35. Вирус бешенства, механизм заражения человека, патогенез болезни,лабораторная диагностика. Антирабический гамма-глобулин, антирабическая вакцина, их назначение.

РНК-содержащий вирус, семейство Rhabdoviride

Вирион имеет форму пули. Рибонуклеопротеид состоит из геномной однонитевой линейной минус-РНК и бел­ков: N-белка, L-белка и NS-белка. Различают два вируса бешенства: дикий вирус( животные), фиксированный – не патогенный для человека.

Культивирование. Путем внутримозгового заражения лабораторных животных и в культуре клеток. Образуются включения-тела Бабеша-Негри. Резистентность: неустой­чив.

Источниками инфекции являются волки, грызуны. Вирус выделяется со слюной. Животное заразно в последние дни инкубационного периода. Механизм передачи возбудителя — контактный при уку­сах.

После инкубационного перио­да - возбуждение, обильное слюнотечение, рвота. Через 1—3 дня наступают паралич и смерть .

Патогенез и клиника. поврежденные наружные покровы- аксоны периферических нервов- головного и спинного мозга. Клетки претерпевают изменения, затем он попадает в различные ткани, в том числе в слюнные железы. Инкубационный период у человека— от 10 дней до 3 месяцев. Микробиологическая диагностика: об­наружение телец Бабеша—Негри в мазках-отпечатках( по Романовскому—Гимзе) , выделение вируса из подчелюстных слюнных желез. Вирусные антигены -в РИФ.

Биопробы на мышах. Идентификацию вирусов проводят с помо­щью ИФА, а также в РН на мышах.

Прижизненная диагностика основана на ис­следовании: отпечатков роговицы, биоптатов кожи с помощью РИФ. Возможно определение ан­тител у больных с помощью РСК, ИФА.

Лечение. Симптоматическое; эффективное лечение отсутствует.

Профилактика. Выявление, уничтожение жи­вотных. Проводят иммунизируют . Специфическую профилактику проводят антирабической вакциной и антирабической сывороткой или иммуноглобулином.

Активная профилактика- вакцинация( инактивированная культуральная вакцина( на почках сирийских хомячков)-внутримышечно

Активно-пассивная –вакцина+ иммуноглобулин(антирабический)- для увеличения инкубационного периода.

36. Понятие об арбовирусных и робовирусных инфекций. Основные возбудители. Вирус клещевого энцефалита. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.

арбовирусы (от англ. arthropod-borne viruses — вирусы, рожденные или передаваемые грызунами), так как они передаются кровососущими членистоногими насекомыми, которые не только их переносчики, но и основной резервуар и хозяева в природных очагах.

Реовирусы (семейство Reoviridae) — семейство безоболочечных вирусов, содержащих двунитевую фрагментированную РНК; включает респираторные и кишечные вирусы, а также некоторые арбовирусы.

Род Orbivirus получил свое название из-за кольцевидной формы капсомеров вирионов (от лат. orbis — кольцо). Он включает возбудителей арбовирусной инфекции: вирус Кемерово (переносится клещами, вызывает кемеровскую лихорадку) и вирус синего языка овец (переносится мокрецами). Род Coltivirus включает вирус колорадской клещевой лихорадки, вызывающий арбовирусную инфекцию (переносится клещами). В род Seadornavirus входит вирус Банна, впервые выделенный в 1967 г. в КНР от людей с неврологическими симптомами, переносится комарами (арбовирусная инфекция). Род Rotavirus содержит вирусы, вызывающие распространенные диареи.

Структура. Вирионы реовирусов имеют сферическую форму (диаметр 80 нм), трехслойный капсид икосаэдрического типа; оболочки нет (рис. 16.3). Геном представлен двунитевой фрагментированной (10–12 сегментов) линейной РНК. Вирион содержит фермент транскриптазу (РНК-зависимую РНК-полимеразу). Внутренний капсид, геномная РНК и система транскрипции составляют сердцевину вириона. У ротавирусов внутренний капсид включает белок VP-2. Наружный капсид реовирусов состоит из белков, отходящих от промежуточного капсида и выступающих в виде шипов. Ротавирусы и ортореовирусы активизируются протеолизом (инфекционные субвирусные частицы) с увеличением их инвазионной способности.

Микробиологическая диагностика. Диагностика арбовирусных инфекций, вызываемых отдельными представителями реовирусов, проводится с помощью вирусологического и серологического методов: заражают культуру клеток или мышей-сосунков (интрацеребрально); посредством РСК, РНГА, РН выявляют антитела в парных сыворотках крови больного. Диагностику ротавирусной инфекции см. ниже.

Вирус Зика (ZIKV) относится к семейству Flaviviridae, роду Flavivirus, подроду mosquito-

borne virus (вирусы, передаваемые комарами), вирусам группы Спондвени (Spondweni virus

группа). Семейство Flaviviridae включает в свой состав три рода: флавивируcы (Flavivirus), пеcтивируcы (Pestivirus), гепацивируcы (Hepacivirus).

По своим морфологическим характеристикам вирус Зика является типичным предста-

вителем семейства, объединяющего в своем составе 58 различных видов РНК-содержащих

вирусов. Вирион вируса Зика имеет диаметр порядка 50 нм и окружен липидной мембраной.

