носителе.Компоненты выявляют добавлением меченых антител или антигенов. При положительном результате изменяется цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют не связавшиеся реагенты путем промывания.  I. При определении антител в лунки планшеток с сорбированным антигеном последовательно добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную ферментом  и субстрат/хромоген для фермента.  II. При определении антигена в лунки с сорбированными антителами вносят антиген, добавляют диагностическую сыворотку против него и вторичные антитела (против диагностической сыворотки), меченные ферментом, а затем субстрат/хромоген для фермента.

27. Иммуноблотинг как метод серодиагностики инфекционных заболеваний. Выбор метода и принципиальная схема его постановки.

Иммуноблотинг - (от англ. ―blot‖ – пятно) – метод идентификации антигенов (или антител) с помощью известных сывороток (или антигенов). Представляет собой сочетание гель-электрофореза с ИФА.

Первоначально бактериальные клетки или вирионы разрушают при помощи ультразвука, а затем методом электрофореза разделяют все антигены вируса или бактериальных клеток и получают коммерческий реагент на специальной нитроцеллюлозной плёнке. При постановке иммуноблоттинга на плёнку с известными антигенами наносится исследуемая сыворотка пациента. После инкубации и отмывания несвязавшихся антител, приступают к ИФА – на плёнку наносят антисыворотку к иммуноглобулинам человека, меченную ферментом, и хромогенный субстрат, изменяющий окраску при взаимодействии с ферментом. При наличии комплексов антиген-антитело-антисыворотка к иммуноглобулину-фермент на носителе появляются окрашенные пятна. Метод иммуноблоттинга позволяет отдельно обнаружить антитела на различные антигены возбудителя (например, при ВИЧ-инфекции иммуноблоттинг выявляет антитела на gp120, gp24 и другие антигены вируса).

Частная

№1 Стафилококки, их свойства. Классификация. Заболевания, вызываемые стафилококками, лабораторная диагностика. Биопрепараты, применяемые для лечения, специфической профилактики и диагностики стафилококковых инфекций. Определение бактерионосительства.

Свойства:

Морфологические свойства:

Кокки в виде гроздьев винограда, грамположительны, неподвижны, аспорогенны, микрокапсула, возможна L-трансформация. В состав клеточной стенки S.aureus входит белок А.

Культуральные свойства:

факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых средах. На плотных средах образуют гладкие, выпуклые колонии с различным пигментом, не име­ющим таксономического значения. Могут расти на агаре с высоким содержанием NaCl. Обладают сахаролитическими и протеолитическими ферментами. Стафилококки могут вырабатывать гемолизины, фибринолизин, фосфатазу, лактамазу, бактериоцины, энтеротоксины, коагулазу.

Антигенная структура очень сложная. В наличии более 50 типов антигенов, среди которых выделяют родовые, видовые, типоспецифические.

Факторы патогенности:

►Адгезивные факторы: микрокапсула, тейхоевые кислоты, белок А

►ЭКЗОТОКСИНЫ:

1. Эксфолиатины А и В вызывают синдром «ошпаренной кожи» за счёт дерматонекротического действия;

2. TSST-суперантиген (→ синдром токсического шока);

3. Мембраноповреждающие токсины:

Лейкоцидины (цитотоксическое действие на гранулоциты) - только для S.aureus

Гемолизины (α, β, γ, δ типа) вызывают гемолиз не только эритроцитов, но и осмотический лизис тромбоцитов, гранулоцитов, моноцитов, эпителиоцитов, макрофагов.

4. Энтеротоксины A-Е (также суперантигены) – термостабильные белки, которые ответственны за развитие интоксикаций. Как правило, это молочные продукты, консервы с маслом.

►ФЕРМЕНТЫ:

1. Каталаза (защищает от кислород-зависимых бактерицидных механизмов фагоцитов).

2. β-лактамаза (разрушает антибиотики и кодируется плазмидами).

3. Липаза, протеаза, фосфатаза, нейраминидаза, гиалуронидаза разрушают соответствующие ткани и способствуют распространению возбудителя в организме (инвазия)

4. Плазмокоагулаза повышает свёртываемость крови

5. Лецитиназа (разрушает лецитин клеточных мембран лейкоцитов и вызывает лейкопению).

