- •Тема 1. Предмет, задачи, основные этапы и современные направления развития биохимии. Цель и методы проведения биохимических исследований, их клинико-диагностическое значение.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 2. Исследование строения и физико-химических свойств белков-ферментов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Изучить физико-химические свойства белков-ферментов.
- •Тема 3. Определение активности ферментов. Единицы измерения каталитической активности ферментов. Исследование ферментативных процессов по типу реакций основных классов ферментов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 4. Исследование механизма действия ферментов и кинетики ферментативного катализа.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 5. Исследование регуляции ферментативных процессов.
- •Алгоритм лабораторной работы.
- •Тема 6. Медицинская энзимология.
- •Изменение активности ферментов в тканях может служить критерием биохимической диагностики, а изучение динамики этих изменений указывает на эффективность лечения.
- •Чистые ферменты и их смеси широко используются как лекарственные препараты в терапии, хирургии, офтальмологии и других областях медицины.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 7. Исследование роли кофакторов и коферментных витаминов в каталитической активности ферментов.
- •Тема 8. Исследование роли кофакторов и коферментных витаминов в каталитической активности ферментов.
- •Актуальность темы.
- •Тема 9. Фундаментальные закономерности обмена веществ. Общие пути превращений белков, углеводов, липидов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 10. Исследование функционирования цикла трикарбоновых кислот.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 11. Биоэнергетические процессы: биологическое окисление, окислительное фосфорилирование.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 12. Хемиосмотическая теория окислительного фосфорилирования. Ингибиторы и разобщители окислительного фосфорилирования.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 13. Исследование гликолиза – анаэробного окисления глюкозы.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 14. Исследование аеробного окисления глюкозы.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 15. Альтернативные пути обмена моносахаридов. Метаболизм фруктозы и галактозы.
- •Тема 16. Исследование катаболизма и биосинтеза гликогена. Регуляция обмена гликогена.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 17. Глюконеогенез.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 18. Исследование механизмов метаболической и гормональной регуляции обмена углеводов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 19. Исследование катаболизма и биосинтеза триацилглицеролов. Установление молекулярных механизмов регуляции липолиза.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 20. Транспортные формы липидов.
- •Актуальность темы.
- •Количественное определение β- и пре-β-липопротеидов имеет большое значение для диагностики атеросклероза, ишемической болезни сердца (ИБС), ожирения, хронических заболеваниях печени, так как позволяет выявить повреждение паренхимы печени.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 21. Бэта-окисление жирных кислот. Исследование обмена жирных кислот и кетоновых тел.
- •Тема 22. Биосинтез жирных кислот. Обмен сложных липидов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 23. Биосинтез и биотрансформация холестерола. Исследование нарушений липидного обмена: стеаторея, атеросклероз, ожирение.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 24. Исследование превращений аминокислот (трансаминирование, дезаминирование, декарбоксилирование).
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 25. Биосинтез глутатиона и креатина.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 26. Исследование процессов детоксикации аммиака и биосинтеза мочевины.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 27. Биосинтез порфиринов. Наследственные нарушения обмена порфиринов.
- •БИОХИМИЯ ТКАНЕЙ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ
- •Тема 1. Строение и функции нуклеиновых кислот.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 2. Исследование биосинтеза и катаболизма пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. Определение конечных продуктов их обмена.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Знать биохимическую динамику превращения нуклеотидов, основы их патохимии и биохимической диагностики.
- •Индивидуальная самостоятельная работа студента.
- •Подготовить реферат на тему: «Подагра, возможные причины и клинические проявления».