Геном вируса Зика структурно и функционально схож с другими геномами флавивиру-

сов. Он представлен однокомпонентной линейной одноцепочечной смысловой молекулой РНК.

По литературным данным, вирус Зика был обнаружен в 17 видах комаров (они являются переносчиками)

ZIKV обнаруживается в более

широком круге видов млекопитающих: орангутангах, зебрах, слонах, буйволах, грызунах(возможно они носители)

Путь передачи: трансмиссивный и вертикальный

Патогенез

Механизм развития данного инфекционного заболевания до конца не изучен. Считается, что первыми в месте укуса поражаются дендритные клетка. Далее вирус с током крови разносится в различные органы и ткани. В инфицированных клетках организма человека происходит репликация РНК. Во время выхода новых вирионных частиц из клетки развивается цитолиз пораженных структур. При изучении микропрепаратов обнаружены морфологические изменения в скелетной мускулатуре, миокарде (набухание волокон, некроз, пролиферация ядер, исчезновение поперечной исчерченности). В экспериментах на лабораторных животных доказана высокая тропность вируса к клеткам нервной системы. В случае внутриутробного инфицирования патоген поражает ворсины хориона, сосуды плаценты. Возникает стойкая ишемия плода. Кроме того, вирус Зика воздействует на митотическую активность клеток, что в свою очередь ведет к формированию пороков развития.

Симптомы лихорадки Зика

В четырех из пяти случаев инфекция протекает бессимптомно. Инкубационный период составляет от 3 дней до 2 недель. Человек становится заразным за несколько дней до появления первых симптомов. Характерно наличие субфебрильной лихорадки, которая держится до 5 дней. Отмечается слабость, вялость, сонливость, чувство недомогания. Типично наличие миалгий, артралгий, боли в глазных яблоках, светобоязни. Нередко развивается конъюнктивит, отек мелких суставов.

С первого дня заболевания появляется мелкая зудящая пятнисто-папулезная сыпь на лице, туловище с последующим возможным распространением по всему телу. Элементы могут увеличиваться в размере, сливаться. Иногда формируются волдыри с прозрачным содержимым. Очень редко возникают диспепсические явления в виде тошноты, рвоты, диареи, чувства тяжести, болей в эпигастрии. Длительность заболевания составляет около 7 дней.

У беременных женщин и детей, инфицированных не трансплацентарным путем, заболевание протекает с типичной клинической симптоматикой. Считается, что после перенесенной инфекции, формируется стойкий иммунитет, повторное заражение маловероятно.

Диагностика

Во время объективного осмотра специфических симптомов не выявляется. Отмечается наличие сыпи, конъюнктивита, возможно ‒ отеков мелких суставов. Данное заболевание протекает чаще всего в легкой форме, поэтому инфицированные за медицинской помощью обращаются редко. При подозрении на лихорадку Зика необходима консультация инфекциониста. В диагностике используются следующие клинико-лабораторные методы:

• Обнаружение вируса. Проводят идентификацию РНК вируса методом ПЦР с обратной транскрипцией. Данный способ наиболее информативен с 3 по 7 день от начала заболевания. В качестве исследуемого материала используют сыворотку крови. В научных исследованиях также изучают мочу и сперму.

• Серологические методы. Определяют в динамике нарастание титра специфических IgM антител методом ИФА. Данный метод может давать ложноположительные результаты из-за возможности перекрестных реакций с другими представителями флавивирусов.

• УЗИ плода. Сонография позволяет на антенатальной стадии выявить пороки развития плода. Определяются признаки микроцефалии с уменьшением окружности головы, наличие интракраниальных кальцификатов, вентрикуломегалия.

• Амниоцентез. Не существует единого мнения о необходимости проведения исследования зараженным беременным женщинам. В околоплодных водах вирус Зика обнаруживается спустя 6-8 недель после инфицирования матери. Кроме того, степень выделения патогена в амниотическую жидкость зависит от зрелости почек плода.

Лечение лихорадки Зика

Специфические препараты для терапии Зика-вирусной инфекции на сегодняшний день не разработаны. Проводится симптоматическое лечение. Пациентам рекомендуется обильное питье с целью детоксикации. При выраженном интоксикационном синдроме назначаются инфузионные растворы. До исключения лихорадки денге следует избегать приема НПВС с целью предотвращения геморрагических осложнений. Использование нестероидных препаратов у беременных до 32 недель может вызвать преждевременное закрытие боталова протока у плода. Для уменьшения зуда возможно назначение антигистаминных препаратов. Отдельные авторы рекомендуют прием средств, активизирующих иммунитет (женьшень, элеутерококк).

Лихорадка Эбола - это особо- опасная инфекция, распрост­раненная в ряде тропических стран Африки, которая среди прочих вирусных ге­моррагических лихорадок выделяется тяжестью клинического течения, наи­большей контагиозностью и летальностью, достигающей при некоторых вспышках 90%.