6. Фибринолизин или стафилокиназа (растворяет фибриновые сгустки, ограничивающие местный воспалительный процесс, что способствует генерализации процесса).

Заболевания:

S.aureus

• Кожные гнойничковые инфекции

• Раневые инфекции

• Бактреримия

• Эндокардиты

• Пневмонии

• Артриты

• Остеомиелы

• Перитониты

• Инфекции выделительной системы

• Синдром ошпаренной кожи

• Синдром токсического шока

• Пищевые токсикоинфекции

S.epidermidis

• Эндокардиты

• Глазные инфекции

• Суставные инфекции

• Инфекции мочевыводящих путей

S.saprophyticus

• Циститы

• Пиелонефриты

• Эндокардиты

Лабораторная диагностика:

Материал для исследования – гной, кровь, мокрота, моча, отделяемое ран, испражнения, рвотные массы, пищевые продукты.При специальных исследованиях – смывы с инструментов, материалы медицинского назначения, воздух в операционных.

1.   Микроскопический метод (по Граму);

2.   Бактериологический метод.

ЖСА (МЖСА) - элективные солевые среды – проявляются пигменты, выявляется лецитиназа в том, что вокруг колоний образуются зоны помутнения с радужным блеском.

Кровяной агар - S.aureus вызывает  полный гемолиз (благодаря продукции гемолизинов).

МПБ (также солевой или сахарный бульон как среды обогащения) – диффузное помутнение среды

3. Серологический метод (определяют уровень антитоксических антител с помощью РП в геле; антимикробные антитела – ИФА).

Биопрепараты для лечения и профилактики:

Лечение и профилактика. Антибиотики широкого спектра действия (пенициллины, устойчивые к в-лактамазе)

Стафилококковый анатоксин: получают из нативного анатоксина путем осаждения трихлоруксусной кислотой и адсорбцией на гидрате оксида алюминия.

Стафилококковая вакцина: взвесь коагулазоположительных стафилококков, инактивированных нагреванием. Применяют для лечения длительно текущих заболеваний.

Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый: гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови, содержит стафилококковый анатоксин. Готовят из человеч. крови, с высоким содержанием антител. Применяется для специфического лечения.

Единственным доказательством бакте­рионосительства является выделение от носителя культур S. typhi, S. paratyphi А, S. paratyphi В. Материалом для исследования являются дуоденальное содержимое, испражнения и моча. В качестве вспомогательных методов, которые позволяют сузить круг обследуемых лиц, используют серологические реакции (одновременное обнаружение О-, Н-, Vi- или О-, Vi-антител говорит о возможном присутствии возбудителя в организме) и аллергическую кожную пробу с Vi-тифином.

Последний содержит Vi-антиген, который при взаимодействии с Vi-антителами дает местную аллергическую реакцию в виде покраснения и припухлости в течение 20—30 мин. Положительная реакция с Vi-тифином свидетельствует о наличии в организме Vi-антител и о возможном присутствии S. typhi.

Для идентификации L-форм S. typhi предложены специальные иммунофлуоресцирующие антитела (к антигенам L-форм возбудителя).

Оригинальный метод выявления бактерионосителей был предложен В. Муром. Он заключается в исследовании тампонов, одновременно забрасываемых в канализационные люки на всем протяжении канализационной сети населенного пункта.

№2 Стрептококки. Классификация. Свойства. Заболевания. Лабораторная диагностика. Этиологическая роль стрептококков при ревматизме и скарлатине. Иммунитет.

Виды:

Streptococcus pyogenes (прежнее название Streptococcus haemolyticus) — бета-гемолитические стрептококки группы А.

Streptococcus pneumoniae — объединяют в группу пневмококковых инфекций.

Streptococcus faecalis, Streptococcus faecies — стрептококк группы D, которые обычно объединяются в группу энтерококков, вызывают септические процессы;

Streptococcus sanguis, Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans — гемолитические и негемолитические стрептококки различных серогрупп.

Таксономия. Стрептококки относятся к отделу Firmicutes, роду Streptococcus.

Морфологические и культуральные свойства.

Стрептококки — это мелкие шаровидные клетки, располагающиеся цепочками, грамположительные, спор не образуют, неподвижные. Большинство штаммов образует капсулу, состоящую из гиалуроновой кисло­ты. Клеточная стенка содержит белки (М-, Т- и R-антигены), углеводы (группоспецифические) и пептидогликаны. Легко переходят в L-формы.