- •Тема 3. Исследование репликации ДНК и транскрипции РНК.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 4. Биосинтез белка на рибосомах. Исследование процессов инициации, элонгации и терминации в синтезе полипептидной цепи. Ингибиторное действие антибиотиков.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 5. Регуляция экспрессии генов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 6. Анализ механизмов мутаций, репараций ДНК. Усвоения принципов получения рекомбинантных ДНК, трансгенных белков.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 7. Исследование молекулярно-клеточных механизмов действия гормонов белково-пептидной природы на клетки-мишени. Гормоны гипоталамуса и гипофиза.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 8. Исследование молекулярно-клеточных механизмов действия стероидных гормонов на клетки-мишени. Стероидные гормоны.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 9. Исследование роли тиреоидных гормонов и биогенных аминов в регуляции метаболических процессов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 10. Гормоны поджелудочной железы. Гормоны пищеварительного тракта.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 11. Гормональная регуляция гомеостаза кальция.
- •Тема 12. Физиологически активные эйкозаноиды.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 13. Исследование процесса переваривания питательных веществ (белков, углеводов) в пищеварительном тракте.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 14. Исследование процесса переваривания питательных веществ (липидов) в пищеварительном тракте.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 15. Исследование функциональной роли жирорастворимых витаминов в метаболизме и реализации клеточных функций.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 16. Исследование белков плазмы крови: белков острой фазы воспаления, собственных и индикаторных белков.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 17. Исследование кислотно-основного состояния крови и дыхательной функции эритроцитов. Патологические формы гемоглобинов.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 18. Исследование азотистого обмена и небелковых азотосодержащих компонентов крови – конечных продуктов катаболизма гема.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 19. Исследование биохимических закономерностей реализации иммунных процессов. Иммунодефицитные состояния.
- •Тема 20. Биохимия печени. Патобиохимия желтух.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •17,1 34,2 51,3 68,4 85,5 102,6 мкмоль/л
- •Тема 22. Исследование нормальных компонентов мочи.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 23. Исследование патологических компонентов мочи.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 24. Биохимия мышц и мышечного сокращения.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 25. Биохимия соединительной ткани.
- •Цель и исходный уровень знаний.
- •Тема 26. Биохимия костной ткани. Факторы риска остеопороза.
- •Тема 27. Биохимия нервной ткани.
- •Цель и начальный уровень знаний.
- •ИТОГОВЫЙ КОНТРОЛЬ УСВОЕНИЯ МОДУЛЯ
- •СОДЕРЖАНИЕ
Тема 6. Медицинская энзимология.
Актуальность темы.
Уменьшение концентрации или полное отсутствие какого-нибудь фермента в живой системе является результатом генетической неспособности к его биосинтезу и проявляется специфической патологией. В настоящее время известно около 150
таких энзимопатий (в обмене простых и сложных белков, в обмене углеводов, липидов и азотистых оснований).
Изменение активности ферментов в тканях может служить критерием биохимической диагностики, а изучение динамики этих изменений указывает на эффективность лечения.
Чистые ферменты и их смеси широко используются как лекарственные препараты в терапии, хирургии, офтальмологии и других областях медицины.
Цель и исходный уровень знаний.
Общая цель.
Объяснить изменения хода ферментативных процессов и накопления промежуточных продуктов метаболизма при врожденных (наследственных) и
приобретенных пороках метаболизма – энзимопатиях.
Конкретные цели:
1.Анализировать изменения активности индикаторных ферментов плазмы крови при патологии определенных органов и тканей.
2.Объяснить применение ферментных препаратов и ингибиторов ферментов как фармакологических препаратов при определенных патологических состояниях.
Исходный уровень знаний-умений:
1.Знать строение глутарата, пирувата и α-аминокислот.
2.Знать принцип колориметрии и порядок работы на ФЕК.
Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке.
|
Содержание и |
|
|
Указания к учебным действиям |
||||
последовательность действий |
|
|
|
|
|
|
||
1. |
Практическое |
изучение |
|
1.1. В тетрадь протоколов записать |
||||
определения активности АсАТ и АлАТ в |
алгоритм лабораторной работы. |
|||||||
сыворотке крови. |
|
|
|
|
|
|
|
|
2. Медицинская энзимодиагностика. |
|
2.1. |
Современные |
|
аспекты |
|||
|
|
|
энзимодиагностики: |
клеточные, |
||||
|
|
|
секреторные |
та |
экскреторные |
|||
|
|
|
ферменты. |
|
|
|
||
|
|
|
|
2.2. |
|
Изоферменты |
в |
|
|
|
|
энзимодиагностике, |
|
тканевая |
|||
|
|
|
специфичность |
распределения |
||||
|
|
|
ферментов. |
|
|
|
||
|
|
|
|
2.3. |
Изменение |
активности |
||
|
|
|
ферментов плазмы и сыворотки крови |
|||||
|
|
|
как |
диагностические |
показатели |
|||
|
|
|
развития |
патологических |
процессов в |
|||
|
|
|
организме. |
|
|
|
||
|
|
|
|
2.4. Применение энзимодиагностики |
||||
|
|
|
в |
кардиологии, |
гепатологии, |
|||
|
|
|
нефрологии, |
урологии, |
онкологии, |
|||
|
|
|
пульмонологии, |
ортопедии, |
и тому |
14
|
|
|
подобное (примеры). |
|
|
|
|
||
3. Энзимопатология. |
|
3.1. |
Нарушение |
протекания |
|||||
|
|
|
ферментативных |
|
|
процессов: |
|||
|
|
|
наследственные |
и |
приобретенные |
||||
|
|
|
энзимопатии. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3.2. |
Врожденные |
|
пороки |
|||
|
|
|
метаболизма и их клинико-лабораторное |
||||||
|
|
|
исследование. |
|
|
|
|
|
|
4. |
Энзимотерапия в |
медицинской |
4.1. |
Использование ферментов |
в |
||||
практике. |
|
качестве лекарственных средств. |
|
|
|||||
|
|
|
4.2. |
|
Фармакологическое |
||||
|
|
|
применение ферментов |
желудочно- |
|||||
|
|
|
кишечного тракта; свертываемой и |
||||||
|
|
|
фибринолитической |
системы |
крови, |
||||
|
|
|
каликреин-кининовой |
|
и |
ренин- |
|||
|
|
|
ангиотензиновой систем. |
|
|
|
|||
5. |
Применение |
ингибиторов |
5.1. |
Ингибиторы |
ферментов |
как |
|||
ферментов в медицине. |
|
лекарственные средства. |
|
|
|
Индивидуальная самостоятельная работа студентов.
Подготовить реферативное сообщение по теме:
1.Энзимопатология.
2.Энзимодиагностика заболеваний миокарда, печени.
3.Энзимотерапия.
Алгоритм лабораторной работы.
Количественное определение активности АсАТ и АлАТ в сыворотке крови.
Принцип метода: определяется оптическая плотность раствора гидразона
кетоглутарата и пирувата, которые образуются при взаимодействии аланина (или аспартата) с кетоглутаратом. Определение проводят в 1 см кювете при длине волны λ
– 500-530 нм. При определении АсАТ – пируват образуется путем декарбоксилирования оксалоацетата.
Реактивы:
1.Эталонные 2 мМ раствора пирувата.
2.1 мМ раствор 2,4-динитрофенилгидразина в 1 М НCl.
3.Раствор NаОН (16 ч. в 1000 мл Н2О).
4.Субстрат АсАТ: а) 0,1 мМ раствор аспартата;
б) 0,2 мМ раствор кетоглутарата;
в) фосфатный буфер рН-7,4. 5. Субстрат АлАТ: а) 0,2 мМ раствор аланина;
б) 0,2 мМ раствор кетоглутарата; в) фосфатный буфер рН-7,4.
Определение активности АсАТ.
Реактивы, |
Опытная проба |
Контроль |
последовательность |
|
|
действия |
|
|
Реактив 4 |
0,25 мл |
0,25 мл |
Физраствор |
--- |
0,05 мл |
Сыворотка крови |
0,05 мл |
--- |
Инкубация до 60 мин. |
|
|
При t = 23 оС |
+ |
+ |
15