Возбудитель. Вирус Эбола относится к семейству Filoviridae, куда входят также вирусы Марбург и очевидно не патогенный для человека вирус Рестон, выделенный во время эпизоотии среди обезьян- циномольгус в питомниках США, а позднее в Италии.

Современные особенности эпидемиологии. Резервуары и источники возбудителя. Природные резервуары вируса лихорадки Эбола пока не установ­лены.

Механизмы передачи возбудителя. Передача вируса лихорадки Эбола происходит при близком контакте с больными, через их кровь и выделения, главным образом, в результате попадания вируса на поврежденную кожу и слизистые. Воздушно – капельный способ заражения считается мало вероятным. В плохо дезинфицированные шприцы и иглы.

Лабораторная диагностика. Для выделения вируса Эбола обследуют кровь, сыворотку крови или плазму больных, взятую в первые 7-10 дней от начала болезни, а также пробы печени и селезенки, взятые при аутопсии.

Индикацию вируса в инфицированных культурах, а также в средах печени больных проводят с помощью электронной микроскопии или методом флуоресцирующих антител. Попытки выделения вируса и всю работу с материалами, взятыми от больных и трупов, можно проводить только в специально оборудованных лабораториях с соблюдением самого строго режима безопасности.

Эффективным экспресс - методом специфичной диагностики лихорадки Эбола является полимеразная цепная реакция (ПЦР), позволяющая обнаружи­вать специфическую вирусную РНК в вируссодержащих материалах. Разрабо­тан и успешно применен для диагностики лихорадки Эбола у шимпанзе метод гистохимического обследования биопсии кожи.

Специфические антитела к вирусу Эбола в сыворотках крови больных людей обнаруживаются не раньше 5 дня от начала заболевания. Начиная 14 дня анти­тела выявляются регулярно. Для обследования сывороток на иммуноглобулины М и G обычно используют непрямой МФА и иммуноферментный анализа.

Профилактические мероприятия. Вакцина против лихорадки Эбола не разработана.

В эндемичных регионах большое внимание уделяется санитарно- просветительской работе, направленной на осведомление местного населения и приез­жих лиц о лихорадке Эбола и мерах ее профилактики.

Flaviviridae

• Род Flavivirus

• возбудители энцефалитов

• возбудители геморрагических лихорадок

• Род Hepacavirus

• возбудитель гепатита C

По АГ-структуре все флавивирусы делят на 4 подгруппы:

- клещевого энцефалита, - японского энцефалита,- желтой лихорадки,- лихорадки денге.

Вирионы сферической формы. Геномная +РНК одноцепочечная, линейная. Шипы состоят всегда из двух суперкапсидных белков, гликопротеид E1, он обладает гемагглютинирующей активностью, и гликопротеин Е2.

Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ)

Пути заражения: трансмиссивный путь при укусе клещей (80%) и алиментарный путь при употреблении сырого козьего, коровьего или овечьего молока ( 20%)

По степени патогенности, их отношению к культуре ткани ФЭК они разделены на 3 группы:

- вирус восточного энцефалита,

- вирус западного энцефалита

- вирус двухволнового энцефалита, куда включены слабовирулентные штаммы.

По клиническому течению различают два основных варианта заболевания: восточный, протекающий более тяжело и западный, имеющий более легкое течение.

Инкубационный период от 1 до 30 дней, чаще 7-12 дней от момента присасывания клеща.

Симптомы начала заболевания: острое начало, озноб, сильная головная боль, подъем температуры до 38-39°С, тошнота, иногда рвота, боли в мышцах, их подергивание, развиваются менингиальные знаки.

Вирус поражает:

• двигательные нейроны передних рогов шейного сегмента спинного мозга,

• мозжечок,

• мягкую оболочка головного мозга.

Патогенез: вирус-кровь-нейротропный характер (параличи не вызывает, если только как последствие)

Клинические формы

1. Лихорадочная (без поражения ЦНС)

2. Менингеальная форма - 40-60% с изменениями в ликворе

3. Менингоэнцефалитическая (наиболее тяжелая)

4. Полиомиелитическая

5. Полирадикулоневритическая

Лабораторная диагностика

*1. Вирусологический метод.

• Вирусы размножаются в курином эмбрионе при заражении в желточный мешок или аллантоисную полость.

• Хорошо размножаются в культурах клеток почек обезьян и фибробластов куриных эмбрионов, вызывая очаговую мелкозернистую дегенерацию.

• Патогенны для различных животных, особо восприимчивы новорожденные мыши при внутримозговом заражении.

Материал: кровь, ликвор, моча, реже - носоглоточные смывы, испражнения и секционный материал, можно исследовать клещей и молоко при подозрении на алиментарный путь заражения.

1)матрац

2) индикация по ЦПД- бляшки, гемагглютинация

3) идентификация- по антигенным свойствам РН на мышах и РН бляшкообразования, РТГА.

*2. Экспресс-диагностика( Ag в крови (РНГА, ИФА, геном вируса в крови (ПЦР))

* 3. Серодиагностика. Соблюдают подход парных сывороток.

РСК - в конце 2-ой недели, РН – на 3-4 неделе, ИФА во все периоды заболевания

Специфическая профилактика: инактивированная вакцина( вирусы инактивированы формалином)