Возбудители растут на средах, обогащен­ных углеводами, кровью, сывороткой, асцитической жидкостью. На плотных средах обычно образуют мелкие серые колонии. Капсульные штаммы стрептококков группы А образуют слизи­стые колонии. На жидких средах стрептококки обычно дают придонный рост.

Стрептококки — факультативные анаэробы. По характеру роста на кровяном агаре они делятся на культуральные варианты: а-гемолитические (зеленящие), в-гемолитические (полный гемолиз) и негемолитические.

Резистентность.

Чувствительны к физи­ческим и химическим факторам окружающей среды, могут длительно сохранять жизнеспособ­ность при низких температурах. Устойчивость к антибиотикам приобретается медленно.

Патогенность.

►Структурные адгезивные факторы: микрокапсула, липотейхоевые кислоты, белок М.

► Фимбриальный белок М – основной фактор вирулентности и типоспецифический антиген. Основная его функция – подавление фагоцитоза, также проявляет свойства суперантигена, также перекрёстно реагирует с кардиомиоцитами, что приводит к развитию аутоиммунных реакций. Антитела к М-белку обладают протективными свойствами.

►Капсула также защищает от фагоцитоза.

►ЭКЗОТОКСИНЫ:

1. Лейкоцидины (цитотоксическое действие на гранулоциты);

2. К гемолизинам серогруппы А (S.pyogenes) относятся стрептолизины. Различают О-стрептолизин (термолабильный, чувствительный к кислороду белок, проявляет цитотоксическое, гемолитическое, кардиотоксическое и пирогенное действие, иммуногенен),и S-стрептолизин - термостабильный, резистентный к О₂,  вызывает поверхностный гемолиз на средах, не иммуногенен.

3. Скарлатинозный эритрогенный токсин Дика, выделяется от больных скарлатиной. Вызывает поражения зёва, мелких кровеносных сосудов (токсин сыпи), поражения ЦНС, эндокринной и сердечно-сосудистой систем. Также обладает пирогенным, иммуносупрессивным и аллергизирующим действием.

4. Кардиогепатический токсин – поражения миокарда и образование гранулем в печени.

5. Стрептококковый пирогенный токсин (вызывают токсический шок).

►ФЕРМЕНТЫ:

• Липаза, протеаза, гиалуронидаза разрушают соответствующие ткани и способствуют распространению возбудителя (инвазия);

• Стрептокиназа (или фибринолизин) растворяет фибрин в тромбах, что способствует генерализации процесса (только S.pyogenes).

• ДНК-аза (стрептодорназа) – рассасывание гнойных экссудатов.

Иммунитет: постинфекционный нестойкий, ненапряженный.

Заболевания:

• Фарингиты

• Раневые инфекции, поражения кожи и мягких тканей

• Послеродовые инфекции

• Неонатальный сепсис

• бактериемия

• Эндокардиты

• Менингиты

• Артриты

• Инфекции мочеполовой системы

• Пневмонии

• Ревматизм

• острый гломерулонефрит

• Абсцессы легких, печени, поражения г. мозга.

Микробиологическая диагностика.

Материал для исследования – гной, моча, кровь, мокрота.

Бактериоскопический метод: окраска по Граму мазков из патологического ма­териала. При положительном результате обнаруживают цепочки грам «+» кокков.

Бактериологический метод: Исследуемый материал за­севают на кровяной агар в чашку Петри. После инкубации при 37 °С в течение 24 ч отмечают характер колоний и наличие вокруг них зон гемолиза. Из части материала, взятого из коло­ний, готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для получения чистой культуры 1—3 подозрительные колонии пересевают в пробирки со скошенным кровяным агаром и сахарным бульоном. На кровяном агаре Streptococcus pyogenes образует мелкие мутноватые круглые колонии. В бульоне стрептококк дает придонно-пристеночный рост в виде хлопьев, оставляя среду прозрачной. По характеру гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на три группы: 1) негемолитические; 2) а-гемолитиче-ские 3) β-гемолитические, образующие вокруг колонии пол­ностью прозрачную зону гемолиза. Заключительным этапом бактериологического исследования является идентификация выделенной культуры по антигенным свойствам. По данному признаку все стрептококки делят на серологические группы (А, В, С, D и т. д.). Серогруппу определяют в реакции преципитации с полисахаридным преципитиногеном С. Серовар определяют в реакции агглютинации. Выявленную культуру стрептококка проверяют на чувствительность к антибиотикам методом дисков.

Серодиагностика: устанавливают наличие специфических антигенов в крови больного с помощью РСК или реакции преципитации. Антитела к О-стрептолизину определяют для подтверждения диагноза ревматизма.

Лечение: Антибиотики широкого спектра действия (пенициллины, устойчивые к в-лактамазе).При выделении стрептококка А – пенициллин. Химиотерапия антибиотиками, к которым выявлена чувствительность микроба – левомицетин, рифампицин.

Профилактика: Неспецифическая - выявление, лечение больных; проведение планового обследования медперсонала, вакцинация стрептококковый бактериофаг(жидкий) – фильтрат фаголизата стрептококка.

О-стрептолизин сухой (лиофильно высушенный фильтрат бульонной культуры стрептококка – активного продуцента О-стрептолизина. Применяется для постановки серологических реакций – определения анти-О-стрептолизина в сыворотке крови больных).

Скарлатина- острое экзантемное заболевание.

Причина: действие стрептококового токсина.

Появление кожных точечных высыпаний или мелких пятен интенсивно красного цвета. Сначала они появляются на шее и верхней части грудной клетки, а затем по всему телу. Клиническая особенность- малиновый язык.

Скарлатина – острое экзантемное антропонозное заболевание, обусловленное действием эритрогенина S. pyogenes (токсина Дика) и характеризующееся появлением на кожных точечных высыпаний интенсивно красного цвета, появляющихся сначала на шее и верхней части грудной клетки, а затем принимающих генерализованную форму, ангиной, лимфаденитом, эритемой языка (малиновый язык). Чаще болею дети в возрасте 1-8 лет.

Ревматизм вызывает В-гемолитический стрептококк группы А.

К специфическим заболеваниям, вызываемым только стрептококками относят: ревматизм,

рожистое заболевание кожи, скарлатину, гломерулонефрит.

Ревматизм – инфекционно-аллергическое заболевание, характеризующееся поражением соединительной ткани с преимущественной локализацией процесса в сердечно-сосудистой системе и частым вовлечении в патологический процесс суставов.

Патогенез ревматизма:

* аутоиммунные процессы, связанных с наличием у стрептококков перекрестно-реагирующих антигенов;

* гиперчувствительности иммунокомплесного типа;

* персистенции L-форм стрептококка.

Ревматизму предшествуют фарингиты или тонзиллиты, которые приводят к первичной сенсибилизации организма (образованию аутоантител и отложению иммунных комплексов, которые повреждают соединительную ткань) с последующим формированием ревматического полиартрита, поражением мышечной ткани и сердечных клапанов.

Специфическая профилактика и лечение.

Специфическая профилактика стафилококковых инфекций предусматривает иммунизацию стафилококковым анатоксином больных в послеоперационном периоде. Для специфического лечения применяются донорский антистафилококковый иммуноглобулин, стафилококковый бактериофаг для обкалывания ран, лечебные стафилококковые вакцины (например, антифагин) при хронических формах.

Специфическая профилактика и лечение стрептококковых заболеваний не разработаны.

Специфическая профилактика пневмококковой инфекции в РФ не проводится, хотя имеется поливалентная вакцина, включающая 23 различных полисахаридных антигена. Специфическое лечение не разработано.

Специфическая профилактика менингококковой инфекции проводится по эпидемиологическим показаниям химической вакциной, приготовленной из полисахаридных антигенов. Специфическое лечение не разработано.

Средства специфической профилактики гонореи отсутствуют, что обусловлено высокой антигенной изменчивостью гонококков. Для предупреждения бленнореи новорожденным сразу после рождения закапывают в конъюктивальный мешок (девочкам также в половую щель) 1-2 капли раствора сульфацила натрия или антибиотика (пенициллины, цефалоспарины). Для лечения хронических или осложненных форм гонореи используют гоновакцину.

Основу лечения вышеперечисленных заболеваний составляет рациональная терапия антибиотиками.

№3 Менингококки: классификация, основные свойства, патогенез, лабораторная диагностика, иммунитет, лечебные препараты(В ПРОШЛОМ ВОПРОСЕ ИЛИ ДОП МАТЕРИАЛ), профилактика

Менингококковая инфекция — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением слизистой оболочки носоглот­ки, оболочек головного мозга и септицемией.

Таксономия: возбудитель Neisseria meningitidis (менингококк) относится к отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.

Морфологические свойства. Мелкие диплококки. Характерно расположение в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Не­подвижны, спор не образуют, грамотрицательные, имеют пили, капсула непостоянна.

Культуральные свойства. Относятся к аэробам, культивируются на средах, содержащих нормальную сыворотку или дефибринированную кровь лошади, растут на искусственных питательных средах, содержащих спе­циальный набор аминокислот. Элективная среда должна содер­жать ристомицин. Повышенная концентрация СО₂ в атмосфере стимулирует рост менингококков.

Антигенная структура: Имеет несколько АГ: родовые, общие для рода нейссерии (белковые и полисахаридные, которые представлены по­лимерами аминосахаров и сиаловых кислот); видовой (протеиновый); группоспецифические (гликопротеидный комплекс); типоспецифические (белки наружной мембраны), которые разграничивают серотипы внутри серогрупп В и С. По капсульным АГ выделяют девять серогрупп (А, В, С, D, X, Y, Z, W₁₃₅ и Е).

Биохимическая активность: низкая. Разлагает мальтозу и глк. До кислоты, не образует индол и сероводород. Ферментация глк. и мальтозы – диф.-диагностический признак. Не образует крахмалоподобный полисахарид из сахарозы. Обладает цитохромоксидазой и каталазой.

Факторы патогенности:

1. капсула – защищает от фагоцитоза. AT, образующиеся к полисахаридам капсулы, проявляют бак­терицидные свойства.

2. Токсические проявле­ния менингококковой инфекции обусловле­ны высокотоксичным эндотоксином. Для генерализованных форм менин­гококковой инфекции характерны кожные высыпания, выраженное пирогенное действие, образование AT.

3. Пили, белки наружной мембраны, наличие гиалуронидазы и нейроминидазы. Пили явля­ются фактором адгезии к слизистой оболоч­ке носоглотки и тканях мозговой оболочки.

Резистентность. Малоустойчив во внешней среде, чувствителен к высушиванию и охлаждению. В течение нескольких минут погибает при повышении температуры более 50 °С и ниже 22 °С. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и сульфамидам, к 1 % раствору фенола, 0,2 % раствору хлорной извести, 1 % раствору хлора­мина.

Эпидемиология, патогенез и клиника. Чело­век — единственный природный хозяин менингококков. Носоглотка служит входными воротами инфекции, здесь возбудитель может дли­тельно существовать, не вызывая воспаления (носительство). Механизм передачи инфекции от больного или носителя воз­душно-капельный.

Инкубационный период составляет 1—10 дней (чаще 2—3 дня). Различают локализованные (назофарингит) и генерализованные (менингит, менингоэнцефалит) формы менингококковой инфекции. Из носоглотки бактерии попадают в кровяное русло (менингококкемия) и вызывают поражение мозговых и слизи­стых оболочек с развитием лихорадки, геморрагической сыпи, воспаления мозговых оболочек.

Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерали­зованных формах болезни стойкий, напряженный.

Микробиологическая диагностика: Материал для исследо­вания - кровь, спинномозговая жидкость, носогло­точные смывы.

Бактериоскопический метод – окраска мазков из ликвора и крови по Граму для определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и их количества. Наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити фибрина, менингококки – грам «-», окружены капсулой.

Бактериологический метод – выделение чистой культуры. Носоглоточная слизь, кровь, ликвор. Посев на плотные, полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь. Культуры инкубируют в течение 20 ч. При 37С с повышенным содержанием СО₂.Оксидазаположительные колонии – принадлежат в данному виду. Наличие N.meningitidis подтверждают образованием уксусной кислоты при ферментации глк. и мальтозы. Принадлежность к серогруппам – в реакции агглютинации (РА).

Серологический метод – используют для обнаружения растворимых бактериальных АГ в ликворе, или АТ в сыворотке крови. Для обнаружения АГ применяют ИФА,РИА. У больных, перенесших менингококк – в сыворотке специфические АТ: бактерицидные, аггютинины, гемаггютинины.

Лечение. В качестве этиотропной терапии используют ан­тибиотики - бензилпенициллин (пенициллины, левомицетин, рифампицин), сульфамиды.

Профилактика. Специфическую профилактику проводят менингококковой химической полисахаридной вакциной серогруппы А и дивакциной серогрупп А и С по эпидемическим показаниям. Неспецифическая профилактика сводится к соблюдению санитарно-противоэпидемического режима в дошкольных, школь­ных учреждениях и местах постоянного скопления людей.

№4. Гонококки, их свойства. Лабораторная диагностика гонореи, бленнореи. Профилактика. Лечебные препараты.

Нейсcерии – грамотрицательные аэробные кокки, относящиеся к роду Neisseria, включающему 8 видов: Neisseria meningitides, Niesseria gonorrhoeae, N. flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca.

Морфология: неподвижные неспорогенные грамотрицательные диплококки, образующие капсулу, полиморфны – встречаются в виде мелких или крупных форм а так же в виде полочек, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зелёным и т. д.), под действием пенициллина образуют L-формы, могут менять свойства и превратиться в грамположительную форму.

Культуральные свойства: аэробы, хемоорганотрофы; для роста требуют свежеприготовленные влажные среды с добавлением нативных белков крови, сыворотки или асцитической жидкости . Не вызывают гемолиза на средах, содержащих кровь; на средах с добавлением молока, желатина и картофеля не растут. На плотных питательных средах через 24ч, при содержании протеина II образуют слегка мутные бесцветные колонии, не содержащие его образуют круглые прозрачные колонии в виде капель росы, на жидких питательных средах растут диффузно и образуют плёнку, через несколько часов оседающую на дно.

Биохимическая активность: крайне низкая – разлагают только глюкозу, продуцируют каталазу и цитохромоксидазу.

Антигенная структура: Содержит А и К антигены, ЛПС обладают сильной иммуногенностью, основную антигенную нагрузку несут пили и белки мембраны. Наружная мембрана содержит протеины I, II, III классов, проявляющих сильные иммуногеннные свойства

Факторы патогенности: капсула, пили, эндотоксин, белки мембраны

Капсула обладает антифагоцитарным действием. Пили обеспечивают адгезию к эпителию. Клеточная стенка содержит эндотоксин.

Резистентность: очень неустойчивы в окружающей среде, чувствительны к действию антисептиков, высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклину, стрептомицину. Способны к утилизации пенициллинов при приобретении бета-лактамаз.

Патогенез: Входные ворота – цилиндрический эпителий мочеполовых путей. Гонококки прикрепляются к эпителию посредством поверхностных белков, вызывают гибель и слущивание клеток, захватываются клетками, где размножаются, попадают на БМ, после чего попадают на соед. ткань и вызывают воспаление или попадают в кровь с возможным дессиминированием.

Иммунитет – почти отсутствует.

Микробиологическая диагностика:

Бактериоскопическое исследование: Материалом для исследования служит гнойное отделяемое из уретры, влагалища, примой кишки, глотки, сыворотки крови. Готовят мазки, окраска по Граму, При «+» результате – обнаруживают гонококки – грам+ диплококки бобовидной формы., находятся внутри лейкоцитов. Положительный диагноз ставится при острой форме гонореи до применения антибиотиков.

Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри со специальными питательными средами — КДС, сывороточным агаром. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением в определенной концентрации казеина, дрож­жевого экстракта и сыворотки крови. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24—72 ч. Гонококки образуют круглые прозрач­ные колонии, напоминающие капли росы, в отличие от более мутных колоний стрептококков или пигментированных колоний стафилококков, которые также могут расти на этих средах. Подо­зрительные колонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах «пестрого» ряда (по­лужидкий агар с сывороткой и углеводом). Гонококк ферментирует только глюкозу с образованием ки­слоты.

Серодиагностика. В некоторых случаях ставят РСК Борде — Жангу. В качестве антигена используют взвесь убитых гонокок­ков. Реакция Борде—Жангу имеет вспомогательное значение при диагностике гонореи. Она положительна при хронической и осложненной гонорее.

Лечение: антибиотикотерапия (пенициллин, тетрациклин, канамицин), иммунотерапия - Гонококковая вакцина - взвесь гонококков, убитых нагреванием, используется для вакцинотерапии хронической гонореи.